[發明專利]一種含有15N—L—脯氨酸殘基的三肽減皺化合物及其制備方法和應用

在審

• 申請號: 201510017162.0
• 申請日: 2015-01-14
• 公開（公告）號: CN104592347A
• 公開（公告）日: 2015-05-06
• 發明（設計）人: 張嘎;張賁;丁文鋒
• 申請（專利權）人: 張嘎
• 主分類號: C07K5/023
• 分類號: C07K5/023;C07K1/06;C07K1/04;A61K38/06;A61K8/64;A61Q19/08;A61P17/00
• 代理公司: 鄭州聯科專利事務所(普通合伙)41104
• 代理人: 劉建芳;楊海霞

技術領域

本發明屬于藥用化妝品技術領域，具體涉及一種含有¹⁵N—L—脯氨酸殘基的三肽減皺化合物及其制備方法和應用。

背景技術

皺紋的形成主要是由肌肉強烈收縮或肌肉長時間保持在強烈收縮位置所造成。

目前，治療面部皺紋的主要方法是注射肉毒桿菌毒素A，通過將肉毒桿菌毒素A注入面部肌肉的方式使面部肌肉麻痹。這樣，位于眼部或額頭的肌肉就不能再活動，從而使得眼部或額頭皺紋不易出現。然而，使用皮下注射肉毒桿菌毒素A的治療必須由專業醫生來實施，同時與之相關的高額費用及較高的毒性也限制了肉毒桿菌毒素A的廣泛應用。此外，其作用僅能持續3—6個月，之后就必須重復注射治療。

肉毒桿菌毒素A的作用機制在于其選擇性地阻斷乙酰膽堿在神經肌肉突觸處的釋放，由此出現肌肉麻痹；這是通過一種被稱為SNAP—25蛋白質的裂解來實現的。

SNAP—25蛋白的N—末端氨基酸序列（Glu—Glu—Met—Gln—Arg—Arg—NH₂）能抑制在突觸中Ca⁺⁺依賴性神經遞質的釋放，并導致肌肉松弛。由此開發的、可局部施用的化合物Ac—Glu—Glu—Met—Gln—Arg—Arg—NH₂（阿基瑞林）比肉毒桿菌毒素A的作用約弱5000倍，從而使其能更好地按劑量給藥并且幾乎無毒性。然而，它的松弛肌肉作用太弱且極不穩定，甚至于不能達到較滿意的減少皺紋的效果。

急需尋找毒性更低，減皺效果更好的化合物以滿足市場的需求。中國專利200580039359.9公開了一種結構更為簡化的三肽化合物，其中的化合物4.5?和4.6在細胞水平的試驗中在2小時和48小時顯示了比阿基瑞林更好的減皺效果，然而其在更長時間的減皺實驗中卻未能顯示令人滿意的減皺效果，且在人體試驗測試中也未能顯示更好的臨床適用性。因此，還需要尋找減皺效果持續時間更長、具有更好臨床適用性的結構簡單的減皺化合物，以滿足臨床需要。

自然界的氮是由氮14和氮15兩種穩定同位素組成的，其中氮14的含量約為99.63%，其原子量為14.0037，氮15的含量約為0.365%，其原子量為15.0001。由于普通的氮缺乏適用的放射性同位素示蹤原子，氮15就成為化學、醫學、農業科學等研究應用領域中的重要示蹤原子（穩定性同位素示蹤原子），它是一種對人體無輻射危害、損傷的安全的示蹤劑。至上世紀80年代初，國際上已有數百種氮15標記化合物用于各項研究和應用，為此還有專用的氮15光譜分析儀。醫學研究中，在對藥物作用、藥物分布、藥物代謝等情況進行了解掌握時，氮15標記化合物的應用發揮出其功能顯著的示蹤劑作用。

氮15除具有同位素示蹤特性外，通常情況下與氮14的性能并沒有差別。但是，本發明人在對減皺化合物進行研究時令人驚訝地發現，將某些具有減皺效果的三肽化合物中的脯氨酸的氮原子替換為氮15后，該三肽化合物不僅具有了同位素示蹤性，而且大大延長了減皺的持續效果，更在臨床試驗中顯示了意想不到的持續減皺效果，進一步滿足了臨床需要，從而完成了本發明。

發明內容

本發明目的在于提供一種含有¹⁵N—L—脯氨酸殘基的三肽減皺化合物及其制備方法和應用。

為實現上述目的，本發明采用如下技術方案：

一種含有¹⁵N—L—脯氨酸殘基的式（I）所示的三肽化合物或其與酸形成的鹽：

?????????????????????????????（I）

該化合物也可以用縮寫H—（β-Ala）—（¹⁵N-Pro）—Dab—NH—Bzl表示；其中：

β-Ala為β—丙氨酸殘基；

^???15N-Pro為氮元素為氮15的L—脯氨酸殘基；

??Dab為L—2,4二氨基丁酸殘基；

Fmoc為9－芴基甲氧基羰基；

Boc為叔丁氧羰基；

Bzl為芐基。

上述三肽化合物可與酸形成單價或多價的、均質或混合的鹽。具體的，所述鹽可以為鹽酸鹽、氫溴酸鹽、硫酸鹽、磷酸鹽、甲酸鹽、乙酸鹽、三氟乙酸鹽、三氯乙酸鹽、丙酸鹽、乙醇酸鹽、琥珀酸鹽、富馬酸鹽、丙二酸鹽、馬來酸鹽、草酸鹽、鄰苯二甲酸鹽、檸檬酸鹽、乳酸鹽、酒石酸鹽、苯甲酸鹽、水楊酸鹽、扁桃酸鹽、肉桂酸鹽、煙酸鹽、甲磺酸鹽或甲苯磺酸鹽。其中優選為鹽酸鹽或乙酸鹽。