[發明專利]使用吸附介質診斷感染性疾病的方法

有效

• 申請號: 201480061036.9
• 申請日: 2014-11-06
• 公開（公告）號: CN105705177B
• 公開（公告）日: 2019-10-22
• 發明（設計）人: R·S·沃德;K·R·麥克雷
• 申請（專利權）人: 艾克塞拉醫療公司
• 主分類號: A61M1/36
• 分類號: A61M1/36
• 代理公司: 北京市中咨律師事務所 11247
• 代理人: 黃革生;林柏楠

本發明提供用于濃縮生物樣品中發現的感染性病原體的體外方法，上述生物樣品獲自懷疑被病原體感染的個體。本文還提供用于減少或消除獲自懷疑被感染性病原體感染的個體的樣品的血細胞的體外方法。本發明還提供用于診斷瘧疾的方法，和用于確定個體是否被病原體感染的方法。本文還提供用于這些方法的濃縮器和試劑盒。

發明背景

本申請要求2013年11月8日提交的美國臨時專利申請第61/902,070號的優先權益，在此出于所有目的將其全部并入作為參考。

感染性疾病的早期檢測對于控制其傳播、指導治療和改善患者預后來說是必需的。例如，致命病原體爆發的早期準確鑒定可以防止全球大流行的發生。目前許多用于例如病毒(包括埃博拉和相關的線狀病毒)或抗藥細菌導致的血流感染的診斷方法要求進行至少24小時或更久。在本領域對于使檢測個體樣品中病原體的存在所需的時間最小化的方法存在需求。目標在于當病原體仍以很低的濃度存在時對其進行檢測，如果可能，在臨床癥狀明顯之前。然后早期干預可以使感染的強度和持續時間最小化，從而降低發病率和死亡率。

在一些情形中，樣品中細胞例如血細胞(例如，紅血細胞和白血細胞)的存在降低了測定方法的特異性和靈敏度。目前，不存在用于從生物樣品快速分離和收集感染性病原體從而使得病原體可以在以很低的量存在時得以鑒定或分析的手段。此外，在本領域存在對于可以提高檢測病原體的現有診斷方法的靈敏度的技術的需求。本發明滿足這些及其他需求。

發明概述

一方面，本發明提供用于濃縮生物樣品中存在的寬范圍的感染性病原體和毒素的體外方法，上述生物樣品獲自懷疑被所述病原體感染的對象。該方法包括：(a)在形成包括吸附介質和所述病原體的粘附復合物的條件下，使獲自對象的生物樣品與廣譜吸附介質接觸；(b)在保持復合物的同時將粘附復合物與樣品中沒有包括在復合物中的組分分離，例如，通過將粘附復合物用緩沖溶液洗滌；和(d)通過將洗脫緩沖液應用于復合物收集粘附復合物的病原體，從而濃縮洗脫液中的感染性病原體。在一些實施方式中，該方法還包括檢測分離的感染性病原體。在一些情形中，檢測分離的感染性病原體包括比色測定、免疫測定、酶聯免疫吸附測定(ELISA)、基于PCR的測定、任選染色的病原體生長測定或其組合。

在一些實施方式中，洗滌緩沖液是普通鹽水溶液。在一些實施方式中，洗脫緩沖液是高離子強度或高滲鹽水溶液。

在一些實施方式中，生物樣品選自全血、血清、血漿、尿、排泄物、痰、淚、唾液、支氣管灌洗液、其他體液及其組合。

在一些實施方式中，吸附介質是其表面上具有至少一種多糖分子吸附劑的高表面積的固體基質。在一些實施方式中，通過端點附著(end-point attachment)將至少一種多糖吸附劑附著于固體基質的表面。在一些實施方式中，至少一種多糖吸附劑是選自肝素、硫酸乙酰肝素、甘露糖、硫酸葡聚糖、透明質酸、水楊酸、殼聚糖及其組合的成員。在一些實施方式中，甘露糖是D-甘露糖或D-甘露糖聚合物。在一些實施方式中，至少一種多糖吸附劑是肝素和甘露糖。

在一些實施方式中，固體基質包括大量剛性聚合物珠。大量剛性聚合物珠可以是剛性聚乙烯珠。