[發(fā)明專利]作為免疫調(diào)節(jié)劑的基于球形核酸的構建體

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201480052513.5
• 申請日: 2014-07-25
• 公開（公告）號: CN105658241A
• 公開（公告）日: 2016-06-08
• 發(fā)明（設計）人: S·格亞茲諾夫;C·C·馬德爾;T·L·哈洛;A·F·拉多維克莫雷諾;C·李施;S·安安塔木拉
• 申請（專利權）人: ?？宋骺坠煞萦邢薰?/a>
• 主分類號: A61K47/48
• 分類號: A61K47/48;A61P35/00;A61P31/00;A61P37/00;A61P37/04;A61P37/08
• 代理公司: 中國國際貿(mào)易促進委員會專利商標事務所 11038
• 代理人: 李程達

相關申請

本申請根據(jù)35U.S.C.§119(e)要求2013年7月25日提交的題為 “作為用于預防和治療用途的免疫刺激劑的基于球形核酸的構建體” 的美國臨時申請?zhí)?1/858,584的優(yōu)先權，通過引用將其全文并入本文 中。

發(fā)明領域

本發(fā)明涉及用于遞送核酸相互作用復合物的拮抗劑的納米級構建 體及其方法和組合物。

發(fā)明背景

免疫細胞(特別是巨噬細胞、樹突狀細胞和B細胞)使用Toll 樣受體(TLR)來了解環(huán)境中的外源材料(諸如細菌成分和外源DNA 或RNA^4-10)。這些受體一旦活化之后，通過特定細胞信號傳導途徑 (主要通過轉錄因子NFκB¹¹)產(chǎn)生大的免疫應答。然后，NFκB的活 化導致產(chǎn)生幾種分泌的信號傳導分子(諸如TNFα)，其促進免疫應 答至相鄰的免疫細胞¹¹。這種免疫感覺系統(tǒng)(sensorysystem)被稱為 固有免疫應答。在幾種自身免疫性疾病中，身體將自身成分(諸如DNA 或RNA)不正確地識別為外源成分，并會啟動(mount)大規(guī)模的炎 性應答，如果不受控制的話，其可以是破壞性的、痛苦的和威脅生命 的。這種情況的最流行的實例包括如果沒有進行仔細調(diào)控則主要侵襲 關節(jié)并且會破壞軟骨和骨的類風濕性關節(jié)炎以及如果不受控制則也會 侵襲內(nèi)部器官(諸如心、腎和肺)并可能致命的狼瘡。目前的治療主 要依賴于通過TNFa結合抗體(依那西普等)來隔絕(sequestering) 免疫細胞所得到的細胞因子的產(chǎn)生以及用化學治療劑(諸如氨甲蝶呤) 進行全身(general)免疫抑制和消除B細胞群體以延緩(staveoff) 適應性免疫應答。但是，這些治療常常很難容忍和/或隨時間推移變得 易于獲得耐藥性。因此，針對該信號傳導級聯(lián)的開始時TLR活化的拮 抗劑的開發(fā)應當是阻斷患有自身免疫性紊亂的患者中自身DNA和 RNA的不適當識別的強效療法。

TLR7、8和9均駐留于免疫細胞的內(nèi)體。TLR9識別未甲基化 的CpG基序，其在細菌DNA中常見但在人DNA中不常見^5,10。TLR 7和8二者均識別在病毒感染中常見的短單鏈RNA的特異性序列^6-8。 重要的是，這些能夠拮抗它們各自TLR并阻斷下游信號傳導的常見識 別基序的模擬物是已知的^12-17。但是，它們在治療中的用途被它們能 夠被遞送至病理部位而不被體內(nèi)降解的能力所限制。

發(fā)明概述

本文中所述的是使用納米級構建體通過調(diào)節(jié)受體相互作用(諸如 TLR)用于調(diào)控免疫應答的新方法和組合物。本發(fā)明的方面涉及納米 級構建體，其具有核酸相互作用復合物的拮抗劑的冠部，其中核酸相 互作用復合物的拮抗劑的表面密度為至少0.3pmol/cm²。

在其他方面，本發(fā)明是構建體，其具有核酸相互作用復合物的拮 抗劑的冠部，以及被并入冠部的抗原。在一些實施方案中，抗原的表 面密度為至少0.3pmol/cm²。在其他實施方案中，抗原包括至少兩種 不同類型的抗原。

在又一些其他方面，本發(fā)明是構建體，其具有并入了核酸相互作 用復合物的至少兩種拮抗劑的冠部，其中拮抗劑選自由TLR3、7/8 和/或9的拮抗劑組成的組。

在一些實施方案中，核酸相互作用復合物的拮抗劑含有間隔子。

在其他實施方案中，核酸相互作用復合物的拮抗劑是RNA或 DNA。核酸相互作用復合物的拮抗劑可以是例如雙鏈RNA或雙鏈 DNA。備選地，核酸相互作用復合物的拮抗劑可以是單鏈RNA。在一 些實施方案中，核酸相互作用復合物的拮抗劑為未甲基化的脫氧核糖 核酸，諸如優(yōu)化的免疫調(diào)節(jié)序列。

在某些實施方案中，納米級構建體包括納米顆粒核心并且任選地 納米顆粒核心是金屬的。在某些實施方案中，金屬選自由金、銀、鉑、 鋁、鈀、銅、鈷、銦、鎳及其混合物組成的組。在某些實施方案中， 納米顆粒核心包含金。在某些實施方案中，納米顆粒核心是包括可降 解金的晶格結構(latticestructure)。在一些實施方案中，納米級構 建體是可降解的。