[發明專利]一種人參皂苷Rd的提取工藝

有效

• 申請號: 201510001503.5
• 申請日: 2015-01-05
• 公開（公告）號: CN104610410B
• 公開（公告）日: 2019-03-05
• 發明（設計）人: 張觀福
• 申請（專利權）人: 貴州信邦制藥股份有限公司
• 主分類號: C07J17/00
• 分類號: C07J17/00
• 代理公司: 北京聯創佳為專利事務所(普通合伙) 11362
• 代理人: 郭防

1.一種人參皂苷Rd的提取工藝，其特征在于，包括以下步驟：

S1，將含有人參皂苷Rd成分的藥材粉碎成40～60目的藥粉，加2倍量85％乙醇，冷浸15～18h，濾過，藥渣加1.8倍量85％乙醇，回流提取3次，每次2小時，濾過，合并濾液，回收乙醇并濃縮至相對密度為1.24～1.26的浸膏，得總提取物；

S2，取總提取物，加2倍量純化水，攪勻，上D101大孔吸附樹脂柱，先用純化水洗脫，繼用40％～80％乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，回收乙醇并減壓濃縮至相對密度為1.10～1.20的清膏，得總皂苷；具體包括：

S21，裝柱：用乙醇充分濕潤預先處理過的D101大孔吸附樹脂，攪拌排除氣泡，裝柱，浸泡12h，用95％乙醇沖洗至流出液加水混合后不呈渾濁為止，繼用純化水置換其中的乙醇至無醇味，備用；

S22，上樣：取總提取物，加2倍量純化水，攪勻，緩緩加入預先處理過的D101大孔吸附樹脂柱中，使全部進入柱床，靜置吸附12h；

S23，洗脫：先用5L/kg_硅膠純化水洗脫，水洗脫液棄去；繼用不少于純化水用量的60％乙醇洗脫，收集60％乙醇洗脫液，回收乙醇并減壓濃縮至相對密度為1.10～1.20的清膏，得總皂苷；

S3，取總皂苷，吸附于2倍量硅膠上，揮發至干，過篩，將其加入硅膠層析柱中，用正丁醇-乙酸乙酯-水＝2﹕3﹕5等度洗脫，分段收集，經薄層色譜檢查合并人參皂苷Rd流份，減壓回收溶劑至干，得人參皂苷Rd粗品；

S4，取人參皂苷Rd粗品，用甲醇溶解并加入純化水，攪勻，上Rp-C18反相層析硅膠柱，用甲醇-水＝75﹕25等度洗脫，分段收集，經薄層色譜檢查后合并所需組分，減壓回收溶劑，靜置，析出沉淀，上層液返回反相層析硅膠柱分離，沉淀干燥得人參皂苷Rd。

2.根據權利要求1所述的人參皂苷Rd的提取工藝，其特征在于：所述步驟S3包括：

S31，上柱樣品制備：取總皂苷，吸附于2倍量的硅膠上，揮發至干，過60目篩，備用；

S32，裝柱：取總皂苷10倍量的柱層析硅膠，用正丁醇-乙酸乙酯-水＝2﹕3﹕5的上層溶液濕法裝柱，反復用洗脫劑洗脫，使硅膠充分下沉緊密；

S33，上樣及洗脫：將上柱樣品慢慢加入層析柱中，用正丁醇-乙酸乙酯-水＝2﹕3﹕5的上層溶液等度洗脫，分段收集，每流份收集量為1.5L/kg_硅膠，經薄層色譜檢查后合并人參皂苷Rd流份，65～70℃減壓回收溶劑至干，得人參皂苷Rd粗品。

3.根據權利要求1所述的人參皂苷Rd的提取工藝，其特征在于：所述步驟S4包括：

S41，上柱樣品制備：取人參皂苷Rd粗品，按2.5mL甲醇/g人參皂苷Rd粗品的比例用甲醇溶解后，加入甲醇體積1/3的純化水，攪勻，備用；

S42，裝柱：按1kg硅膠/30g人參皂苷Rd粗品的比例稱取反相層析硅膠Rp-C18，用甲醇濕法裝柱；

S43，上樣及洗脫：將上柱樣品濕法上柱，用甲醇-水＝75﹕25等度洗脫，分段收集，每流份收集量為0.5L/kg_硅膠，經薄層色譜檢查后合并所需組分，75～80℃減壓回收溶劑至上柱樣品體積的1.5～2倍，靜置15～18h，析出沉淀，上層液返回反相層析硅膠柱分離，沉淀于40℃真空干燥，得人參皂苷Rd。

4.根據權利要求1-3任一所述的人參皂苷Rd的提取工藝，其特征在于：所述薄層色譜檢查具體為：每流份分別取10mL，蒸干，殘渣加1mL甲醇溶解，作為供試品溶液；另取適量人參皂苷Rd對照品，加甲醇制成每1mL含2mg的溶液，作為對照品溶液；照《中國藥典》2010年版一部附錄ⅥB的薄層色譜法試驗，吸取所述供試品溶液5～10μL和對照品溶液5μL，分別點于同一硅膠GF254板上，以正丁醇–乙酸乙酯–水＝4∶3∶5的上層溶液作為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％濃硫酸-乙醇溶液，于105℃加熱至斑點顯色清晰。

5.根據權利要求1-3中任一項所述的人參皂苷Rd的提取工藝，其特征在于：所述含有人參皂苷Rd成分的藥材為三七、人參或西洋參。