[發明專利]蛋白激酶抑制劑香豆素及其制備方法和醫藥應用

有效

• 申請號: 201510026529.5
• 申請日: 2015-01-20
• 公開（公告）號: CN104529972A
• 公開（公告）日: 2015-04-22
• 發明（設計）人: 張娜;周玥;陳文娟;鐘儒剛
• 申請（專利權）人: 北京工業大學
• 主分類號: C07D311/16
• 分類號: C07D311/16;A61P35/00
• 代理公司: 北京思海天達知識產權代理有限公司 11203
• 代理人: 張慧

技術領域

本發明屬于藥物化學技術領域，具體涉及蛋白激酶抑制劑香豆素的靶向設計、及其制備方法以及其在抗腫瘤細胞增殖中的應用。

背景技術

蛋白激酶是細胞內最大的蛋白家族之一，人類基因組內共含有500多個蛋白激酶基因。其要功能是將ATP的γ磷酸基轉移到底物蛋白特定的氨基酸上，進而調節底物蛋白的活性，在調節代謝、基因表達、細胞生長、分裂和分化等方面起關鍵作用。與腫瘤發生、發展密切相關，成為熱門的抗癌靶點，并已有十余種蛋白激酶抑制劑作為抗癌藥物成功上市。蛋白激酶CK2是一種多功能的絲氨酸/蘇氨酸類蛋白激酶，通過磷酸化多種底物，參與誘導細胞生長、抑制細胞凋亡及調節信號通路中癌基因和抑癌基因的活性等生理過程，具有促增長且抗凋亡的特性而成為重要的抗癌靶標。人源CK2全酶結構是由兩個催化亞基(α和/或α')和兩個調節亞基β構成的不均一四聚體。其中CK2α是由富含β-折疊的N端、富含α-螺旋結構的C端和位于兩結構域之間的催化活性口袋組成。

香豆素類化合物及其衍生物在自然界中分布極其廣泛，具有抗菌、消炎、抗腫瘤、抗凝結等生物活性，具有潛在的藥用價值，被認定為重要的藥物先導化合物?，F有技術表明，7-羥基香豆素類化合物僅與活性口袋形成單一的極性作用，因此對蛋白激酶CK2表現出中等程度的抑制活性。針對7-羥基香豆素化合物骨架，選擇恰當的取代位置進行官能團修飾，以期得到具有高CK2抑制活性及抗腫瘤細胞增殖活性的化合物。

發明內容

本發明涉及4-三氟甲基-7-羥基-8-氯香豆素及其制備方法，及其在蛋白激酶抑制劑和抗腫瘤細胞增殖醫藥領域中的應用。

ATP競爭性抑制劑通過結合到催化活性口袋而發揮抑制功能。其中該靶酶的催化活性口袋主要由鉸鏈區(Glu114，Val116)、正電性區(Lys68，Glu81和水分子1)及疏水區(Val66，F113，Met163和Ile174)三個亞位點組成。針對僅與CK2催化活性口袋正電性區形成單一極性作用7-羥基香豆素類化合物，本發明人提出能夠與結合口袋各亞位點形成作用(尤其可同時與鉸鏈區和正電性區形成極性作用)是保證化合物具有高抑制活性的重要結構基礎。因此，本發明人基于7-羥基香豆素骨架結構，為增加化合物與鉸鏈區氨基酸Glu114和Val116的極性作用，選擇恰當的取代位置進行適當的官能團修飾，提出在R₄位引入CF₃取代基，以得到具有高蛋白激酶CK2抑制活性及抗腫瘤細胞增殖活性的化合物。

本發明提供結構式1所示4-三氟甲基-7-羥基-8-氯香豆素或其可藥用鹽(本發明的4-三氟甲基-7-羥基-8-氯香豆素，當其羥基以氧負離子形式存在時，可與陽離子結合形成化合物鹽，如鈉鹽、鉀鹽、銨鹽等)。

4-三氟甲基-7-羥基-8-氯香豆素的結構式如下：

結構式1所示香豆素化合物制備方法：將化合物2(2-氯-1,3-苯二酚)分散于無機酸水溶液中，隨后加入化合物3(三氟乙酰乙酸乙酯)，該反應液在攪拌下加熱的條件下反應，反應完全后，恢復至室溫，分液。洗滌，干燥，分離，即得制得結構式1。

優選無機酸水溶液的質量濃度60％-80％。加熱的溫度至60℃-90℃；反應1小時-3小時。

優選化合物2：無機酸水溶液：化合物3為(0.2-0.6)g：(1-3)mL：(0.20-0.40)mL。

化學反應式如下：

進一步，所述無機酸為鹽酸、硫酸和高氯酸中的任一種，用飽和碳酸氫鈉和乙酸乙酯分液。有機相用飽和食鹽水洗滌后，以無水硫酸鎂干燥，柱層析分離(正己烷：乙酸乙酯＝2：1)。

結構式1所示的香豆素化合物或其可藥用鹽作為蛋白激酶抑制劑的應用。

進一步，結構式1所示的香豆素化合物或其可藥用鹽作為蛋白激酶CK2抑制劑，其IC₅₀值為0.4μM，優于未被三氟甲基取代的香豆素類化合物。

結構式1所示的香豆素化合物或其可藥用鹽作為抗腫瘤藥物中的應用。

進一步，結構式1所示的香豆素化合物具有一定抗腫瘤細胞增殖的活性。腫瘤細胞包括肺癌細胞A549、宮頸癌細胞Hela以及乳腺癌細胞MCF-7中的一種或幾種。

具體實施方式

下面結合實施例對本發明做進一步說明書，但本發明并不限于以下實施例。

實施例1

結構式1所示化合物的制備方法