[發明專利]一種豬脂肪組織無細胞基質材料的制備方法有效
| 申請號: | 201510014130.5 | 申請日: | 2015-01-12 |
| 公開(公告)號: | CN104548207B | 公開(公告)日: | 2017-11-07 |
| 發明(設計)人: | 呂青;譚秋雯;張迪;熊炳鈞;范雪嬌;楊志明 | 申請(專利權)人: | 四川大學華西醫院 |
| 主分類號: | A61L27/36 | 分類號: | A61L27/36;A61L27/56 |
| 代理公司: | 成都高遠知識產權代理事務所(普通合伙)51222 | 代理人: | 李高峽,張娟 |
| 地址: | 610041 四*** | 國省代碼: | 四川;51 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 種豬 脂肪 組織 細胞 基質 材料 制備 方法 | ||
1.一種制備豬脂肪組織無細胞基質材料的方法,其特征在于:包括如下步驟:
(1)取新鮮豬皮下脂肪,清洗,剪碎,加水或者生理鹽水,勻漿,離心,得沉淀,用PBS溶液或水漂洗;
(2)將沉淀粉碎,用SDS溶液漂洗,再用PBS溶液或水漂洗,離心,得沉淀;
(3)將沉淀用異丙醇溶液或者異丙醇漂洗,再用PBS溶液或水漂洗,即可;
步驟(1)中,所述勻漿的轉速為10000~15000rpm,時間為3~7min;
步驟(1)中,所述離心的轉速為3000~4000rpm,時間為3~7min;
步驟(2)中,所述粉碎是球磨粉碎,球磨粉碎的轉速為2000~3000r/s,時間為3~7min;
步驟(2)中,所述SDS溶液的濃度為0.25%~1%w/v;
步驟(2)中,所述SDS溶液漂洗的時間為2~6h;
步驟(3)中,所述異丙醇溶液的濃度大于等于80%,小于100%;
步驟(3)中,所述異丙醇溶液或者異丙醇的漂洗時間為1~3h。
2.根據權利要求1所述的方法,其特征在于:步驟(1)中,剪碎至大小為(0.5~1.5)cm×(0.5~1.5)cm×(0.5~1.5)cm。
3.根據權利要求2所述的方法,其特征在于:剪碎至大小為1cm×1cm×1cm。
4.根據權利要求1所述的方法,其特征在于:步驟(1)中,勻漿前,所述水或生理鹽水的用量為皮下脂肪體積的0.5~2倍。
5.根據權利要求4所述的方法,其特征在于:所述水或生理鹽水的用量為皮下脂肪體積的1倍。
6.根據權利要求5所述的方法,其特征在于:所述勻漿的轉速為12000rpm,時間為5min。
7.根據權利要求1所述的方法,其特征在于:步驟(1)中,所述離心的轉速為3500rpm,時間為5min。
8.根據權利要求1所述的方法,其特征在于:所述球磨粉碎的轉速為2500r/s,時間為5min。
9.根據權利要求1所述的方法,其特征在于:所述SDS溶液的濃度為0.5%w/v。
10.根據權利要求1所述的方法,其特征在于:所述SDS溶液漂洗的時間為4h。
11.根據權利要求1所述的方法,其特征在于:沉淀用異丙醇漂洗。
12.根據權利要求1所述的方法,其特征在于:所述異丙醇溶液或者異丙醇的漂洗時間為2h。
13.權利要求1~12任意一項方法制備得到的豬脂肪組織無細胞基質材料。
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