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[發明專利]一種豬脂肪組織無細胞基質材料的制備方法有效

專利信息
申請號: 201510014130.5 申請日: 2015-01-12
公開(公告)號: CN104548207B 公開(公告)日: 2017-11-07
發明(設計)人: 呂青;譚秋雯;張迪;熊炳鈞;范雪嬌;楊志明 申請(專利權)人: 四川大學華西醫院
主分類號: A61L27/36 分類號: A61L27/36;A61L27/56
代理公司: 成都高遠知識產權代理事務所(普通合伙)51222 代理人: 李高峽,張娟
地址: 610041 四*** 國省代碼: 四川;51
權利要求書: 查看更多 說明書: 查看更多
摘要:
搜索關鍵詞: 種豬 脂肪 組織 細胞 基質 材料 制備 方法
【權利要求書】:

1.一種制備豬脂肪組織無細胞基質材料的方法,其特征在于:包括如下步驟:

(1)取新鮮豬皮下脂肪,清洗,剪碎,加水或者生理鹽水,勻漿,離心,得沉淀,用PBS溶液或水漂洗;

(2)將沉淀粉碎,用SDS溶液漂洗,再用PBS溶液或水漂洗,離心,得沉淀;

(3)將沉淀用異丙醇溶液或者異丙醇漂洗,再用PBS溶液或水漂洗,即可;

步驟(1)中,所述勻漿的轉速為10000~15000rpm,時間為3~7min;

步驟(1)中,所述離心的轉速為3000~4000rpm,時間為3~7min;

步驟(2)中,所述粉碎是球磨粉碎,球磨粉碎的轉速為2000~3000r/s,時間為3~7min;

步驟(2)中,所述SDS溶液的濃度為0.25%~1%w/v;

步驟(2)中,所述SDS溶液漂洗的時間為2~6h;

步驟(3)中,所述異丙醇溶液的濃度大于等于80%,小于100%;

步驟(3)中,所述異丙醇溶液或者異丙醇的漂洗時間為1~3h。

2.根據權利要求1所述的方法,其特征在于:步驟(1)中,剪碎至大小為(0.5~1.5)cm×(0.5~1.5)cm×(0.5~1.5)cm。

3.根據權利要求2所述的方法,其特征在于:剪碎至大小為1cm×1cm×1cm。

4.根據權利要求1所述的方法,其特征在于:步驟(1)中,勻漿前,所述水或生理鹽水的用量為皮下脂肪體積的0.5~2倍。

5.根據權利要求4所述的方法,其特征在于:所述水或生理鹽水的用量為皮下脂肪體積的1倍。

6.根據權利要求5所述的方法,其特征在于:所述勻漿的轉速為12000rpm,時間為5min。

7.根據權利要求1所述的方法,其特征在于:步驟(1)中,所述離心的轉速為3500rpm,時間為5min。

8.根據權利要求1所述的方法,其特征在于:所述球磨粉碎的轉速為2500r/s,時間為5min。

9.根據權利要求1所述的方法,其特征在于:所述SDS溶液的濃度為0.5%w/v。

10.根據權利要求1所述的方法,其特征在于:所述SDS溶液漂洗的時間為4h。

11.根據權利要求1所述的方法,其特征在于:沉淀用異丙醇漂洗。

12.根據權利要求1所述的方法,其特征在于:所述異丙醇溶液或者異丙醇的漂洗時間為2h。

13.權利要求1~12任意一項方法制備得到的豬脂肪組織無細胞基質材料。

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