[發明專利]3-氯-1，2-丙二醇的高效液相色譜-熒光檢測方法

有效

• 申請號: 201510020204.6
• 申請日: 2015-01-15
• 公開（公告）號: CN104597194A
• 公開（公告）日: 2015-05-06
• 發明（設計）人: 張維農;胡志雄;齊玉堂
• 申請（專利權）人: 武漢輕工大學
• 主分類號: G01N30/89
• 分類號: G01N30/89
• 代理公司: 武漢開元知識產權代理有限公司 42104
• 代理人: 杜傳青

技術領域

本發明涉及一種3-氯-1，2-丙二醇的高效液相色譜-熒光檢測方法，屬于分析化學領域。

背景技術

3-氯-1,2-丙二醇又稱3-氯丙二醇或氯甘油，其英文名為3-monochloro-1,2-propanediol，簡寫3-MCPD，其化學結構式為：CH₂Cl-CHOH-CH₂OH。3-MCPD是一種一氯代二元醇，為無色有甜味的液體，凝固點-40℃，沸點213℃(分解)，相對密度1.3218(20℃)，折射率1.4809(20℃)，溶于水、乙醇、乙醚和丙酮，微溶于甲苯，不溶于苯、石油醚和四氯化碳；不穩定，放置后漸變為稻黃色，易吸潮。

近年來的毒性研究表明，3-MCPD對人體健康具有較強的危害，已經成為一種國際公認的食品化學污染物，其毒性主要表現為：①急、慢性毒性：3-MCPD的大鼠經口半數致死量LD₅₀為150mg/kg.bw。雄性大鼠連續經口染毒3-MCPD?1mg/kg/day以上劑量時，可以出現精子活動減弱和生殖力降低，劑量大于或等于10-20mg/kg/day，可見大鼠的精子有顯著的形態學改變和附睪損傷；②遺傳毒性：目前大多數研究機構和學者認為3-MCPD屬于非遺傳毒性致癌物，暫定每日最大耐受量(TDI)為2μg/kg.bw；③致癌性：英國致癌委員會(Committee?on?carcinoginicity)認為，3-MCPD在動物實驗中會引起致癌；而英國致變異委員會(Committee?on?Mutagenicity)認為，3-MCPD在體內實驗中，是一個非基因毒性的致癌物質；④神經毒性：小鼠和大鼠對3-MCPD的神經毒性作用敏感性相同，尤其是對腦干的對稱性損傷。當3-MCPD染毒劑量大于25mg/kg.bw/day時，實驗動物中樞神經系統損傷呈現顯著的劑量效應關系。

食品中氯丙醇的污染首先是在以酸水解植物蛋白(HVP)為原料的調味品(如雞精和醬油等)中發現的，以后又陸續在麥芽提取物、變性淀粉、肉類提取物、餅干、面包、香腸、谷物類等中檢出。2006年捷克的Zelinková?Z.等人首先發現在食用油中存在氯丙醇脂肪酸酯。2007年Seefelder?W.等人研究發現在精煉油脂中氯丙醇脂肪酸酯的含量范圍在0.2～20mg/kg之間，其中精煉植物油按照菜籽油、大豆油、葵花籽油、紅花油、核桃油和棕櫚油的數序遞增。

環境水體中，由于工業廢水的排放會導致一定程度的3-MCPD污染，如酸水解植物蛋白生產廢水的排放、紙漿生產過程中濕強劑-聚酰胺聚胺表氯醇樹脂的使用都是產生3-MCPD污染的重要來源，如不經處理會導致附近水體的污染；另外，在水處理過程中多胺絮凝劑的使用也會產生一定程度的3-MCPD污染。

正由于3-MCPD對人體危害嚴重，許多國家都制定了限量標準來控制食品及飲用水中的該項污染物，如歐盟在2001年制訂了限量標準，規定不得超過每日20μg/kg.bw的攝入量；我國也建立了檢測醬油中3-MCPD的國家標準。英國飲用水檢查機構(Drinking?Water?Inspectorate)規定飲用水中3-MCPD的最大含量不得超過0.1mg/L。由于食品及飲用水中3-MCPD安全限均達到ppb級，故必須采用靈敏度高的檢測方法才能達到監控要求，目前常用的手段主要為氣相色譜(GC)、氣相色譜-質譜聯用(GC-MS)。由于3-MCPD的極性與沸點較高，測定過程中均需要將3-MCPD從基質中富集、萃取出來，然后進行衍生化。常用的萃取方法有液-液萃取(LLE)、基質固相分散萃取(MSPD)、固相微萃取(SPME)等；而衍生化方法則主要有酮類衍生、硼酸類衍生(苯基硼酸、丁基硼酸)、N,O-雙三甲基-三氟乙酰胺(BSTFA)、酸酐類衍生(HFBA)、七氟丁酰咪唑(HFBI)等。然而，由于3-MCPD水溶性好，沸點較高，故基于氣相色譜測定3-MCPD的分析方法具有前處理過程復雜、繁瑣，衍生化條件苛刻、儀器使用維護成本高等缺點。鑒于此，發展基于高效液相色譜的成本低、簡便易行的高靈敏檢測方法具有十分重要的意義，專利CN102565270首次報道了一種結合高碘酸氧化裂解、堿基或核苷(核苷酸)衍生化的反相液相色譜-熒光檢測法，該方法測試成本低、操作簡單、靈敏度高，可適用于油脂、醬油等食品中3-MCPD的測定，不過，由于所使用的熒光衍生化試劑親水性太強，目標產物在反相液相色譜中保留較弱，測定食品類復雜樣品時可能易受到基質效應的干擾，影響測定的準確度與重現性，因此，開發新型熒光性能好、疏水性更強的熒光衍生化試劑將更加有利于發揮該方法的長處與優勢。