[發(fā)明專(zhuān)利]一種檢測(cè)細(xì)菌氨基糖苷類(lèi)耐藥基因的引物及試劑盒

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201510033921.2
• 申請(qǐng)日: 2015-01-23
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN104561340B
• 公開(kāi)（公告）日: 2017-09-22
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 任緒義;虞閏六
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 杭州迪安醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中心有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): C12Q1/68
• 分類(lèi)號(hào): C12Q1/68;C12N15/11
• 代理公司: 南京蘇高專(zhuān)利商標(biāo)事務(wù)所(普通合伙)32204
• 代理人: 肖明芳

1.一種用于檢測(cè)細(xì)菌氨基糖苷類(lèi)耐藥基因的引物，其特征在于，它包括如下引物對(duì)：

(1)擴(kuò)增aac(3)-II耐藥基因的引物對(duì)，其核苷酸序列如SEQ ID NO：1～2所示；

(2)擴(kuò)增aac(6')-Ib耐藥基因的引物對(duì)，其核苷酸序列如SEQ ID NO：3～4所示；

(3)擴(kuò)增aph(3')-III耐藥基因的引物對(duì)，其核苷酸序列如SEQ ID NO：5～6所示；

(4)擴(kuò)增ant(3”)-1a耐藥基因的引物對(duì)，其核苷酸序列如SEQ ID NO：7～8所示；

(5)擴(kuò)增ant(4')-1a耐藥基因的引物對(duì)，其核苷酸序列如SEQ ID NO：9～10所示；

上述5對(duì)引物對(duì)在一次檢測(cè)中共同使用。

2.權(quán)利要求1所述的用于檢測(cè)細(xì)菌氨基糖苷類(lèi)耐藥基因的引物在制備檢測(cè)細(xì)菌氨基糖苷類(lèi)耐藥基因的試劑中的應(yīng)用。

3.一種檢測(cè)細(xì)菌氨基糖苷類(lèi)耐藥基因的試劑盒，其特征在于，該試劑盒包括如下試劑：

(1)PCR反應(yīng)液：該P(yáng)CR反應(yīng)液中含有DNA聚合酶、EvaGreen熒光染料、Mg²⁺、PCR反應(yīng)緩沖液、dATP、dCTP、dTTP和dGTP；

(2)引物混合液：將SEQ ID NO：1～10所示的10種引物混合，用雙蒸水溶解，每條引物的濃度為1μmol/L；

(3)陽(yáng)性對(duì)照：分別含有aac(3)-II、aac(6')-Ib、aph(3')-II、ant(3”)-1a和ant(4')-1a耐藥基因的五種細(xì)菌基因組DNA和大腸桿菌基因組DNA的水溶液；

(4)陰性對(duì)照：大腸桿菌基因組DNA的水溶液。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的檢測(cè)細(xì)菌氨基糖苷類(lèi)耐藥基因的試劑盒，其特征在于，陽(yáng)性對(duì)照中，每一種含耐藥基因的細(xì)菌基因組DNA濃度為10ng/μL，大腸桿菌基因組DNA濃度為50ng/μL。

5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的檢測(cè)細(xì)菌氨基糖苷類(lèi)耐藥基因的試劑盒，其特征在于，陰性對(duì)照中，大腸桿菌基因組DNA的濃度為100ng/μL。