[發(fā)明專利]一種蘇云金芽孢桿菌及選育方法及其應(yīng)用

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201510015310.5
• 申請(qǐng)日: 2015-01-13
• 公開（公告）號(hào): CN104845897A
• 公開（公告）日: 2015-08-19
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 劉士平;秦王閣閣;田偉;曾文;孔玉珊;蔣維;薛艷紅
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 三峽大學(xué)
• 主分類號(hào): C12N1/20
• 分類號(hào): C12N1/20;A01N63/00;A01P1/00;C12R1/07
• 代理公司: 宜昌市三峽專利事務(wù)所 42103
• 代理人: 蔣悅

1.蘇云金芽孢桿菌(Bacillus?subtilis)ML1，于2014年5月5日保藏于中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏編號(hào)為，CCTCC?NO：M?2014181。

2.權(quán)利要求1所述的蘇云金芽孢桿菌的選育方法，其特征在于，包括如下步驟：

1)取疏花水柏枝葉，加入無(wú)菌水中，研磨搗碎得組織液，吸取組織液加入無(wú)菌水中，再用無(wú)菌水稀釋組織液濃度至10^-1、10^-2、10^-3、10^-4、10^-5、10^-6、10^-7共7個(gè)濃度梯度；

2)取上述各濃度梯度稀釋液100μL分別涂布于培養(yǎng)基平板中，倒置恒溫箱內(nèi)30℃培養(yǎng)；

3)待上述平板上長(zhǎng)出菌落后，挑取單菌落于滅菌的培養(yǎng)基中，恒溫30℃振蕩培養(yǎng)24小時(shí)，得到細(xì)菌培養(yǎng)液；

4)在滅菌的菌種管中，加入1.0mL細(xì)菌培養(yǎng)液，0.5ml?50％的甘油，混勻后于-86℃冰箱保存；

5)取-86℃冰箱保存的蘇云金芽孢桿菌菌株菌種劃線接種于斜面培養(yǎng)基中，30℃下，培養(yǎng)12小時(shí)；

6)將上述菌體劃線接種于培養(yǎng)基中，30℃下，培養(yǎng)18小時(shí)，獲得蘇云金芽孢桿菌體。

3.權(quán)利要求2所述的蘇云金芽孢桿菌的選育方法，其特征在于，所述的培養(yǎng)基是將牛肉膏、蛋白胨、NaCl、瓊脂、無(wú)菌水以質(zhì)量比為2：2：1：4：11混合后，在121℃滅菌20min后制得的。

4.一種生物防治植物病害的菌劑，其特征在于，該菌劑包括蘇云金芽孢桿菌，或以蘇云金芽孢桿菌為活性成分制得的菌劑。

5.一種生物防治植物病害的菌劑，其特征在于，該菌劑包括蘇云金芽孢桿菌菌株，或以蘇云金芽孢桿菌菌株為活性成分所制得的菌劑。

6.一種生物防治植物病害的菌劑，其特征在于，該菌劑包括蘇云金芽孢桿菌菌株的微生物菌劑，或以蘇云金芽孢桿菌菌株的微生物菌劑為活性成分制得的菌劑。

7.一種生物農(nóng)藥，其特征在于：該生物農(nóng)藥包括蘇云金芽孢桿菌或以蘇云金芽孢桿菌為活性成分制得的生物農(nóng)藥；進(jìn)一步還包括以蘇云金芽孢桿菌為組分或活性成分制得的生物農(nóng)藥組合物。

8.一種生物農(nóng)藥，其特征在于：該生物農(nóng)藥包括蘇云金芽孢桿菌菌株的發(fā)酵液或懸乳液，或以蘇云金芽孢桿菌菌株的發(fā)酵液或菌懸液為活性成分所制得的生物農(nóng)藥；進(jìn)一步還包括以蘇云金芽孢桿菌菌株的發(fā)酵液或菌懸液為組分或活性成分制得的生物農(nóng)藥組合物。

9.權(quán)利要求1-8任一項(xiàng)所述的蘇云金芽孢桿菌在防治魔芋軟腐病上的應(yīng)用。

10.權(quán)利要求9所述的蘇云金芽孢桿菌還可以替換為蘇云金芽孢桿菌菌株、蘇云金芽孢桿菌菌株的發(fā)酵液、蘇云金芽孢桿菌菌株的菌懸液、菌株的微生物菌劑中的任意一種。