[發明專利]一種中性內切葡聚糖酶及其編碼基因與應用

有效

• 申請號: 201510036517.0
• 申請日: 2015-01-23
• 公開（公告）號: CN104673771B
• 公開（公告）日: 2017-12-19
• 發明（設計）人: 劉森林;區曉陽;邢苗;陳偉釗
• 申請（專利權）人: 深圳大學
• 主分類號: C12N9/42
• 分類號: C12N9/42;C12N15/56;C12N15/70;C12N1/21;C11D3/386;D21D1/02
• 代理公司: 廣州市華學知識產權代理有限公司44245
• 代理人: 裘暉

1.一種中性內切葡聚糖酶H31，其特征在于：其氨基酸序列如SEQ ID No：2所示。

2.編碼權利要求1所述的中性內切葡聚糖酶H31的基因，其特征在于：所述的基因的核苷酸序列如SEQ ID No：1所示。

3.一種含有權利要求2所述的基因的表達載體。

4.根據權利要求3所述的表達載體，其特征在于：所述的表達載體為適于在大腸桿菌中表達的載體。

5.根據權利要求4所述的表達載體，其特征在于：權利要求2所述的基因被插入至pET-28a(+)載體中。

6.根據權利要求5所述的表達載體，其特征在于：權利要求2所述的基因被插入至pET-28a(+)載體中的EcoR I和Hind III酶切位點之間。

7.一種中性內切葡聚糖酶H31的菌株，其特征在于：是將權利要求2所述的基因構建成載體后轉染到大腸桿菌(Escherichia coli)BL21 Star(DE3)得到。

8.根據權利要求7所述的表達中性內切葡聚糖酶H31的菌株，其特征在于：所述的載體為權利要求3～6任一項所述的表達載體。

9.根據權利要求7或8所述的表達中性內切葡聚糖酶H31的菌株，其特征在于包括如下步驟：

用PCR方法從嗜堿鏈霉菌(Streptomyces sp.)H31的基因組DNA中克隆出權利要求2所述的中性內切葡聚糖酶H31基因的酶基因全長，將其插入到原核表達載體pET-28a(+)中，得到重組質粒pET-28a-H31，并轉化大腸桿菌E.coli BL21 Star(DE3)菌株；經過篩選后得到表達所述的中性內切葡聚糖酶H31的菌株E.coli BL21 Star(DE3)-H31。

10.權利要求1所述的中性內切葡聚糖酶H31在洗滌及造紙工業中的應用。