[發明專利]用于檢測釀膿鏈球菌的LAMP試劑盒及其專用引物

有效

• 申請號: 201510031436.1
• 申請日: 2015-01-22
• 公開（公告）號: CN104630354B
• 公開（公告）日: 2017-07-18
• 發明（設計）人: 袁靜;趙向娜;賀曉明;李環;黃思妺;劉威
• 申請（專利權）人: 中國人民解放軍疾病預防控制所
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12Q1/14;C12N15/11;C12R1/46
• 代理公司: 北京尚誠知識產權代理有限公司11322
• 代理人: 魯兵

1.用于檢測釀膿鏈球菌的LAMP引物，是根據釀膿鏈球菌轉錄調控基因spy1258的特異性保守靶序列設計的，用以定性檢測純菌、痰液、腦脊液及其它分泌物樣品中的釀膿鏈球菌，所述LAMP引物由五條引物組成，包括序列表中SEQ ID NO：2和SEQ ID NO：3所示的外引物F3和B3、序列表中SEQ ID NO：4和SEQ ID NO：5所示的內引物FIP和BIP、以及序列表中SEQ ID NO：6所示的環引物LF的組合；所述釀膿鏈球菌轉錄調控基因spy1258的特異性保守靶序列如序列表中SEQ ID NO：1所示。

2.根據權利要求1所述的LAMP引物，其特征在于：所述的LAMP引物，為F3和B3、FIP和BIP、以及LF按摩爾比5:40:20的組合物。

3.一種用于對釀膿鏈球菌進行LAMP檢測的試劑盒，包括權利要求1或2所述用于對釀膿鏈球菌進行LAMP檢測的引物。

4.根據權利要求3所述的試劑盒，其特征在于：所述試劑盒包括以下用于25μl反應體系的試劑：20mM pH 8.8的Tris·HCl，10mM KCl，10mM(NH₄)₂SO₄，0.1％Tween20，0.8M甜菜堿，8mM MgSO₄，1.4mM dNTP each，8U Bst DNA polymerase，引物加入量為：40pmol引物FIP和BIP，5pmol引物F3和B3，20pmol引物LF。

5.根據權利要求4所述的試劑盒，其特征在于：所述試劑盒中還包括陽性對照和陰性對照，所述陽性對照為釀膿鏈球菌標準株基因組DNA，所述陰性對照為雙蒸水。