[發明專利]使用重組酵母全細胞的豬圓環病毒(PCV2)亞單位疫苗及其制造方法

在審

• 申請號: 201480026972.6
• 申請日: 2014-03-11
• 公開（公告）號: CN105247037A
• 公開（公告）日: 2016-01-13
• 發明（設計）人: 崔毅星;樸景民;徐成和;安廷梧;李殷教;金千錫;尹寅重;俞成植;沈寧貞
• 申請（專利權）人: 韓國生命工學研究院;中央疫苗研究所
• 主分類號: C12N1/19
• 分類號: C12N1/19;C12N15/34;A61K39/12
• 代理公司: 北京派特恩知識產權代理有限公司 11270
• 代理人: 景鵬;姚開麗

1.一種用于豬圓環病毒疫苗的酵母全細胞，所述酵母全細胞包括豬圓環病毒的II型衣殼Orf2基因。

2.根據權利要求1所述的酵母全細胞，其中，所述Orf2基因由SEQIDNO:1表示。

3.根據權利要求1所述的酵母全細胞，其中，所述Orf2基因編碼由SEQIDNO:2表示的蛋白。

4.根據權利要求1所述的酵母全細胞，其中，酵母用作宿主細胞并且是釀酒酵母Saccharomycescerevisiae的菌株。

5.根據權利要求4所述的酵母全細胞，其中，所述菌株是Y2805菌株。

6.根據權利要求1所述的酵母全細胞，其中，所述酵母全細胞是經熱滅活的細胞或經福爾馬林滅活的細胞。

7.一種用于豬圓環病毒疫苗的酵母全細胞的裂解液，所述裂解液包括豬圓環病毒的II型衣殼Orf2基因。

8.根據權利要求7所述的酵母全細胞的裂解液，其中，所述Orf2基因由SEQIDNO:1表示。

9.根據權利要求7所述的酵母全細胞的裂解液，其中，所述Orf2基因編碼由SEQIDNO:2表示的蛋白。

10.根據權利要求7所述的酵母全細胞的裂解液，其中，酵母用作宿主細胞并且是釀酒酵母Saccharomycescerevisiae的菌株。

11.根據權利要求10所述的酵母全細胞的裂解液，其中，所述菌株是Y2805菌株。

12.一種豬圓環病毒疫苗組合物，包括酵母全細胞或該細胞的裂解液，該酵母全細胞包括豬圓環病毒的II型衣殼蛋白ORF2。

13.根據權利要求12所述的豬圓環病毒疫苗組合物，其中，所述蛋白ORF2由SEQIDNO:1表示的基因編碼。

14.根據權利要求12所述的豬圓環病毒疫苗組合物，其中，所述蛋白ORF2是由SEQIDNO:2表示的多肽。

15.根據權利要求12所述的豬圓環病毒疫苗組合物，其中，酵母用作宿主細胞并且是釀酒酵母Saccharomycescerevisiae的菌株。

16.根據權利要求15所述的豬圓環病毒疫苗組合物，其中，所述菌株是Y2805菌株。

17.根據權利要求16所述的豬圓環病毒疫苗組合物，其中，所述Y2805菌株缺乏gal80基因。

18.根據權利要求12所述的豬圓環病毒疫苗組合物，其中，所述酵母全細胞是經熱滅活的細胞或經福爾馬林滅活的細胞。

19.根據權利要求12所述的豬圓環病毒疫苗組合物，所述豬圓環病毒疫苗組合物是無佐劑的。

20.根據權利要求12至19中任一項所述的豬圓環病毒疫苗組合物，其中，所述酵母全細胞以4×10⁹個細胞或更低的濃度使用。

21.一種生產用于豬圓環病毒疫苗的經轉化的酵母全細胞的方法，所述方法包括以下步驟：

制備包括Orf2基因的重組表達載體，該Orf2基因編碼豬圓環病毒的II型衣殼蛋白；和

使用重組載體轉化酵母。

22.根據權利要求21所述的方法，其中，所述Orf2基因是由SEQIDNO:1表示的基因。

23.根據權利要求21所述的方法，其中，所述Orf2基因編碼由SEQIDNO:2表示的多肽。

24.根據權利要求21所述的方法，其中，所述酵母用作宿主細胞并且是釀酒酵母Saccharomycescerevisiae的菌株。

25.根據權利要求24所述的方法，其中，所述菌株是Y2805菌株。

26.根據權利要求25所述的方法，其中，所述Y2805菌株缺乏gal80基因。

27.根據權利要求21所述的方法，其中，所述重組表達載體包括GAL10啟動子。

28.根據權利要求21所述的方法，其中，所述Orf2基因與Ty1融合，以便增加所述Orf2基因的表達。