[發(fā)明專利]生物反應器中的細胞擴增在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 201480065645.1 | 申請日： | 2014-11-14 |
| 公開（公告）號： | CN105793411A | 公開（公告）日： | 2016-07-20 |
| 發(fā)明（設計）人： | 布萊恩·J·南柯維斯;馬克·E·瓊斯 | 申請（專利權(quán)）人： | 泰爾茂比司特公司 |
| 主分類號： | C12M3/00 | 分類號： | C12M3/00;C12M1/00;C12M1/12;C12M3/06;C12M1/34 |
| 代理公司： | 北京派特恩知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11270 | 代理人： | 景鵬;姚開麗 |
| 地址： | 美國科*** | 國省代碼： | 美國;US |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 生物反應器 中的 細胞 擴增 | ||
相關專利申請的交叉引用
本申請要求于2013年11月16日遞交的美國臨時專利申請?zhí)?1/905,182的名稱為 “在細胞擴增系統(tǒng)的生物反應器中加載并且分布細胞的方法(METHODOFLOADINGAND DISTRIBUTINGCELLSINABIOREACTOROFACELLEXPANSIONSYSTEM)”的優(yōu)先權(quán)，該美 國臨時專利申請通過引用整體并入本文中，就如其全文涵蓋在本申請中一樣。
背景技術
干細胞在各種治療和療法中的潛在應用已經(jīng)取得了特別關注。細胞擴增系統(tǒng)可用 于擴增(例如生長)干細胞以及其它類型的細胞，諸如骨髓細胞。從供體細胞擴增的干細胞 可用于修復或替換受損的或有缺陷的組織，并且對于大量疾病都具有廣泛的臨床應用。再 生醫(yī)學領域中的最新進展證實了，干細胞具有很多特性，諸如增殖和自我更新能力、維持非 特化狀態(tài)以及在特定條件下分化成特化細胞的能力。
細胞擴增系統(tǒng)包括用于擴增細胞的一個或多個腔室，諸如細胞生長腔室(在本文 中也被稱為“生物反應器”)。為了擴增細胞，通常將初始體積的細胞加載并且分布在生物反 應器中。因此，需要一種在與細胞擴增系統(tǒng)相連的生物反應器中加載并且分布細胞的方法。 本發(fā)明解決了這種需要或其他需要。
鑒于這些和其它方面的考慮，進行了本發(fā)明的實施方式。但是，上述相對具體的問 題并不限制本發(fā)明的實施方式對其它問題的適用性。
發(fā)明內(nèi)容
提供該發(fā)明內(nèi)容以介紹本發(fā)明的簡化形式的一些實施方式的各個方面，并不用于 確定本發(fā)明的關鍵或必要元素，也不用于限制權(quán)利要求的范圍。
應理解本發(fā)明可包括多種不同的變體或?qū)嵤┓绞?，本發(fā)明內(nèi)容并不是要進行限制 或包括所有的變體或?qū)嵤┓绞?。本發(fā)明內(nèi)容提供了對一些可被包括在實施方式中的特征的 一些概括性描述，還包括了對可被包括在其他實施方式中的其他特征的一些更具體的描 述。
一個或多個實施方式通常涉及用于在細胞擴增系統(tǒng)的生物反應器中加載和分布 細胞的方法和系統(tǒng)。因此，實施方式包括可用于向流體中添加多個細胞的方法，該流體在細 胞擴增系統(tǒng)的生物反應器內(nèi)以第一速度循環(huán)。在實施方式中，生物反應器可包括具有多個 獨立中空纖維的中空纖維膜，細胞和其他流體穿過該具有多個獨立中空纖維的中空纖維膜 循環(huán)。最初，流體穿過生物反應器的中空纖維膜循環(huán)，并且將細胞添加到循環(huán)的流體中。流 體以第一預定的循環(huán)速度進行循環(huán)。在循環(huán)過程中，生物反應器可處于水平位置。在通過添 加至循環(huán)流體來加載細胞后，隨著細胞流入和流出中空纖維膜的中空纖維，可允許細胞穿 過系統(tǒng)循環(huán)并且均勻地分布在系統(tǒng)中。然后，可停止循環(huán)。隨后，在重力的影響下，允許細胞 沉淀，并且附著至生物反應器中的中空纖維的第一區(qū)上。在實施方式中，可允許細胞在第一 預定時間段期間進行沉淀。在一些實施方式中，可對預定時間段進行選擇，以允許細胞附著 至中空纖維的第一區(qū)上。
在第一預定時間段之后，使生物反應器旋轉(zhuǎn)180度。在生物反應器旋轉(zhuǎn)之后，允許 生物反應器內(nèi)的細胞進行額外的沉淀。然后，細胞可在第二預定時間段期間沉淀在中空纖 維的相對的部分上，可對該第二預定時間段進行選擇，以允許細胞附著至該相對的部分。在 第二預定時間段之后，使生物反應器旋轉(zhuǎn)回到其初始的水平位置，然后細胞進行擴增程序。
在一些實施方式中，加載過程包括額外的步驟。在一些實施方式中，在生物反應器 返回至其初始的水平位置之后，重新啟動循環(huán)?？蓪⒀h(huán)速度設置為比第一預定循環(huán)速度 慢的速度。一旦使還沒有附著至表面的細胞進行額外的分布，則要進行循環(huán)。該循環(huán)應持續(xù) 第三預定時間段，以允許未附著的細胞均勻分布在包括生物反應器的系統(tǒng)中。然后停止循 環(huán)，以允許生物反應器中的細胞沉淀，并且在一些實施方式中再次附著至中空纖維的多個 部分上
在允許細胞進行額外沉淀的第四預定時間段之后，使生物反應器旋轉(zhuǎn)180度。在生 物反應器旋轉(zhuǎn)之后，允許生物反應器內(nèi)的細胞進行額外的沉淀。然后，細胞可在第五預定時 間段期間沉淀在中空纖維的相對部分上，可對該第五預定時間段進行選擇，以允許細胞附 著至中空纖維的相對部分。在第五預定時間段之后，使生物反應器旋轉(zhuǎn)回到其初始的水平 位置
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