[發(fā)明專利]一種肉食雞的優(yōu)良屠宰性狀分子遺傳標(biāo)記及其應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201510015900.8
• 申請日: 2015-01-13
• 公開（公告）號: CN104593363B
• 公開（公告）日: 2017-04-12
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 林浴霜;王丹丹;胡瑋;曹頂國;周艷;雷秋霞
• 申請（專利權(quán)）人: 山東大學(xué)
• 主分類號: C12N15/11
• 分類號: C12N15/11;C12Q1/68
• 代理公司: 濟(jì)南圣達(dá)知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司37221
• 代理人: 李健康

1.一種肉食雞的優(yōu)良屠宰性狀分子遺傳標(biāo)記，該標(biāo)記是雞plin1基因單核苷酸多態(tài)性序列上的多態(tài)性位點(diǎn)，其特征在于：所述雞plin1基因單核苷酸多態(tài)性序列的多態(tài)性位點(diǎn)是在plin1基因序列第八外顯子的第49位為A或T的堿基多態(tài)性位點(diǎn)，表現(xiàn)為AA、AT或TT三種基因型，其中TT型為肉食雞的優(yōu)良屠宰性狀分子遺傳標(biāo)記。

2.權(quán)利要求1所述肉食雞的優(yōu)良屠宰性狀分子遺傳標(biāo)記在輔助篩選或預(yù)測具備優(yōu)良屠宰性狀的肉食雞品種中的應(yīng)用。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的應(yīng)用，方法是：以待檢測雞plinl基因組DNA為模板，以引物對plin1E8F/E8R進(jìn)行PCR擴(kuò)增，擴(kuò)增完成后進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳，然后使用特定的限制性核酸內(nèi)切酶對擴(kuò)增出的目的片段進(jìn)行酶切；之后對酶切產(chǎn)物再一次進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳，來檢測酶切產(chǎn)物的片段大小，分析確定雞plin1基因的堿基多態(tài)性位點(diǎn)，當(dāng)plin1基因序列第八外顯子的第49位為A或T，且基因型為TT型時(shí)，即可判定待檢測雞品種為具有優(yōu)良屠宰性狀的品種雞；

其特征在于：

所述引物對plin1E8F/E8R的核苷酸序列為：

plin1E8F：CATAAAGGCGAGGCAAAGGTTC；

plin1E8R：CACGGATGGACAGATGGACAA；

所述PCR擴(kuò)增的反應(yīng)程序?yàn)椋?5℃預(yù)變性4-5min；94℃變性30-35s，55-61℃退火30-35s，72℃延伸1min,28-35個(gè)循環(huán)，最后72℃延伸10min，并置于4℃保存；

所述特定的限制性核酸內(nèi)切酶為：NspI、BstNSI、NspHI、PauAI或PunAII，其酶切作用位點(diǎn)為擴(kuò)增出目的基因中的以下序列：5’…RCATG^↓Y…3’或3’…Y_↑GTACR…5’。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的應(yīng)用，其特征在于：對于plin1E8F/E8R引物對來說，PCR擴(kuò)增程序?yàn)椋?5℃預(yù)變性4min；94℃變性30s，55℃退火30s，72℃延伸1min,35個(gè)循環(huán)，最后72℃延伸10min，并置于4℃保存。

5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的應(yīng)用，其特征在于：所述特定的限制性核酸內(nèi)切酶為：NspI、BstNSI或NspHI。