[發(fā)明專利]用于生產(chǎn)化學(xué)修飾的肝素的新方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201480034904.4
• 申請(qǐng)日: 2014-06-19
• 公開（公告）號(hào): CN105324398B
• 公開（公告）日: 2018-06-01
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: P-O·埃里克森;E·Y·霍爾默
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 迪樂方有限責(zé)任公司
• 主分類號(hào): C08B37/00
• 分類號(hào): C08B37/00;A61K31/727
• 代理公司: 北京戈程知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11314
• 代理人: 程偉;李媛

本發(fā)明涉及用于生產(chǎn)具有約4.6至約6.9kDa的平均分子量和小于約10IU/mg的抗因子Xa活性的肝素衍生物的方法，其包括氧化未分級(jí)肝素、解聚和還原所產(chǎn)生的末端基團(tuán)的步驟。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及新方法。特別地，其涉及用于制備化學(xué)修飾的葡糖胺聚糖(glycosaminoglycan)(例如化學(xué)修飾的肝素)的新方法。

背景技術(shù)

本說明書中對(duì)明顯在先出版的文獻(xiàn)的列舉或討論不應(yīng)必須理解為承認(rèn)該文獻(xiàn)是現(xiàn)有技術(shù)的一部分或是公知常識(shí)。

肝素是多分散的、天然存在的抑制凝血的多糖，血栓形成經(jīng)由所述凝血過程發(fā)生。肝素由不同長(zhǎng)度和分子量的無支鏈多糖鏈組成。分子量從5000至超過40,000道爾頓的鏈構(gòu)成了醫(yī)藥級(jí)肝素。

通常，天然來源(例如豬腸或牛肺組織)的肝素可以在治療上施用以預(yù)防和治療血栓形成。然而，未分級(jí)肝素(unfractionated heparin)的作用是難以預(yù)料的。因此，在用未分級(jí)肝素治療血栓形成期間，必須非常密切地監(jiān)測(cè)凝血參數(shù)以防止過強(qiáng)或過弱抗凝血。

眾多品牌的肝素和低分子量肝素(LMWH)(例如達(dá)肝素(dalteparin)和依諾肝素)可以用于依賴于其抗凝血活性的治療方法。大量體外和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究，甚至臨床試驗(yàn)都表明，肝素及其衍生物具有與其抗凝血作用相關(guān)的那些特性之外的有益特性。然而，由于與抗凝血作用相關(guān)的出血風(fēng)險(xiǎn)，現(xiàn)有的肝素和LMWH不適合用于治療其它醫(yī)學(xué)病癥。

已證明LMWH達(dá)肝素減少接受預(yù)防深靜脈血栓形成的女性中的滯產(chǎn)(protractedlabour)。該機(jī)制被認(rèn)為涉及達(dá)肝素誘導(dǎo)的增加的白介素水平，導(dǎo)致有利的炎癥反應(yīng)，其促進(jìn)子宮頸成熟。此外，已證明達(dá)肝素增加子宮的收縮力(Acta Obstetricia etGynecologica,2010；89:147-150)。然而，出于一些原因，肝素和LMWH不適合用于預(yù)防或治療這樣的疾病。

首先，肝素和LMWH具有顯著的、眾所周知的抗凝血作用，由于出血風(fēng)險(xiǎn)，限制其在妊娠晚期及分娩過程中使用(無論是預(yù)防還是急性使用)。例如，當(dāng)給予硬膜外麻醉時(shí)(在分娩時(shí)經(jīng)常采取的措施)，嚴(yán)格禁止使用達(dá)肝素。

第二，肝素(以及在一定程度上LMWH)已與肝素誘導(dǎo)的血小板減少聯(lián)系起來，所述血小板減少是可以發(fā)生在任何暴露于肝素的病人中的嚴(yán)重的免疫介導(dǎo)藥物反應(yīng)。其是由肝素依賴性抗體引起的潛在破壞性血栓形成前(pro-thrombotic)疾病，所述肝素依賴性抗體是在病人使用肝素五天或以上之后，或者如果病人之前已經(jīng)有肝素暴露而發(fā)展起來的。

肝素長(zhǎng)期治療的另一種可能的不良影響是，其可能會(huì)誘導(dǎo)骨骼脫礦質(zhì)(demineralization)，并造成骨質(zhì)疏松。

已經(jīng)有許多嘗試，以消除或降低肝素或低分子量肝素的抗凝血活性，以提供低抗凝血肝素(LAH)，其目的在于從肝素鏈的抗凝血作用之外的其它潛在臨床作用中獲益，而不具有與肝素有關(guān)的不良作用的風(fēng)險(xiǎn)(主要是出血)。然而，對(duì)于這種類型的肝素的臨床經(jīng)驗(yàn)有限，至今沒有這樣的產(chǎn)品被允許用于臨床。

肝素主要通過高親和力結(jié)合并活化絲氨酸蛋白酶抑制劑，抗凝血酶(AT)，而發(fā)揮其抗凝血活性。AT作為血液凝固的重要生理抑制劑，通過與激活的凝血因子形成穩(wěn)定的絡(luò)合物而中和這些因子。特定的五糖(pentasaccharide)與肝素的多糖鏈的結(jié)合引起AT的構(gòu)象變化，這極大地提高了抑制凝血因子的速率，從而減弱血液凝固和血凝塊的形成。

歐洲專利申請(qǐng)EP 1 059 304公開了酶促降解的或氧化的肝素，得到具有低抗凝血作用的產(chǎn)品，其具有9至13kDa的平均分子量，其被推薦用于神經(jīng)變性疾病的治療。