[發明專利]具有延長的體內半壽期的因子IX類似物

無效

• 申請號: 201510017264.2
• 申請日: 2007-05-24
• 公開（公告）號: CN104593348A
• 公開（公告）日: 2015-05-06
• 發明（設計）人: H.奧斯特加德;O.H.奧爾森;H.R.斯特尼克;T.D.斯蒂恩斯特魯普
• 申請（專利權）人: 諾沃—諾迪斯克保健股份有限公司
• 主分類號: C12N9/96
• 分類號: C12N9/96;C12N9/64;A61K38/48;A61K47/48;A61P7/04
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司 72001
• 代理人: 杜艷玲;萬雪松

本申請是國際申請日為2007年5月24日、國際申請號為PCT/EP2007/055031、進入國家階段的申請號為200780019090.7、發明名稱為“具有延長的體內半壽期的因子IX類似物”的PCT申請的分案申請。

技術領域

本發明涉及凝血因子IX(FIX)類似物及衍生物，與天然的因子IX相比，它們在血流中的循環時間延長。

背景技術

因子IXa(FIXa)是胰蛋白酶樣絲氨酸蛋白酶，在止血過程中發揮重要作用，它是凝血因子X酶復合物的組成部分，產生大部分的因子Xa，因子Xa在凝血過程中參與凝血酶的形成(見綜述(Hoffman和Monroe，III?2001))。先天性因子IXa缺乏導致X-連鎖出血性疾病-血友病B，男性發病率約為1∶100,000。目前，血友病B的治療主要是使用重組或血漿凝血因子IX的替代療法。然而，目前的觀點正由傳統的按需治療轉變為預防性治療。當前的預防性治療需要每周多次給藥，但要達到最佳的血漿濃度和藥效，最好每天注射一次。但考慮到每天給藥的實用性和經濟限制，目前尚不能用于患者的治療。因而，顯然需要一種長效的重組因子IX藥物。

WO?2006005058涉及因子IX的一部分與一種或多種分子量為5-150kDa的水溶性聚合物的結合體。WO?2006018204涉及修飾的維生素K依賴性多肽，包括修飾的激活肽。WO?2004101740涉及嵌合蛋白，至少包括一種凝血因子和部分免疫球蛋白恒定區。WO?2005001025涉及嵌合單體-二聚體雜交蛋白，其中該蛋白的第一條多肽鏈包括部分免疫球蛋白恒定區和生物活性分子，第二條多肽鏈包括不含生物活性分子的部分免疫球蛋白恒定區。US?2006040856涉及因子IX和聚乙二醇的結合，聚乙二醇通過完整的糖基連接起來并連接到多肽和修飾基上。

SE?9501285A公開了使用一種混合物在體外合成具有適當折疊和二硫化物交聯的生物活性蛋白的方法，該混合物包括蛋白二硫化物氧化還原酶(如蛋白二硫化物異構酶(PDI))，谷氧還蛋白和氧化還原體系。參考文獻主要是關于參與分子內二硫鍵形成的半胱氨酸殘基。

WO?2006/134173涉及至少包含一個非天然半胱氨酸殘基的重組工程化蛋白的選擇性還原和衍生方法，重組蛋白包括因子IX多肽在內。

本發明的目的是提供修飾的FIX類似物或衍生物，與天然FIX相比，它們在血流中的循環時間延長，但仍能維持足夠的生物活性參與凝血。

發明內容

一方面，本發明涉及循環半壽期延長的FIX類似物，其中在下列位點的天然氨基酸殘基中至少有一個被結合(conjugate)化學基團的半胱氨酸殘基殘基取代，所述化學基團使得FIX多肽的分子量增加，所述位點為第44、46、47、50、53、57、66、67、68、70、72、74、80、84、87、89、90、91、94、100、101、102、103、104、105、106、108、113、116、119、120、121、123、125、129、138、140、141、142、146-180、185、186、188、189、201、202、203、224、225、228、239、240、241、243、247、249、252、257、260、261、262、263、265、277、280、314、316、318、321、341、372、374、391、392、406、410、413或415位。

在優選實施方案中，FIX類似物在下列位點的天然氨基酸殘基中至少有一個被結合化學基團的半胱氨酸殘基取代，所述化學基團使得FIX多肽的分子量增加，所述位點為第44、46、47、50、53、57、66、67、68、70、72、74、80或84位。

在另一優選實施方案中，FIX類似物在下列位點的天然氨基酸殘基中至少有一個被結合化學基團的半胱氨酸殘基取代，所述化學基團使得FIX多肽的分子量增加，所述位點為第87、89、90、91、94、100、101、102、103、104、105、106、108、113、116、119、120、121、123、125、129、138、140、141或142位。