[發明專利]新檢測方法

有效

• 申請號: 201480030302.1
• 申請日: 2014-03-28
• 公開（公告）號: CN105492907B
• 公開（公告）日: 2017-10-31
• 發明（設計）人: Y·達阿米科;G·芒努松
• 申請（專利權）人: IDL生物技術公司
• 主分類號: G01N33/543
• 分類號: G01N33/543
• 代理公司: 永新專利商標代理有限公司72002
• 代理人: 左路,林曉紅

技術領域

本發明涉及癌癥和癌癥檢測領域。更具體地，本發明涉及對敏感指征例如腫瘤細胞活性的新檢測方法。根據本發明的方法可用于對上皮源性癌，例如非小細胞肺癌，和膀胱癌患者的管理。

背景技術

在工業世界，癌癥是主要致死原因中的一個。為了改善病人護理，當前致力于發現關于預測、治療反應的早期跡象和疾病進程的其它信息。為此感興趣的工具是癌癥生物標記的使用，即表明體內存在癌癥的物質。生物標記是腫瘤或人體對存在的癌癥的特異反應分泌的分子。理想的是，這種生物標記能夠在非侵入式收集的生物液體如尿液、血液或血清中檢測。

人們感興趣的一個領域是肺癌，它是世界范圍內最普遍和最致命的癌癥疾病。肺癌致死的人比結腸、乳腺和前列腺癌的總和還多(WHO統計)。大約80-85％的肺癌患者有非小細胞組織(NSCLC)。非小細胞肺癌(SCLC)占所有肺癌情況的約15-20％。大部分患者具有處于晚期且無法手術的疾病。對于早期階段的NSCLC，切除作為僅有的有療效的治療方法仍然是重要的。過去的十年間，人們廣泛研究了腫瘤標記物在肺癌中的價值。已經發現的對肺癌具有臨床重要性的最普遍的生物標記是CEA、CYFRA、TPA、TPS和NSE。然而，靈敏性和專一性的缺乏限制了癌癥生物標記在對肺癌進行檢查和早期診斷中的應用。對于疾病的預后評價和過程檢測，癌癥生物標記顯得更加有效。

所有真核細胞具有已知為中間絲的細胞質細胞骨架結構。細胞骨架網絡負責細胞的機械完整性且在細胞過程如細胞分裂、運動和細胞間接觸中至關重要。目前，已經確認了超過20種不同的細胞角蛋白，其中在簡單上皮細胞中細胞角蛋白8、18和19是最充足的。細胞角蛋白是上皮細胞特有的且細胞角蛋白模式在正常細胞轉化成惡性細胞過程中通常保留下來。

檢測細胞角蛋白8、18和19上限定的表位的固相兩位點免疫放射分析(IRMA)是商業上可獲取的(IDL Biothch，Bromma Sweden)，商標為將捕獲抗體，單克隆抗體6D7(CK8)、3F3(CK18)和IDLC4(CK19)涂覆于塑料珠上。分析中使用多克隆¹²⁵I-標記抗體作為示蹤劑。用γ計數器檢測放射活性且放射活性正比于細胞角蛋白抗原片段的濃度。MonoTotal是設計為進行患者血清檢測的定量檢測。MonoTotal作為預后標記對于診斷、預后，和對于監控患者的治療是有價值的。通過跟蹤患者的重復MonoTotal檢測，醫生能夠獲取有關腫瘤細胞活性的關鍵信息。變化的MonoTotal標記水平表明腫瘤細胞活性發生變化，且提高的水平指向腫瘤的存在。在患者管理和隨訪中該信息被認為特別重要，其中血液樣品可用于監測治療和對腫瘤復發的早期檢測。當疾病仍限制于肺部時大約15％的肺癌患者被確診，且早期檢測對于增加生存的可能是至關重要的。通過使用MonoTotal，醫生可以得到疾病過程的指征信息，其以腫瘤細胞活性而不是傳統的腫瘤負荷檢測來測定。Mono Total能夠向醫生提供對診斷、建立預后、治療監測和患者隨訪中可靠的輔助信息。

根據已公開研究，MonoTotal顯現出與患者的臨床反應非常相關。相較于肺癌患者中的Cyfra，MonoTotal具有更高的靈敏度。在肺癌診斷中，不依賴于組織分型，MonoTotal的整體靈敏度是約70-75％，且特異性為95％。非小細胞肺癌(NSCLC)的靈敏度更高。MonoTotal與腫瘤細胞活性和疾病程度非常相關。此外，MonoTotal可預測疾病進程(無病期間和整體存活率)，且在NSCLC隨訪中是復發的早期標志。MonoTotal中的變化通常早于傳統成像方法的復發的檢測。由于血清中細胞角蛋白的半衰期小于一天，所以在幾天內能夠進行對治療反應的檢測。MonoTotal對于NSCLC是比程序化臨床實踐中目前使用的其他生物角蛋白標記更靈敏的腫瘤標記。

另一個感興趣的領域是膀胱癌，在世界范圍內其是男性和女性中常見的癌癥。超過70％的情況都是非肌層浸潤性膀胱癌，但是很多患者發展成肌層浸潤性膀胱癌或轉移性疾病。為提高對膀胱癌的預后，使用有效的方法進行早期檢測和常規隨訪對于患者而言是重要的。

非浸潤性膀胱癌檢測具有很多潛在應用，如幫助診斷復發，降低對侵入性檢測的需求和檢測患者是否落入高風險范疇。免疫檢測(IDL Biotech)是一種非侵入性檢測。