[發明專利]用于制備唾液酸衍生物的方法

在審

• 申請號: 201480042946.2
• 申請日: 2014-05-30
• 公開（公告）號: CN105473728A
• 公開（公告）日: 2016-04-06
• 發明（設計）人: 禹真錫;金秉祺;金大熙;崔允姬;宋在京;姜善燁;徐元敏;梁智英;李尙美
• 申請（專利權）人: 基因化學株式會社
• 主分類號: C12P19/00
• 分類號: C12P19/00;C07H15/20;C07H15/04;C12N9/10
• 代理公司: 北京坤瑞律師事務所 11494
• 代理人: 陳桉

1.一種用于制備唾液酸衍生物的方法，其包括：(a)通過加入包含5’-單磷酸胞苷 (CMP)、乙酰磷酸、核苷三磷酸(NTP)、N-乙酰-D-葡糖胺(GlcNAc)、丙酮酸鈉和半乳糖殘基的 化合物作為底物，并在單一反應器中與包含5’-單磷酸胞苷激酶(CMK)、乙酸激酶(ACK)、 CMP-N-乙酰神經氨酸合成酶(CMP-NeuAc合成酶:NEU)、N-乙酰葡糖胺-2-差向異構酶 (GlcNAc-2-差向異構酶:NANE)、N-乙酰神經氨酸醛縮酶(NeuAc醛縮酶，NAN)和唾液酸轉移 酶的反應溶液反應以制備包含唾液酸乳糖或半乳糖殘基的化合物的唾液酸衍生物；以及 (b)獲得根據所述步驟(a)制備的包含唾液酸乳糖或半乳糖殘基的化合物的所制唾液酸衍 生物。

2.根據權利要求1的所述方法，其中唾液酸轉移酶選自由以下構成的組：α-2,3-唾液酸 轉移酶、α-2,6-唾液酸轉移酶和α-2,8-唾液酸轉移酶。

3.根據權利要求2的所述方法，其中α-2,3-唾液酸轉移酶具有由選自由SEQIDNO:2-6 構成的組中的一種所表示的氨基酸序列。

4.根據權利要求2的所述方法，其中所述α-2,6-唾液酸轉移酶具有由選自由SEQID NO:14-18構成的組中的一種所表示的氨基酸序列。

5.根據權利要求1的所述方法，其中所述反應在25～38℃的溫度下進行。

6.根據權利要求1的所述方法，其中反應溶液的pH為7～9。

7.根據權利要求1的所述方法，其中所述N-乙酰葡糖胺-2-差向異構酶(GlcNAc-2-差向 異構酶:NANE)具有由SEQIDNO:25表示的氨基酸序列。

8.根據權利要求1的所述方法，其中所述包含半乳糖殘基的化合物是選自由以下構成 的組的化合物的半乳糖衍生物：單糖、低聚糖、接頭、黃酮類、抗癌劑、抗生素、免疫抑制劑和 抗體。