[發明專利]用于靶向O-連接的N-乙酰氨基葡萄糖轉移酶和促進傷口愈合的組合物和方法

在審

• 申請號: 201480026966.0
• 申請日: 2014-03-11
• 公開（公告）號: CN105408480A
• 公開（公告）日: 2016-03-16
• 發明（設計）人: 大衛·魯本斯坦;卡斯培·魯納杰
• 申請（專利權）人: 北卡羅來納大學教堂山分校
• 主分類號: C12N15/113
• 分類號: C12N15/113;A61K48/00
• 代理公司: 北京路浩知識產權代理有限公司 11002
• 代理人: 瞿衛軍;王朋飛

相關申請

本申請要求2013年3月11日提交的序列號為61/775,937的美國臨時專利申請的優先權，其全部公開內容通過引用的方式并入本文。

政府利益

目前公開的主題是根據國立衛生研究院給予的RO1AI49427號基金在美國政府的支持下進行的。美國政府具有下述發明的一定權利。

技術領域

目前公開的主題涉及用于靶向UDP-N-乙酰氨基葡萄糖多肽β-N-乙酰氨基葡萄糖轉移酶(OGT)的化合物、組合物和方法。目前公開的主題還涉及用于促進傷口愈合的化合物、組合物和方法。

背景技術

慢性傷口是影響美國650萬患者以及每年花費約250億美元來治療的重大患病根源(1)。患有糖尿病的患者發展慢性不愈傷口的風險增加。各種因素可能導致糖尿病患者易于發展慢性傷口，包括神經病變、血管病變以及引起血糖水平升高的潛在內分泌功能障礙。

如同磷酸化作用，胞內蛋白O-糖基化是調節胞內蛋白包括酶、轉錄因子、結構蛋白和細胞粘著蛋白的常見動態翻譯后修飾。絲氨酸和蘇氨酸的N-乙酰氨基葡萄糖(GlcNAc)修飾由酶UDP-N-乙酰氨基葡萄糖多肽β-N-乙酰氨基葡萄糖轉移酶(O-GlcNAc轉移酶，OGT)催化；而GlcNAc由O-GlcNAc-選擇性N-乙酰基-β-D-氨基葡萄糖苷酶(GlcNAc酶，OGA)除去(在(2)有評論)。

高血糖，過量葡萄糖進入氨基葡萄糖途徑，為OGT提供過量UDP-GlcNAc來修飾胞內蛋白(3)。過量葡萄糖被轉化為氨基葡萄糖，其最終被轉化為UDP-N-乙酰氨基葡萄糖(UDP-GlcNAc)，即用于胞內蛋白的OGT修飾的供體底物。因此，高血糖癥與各種蛋白的O-糖基化增加有關(3-7)。高血糖狀態包括糖尿病中觀察到的胞內蛋白的GlcNAc修飾增加被認為有助于與糖尿病有關的一些病理。例如，(i)胰腺細胞具有高水平的OGT，且對細胞內O-GlcNAc修飾中的改變有敏感性，以及(ii)肌肉和脂肪組織中OGT的超表達引起轉基因小鼠模型的糖尿病(8)。糖尿病組織包括人類糖尿病組織(9)和高血糖動物模型(4)中觀察到胞內蛋白的GlcNAc修飾增加。用于細胞內O-糖基化在糖尿病中的病理作用的其它支持來自證明引起胞內蛋白O-糖基化增加的糖尿病和突變的遺傳相關性的研究；導致編碼OGA的基因提前終止的突變與對墨西哥裔美國人口成年發病II型糖尿病的遺傳易感性相關(10)。OGA從胞內蛋白除去GlcNAc，且鑒別的OGA突變導致蛋白O-糖基化水平升高。

傷口愈合期間，傷口周邊處的角質細胞必須降低對后邊緣處的相鄰細胞的粘附，以允許離開邊緣并移動到傷口中(11)。來自組的之前數據證明增加的O-糖基化部分通過提高包括斑珠蛋白的細胞橋粒組分的翻譯后穩定性來使細胞與細胞的粘附穩定(12)。

發明概述

簡言之，本發明涉及用于靶向OGT和/或促進傷口愈合的化合物、組合物和方法。

在本發明的某些實施方案中，提供了分離的反義OGT多核苷酸，其中多核苷酸的長度為18-30個核苷酸，且進一步地，其中分離的反義OGT多核苷酸包含與OGTmRNA雜交的序列。在一些實施方案中，分離的多核苷酸可具有如SEQIDNO:3所示的序列或與SEQIDNO:1或SEQIDNO:173所示的18-30核苷酸序列互補的序列。在一些實施方案中，分離的多核苷酸在中等至高嚴格性條件下與OGTmRNA雜交。

在一些實施方案中，本發明涉及一種藥物組合物，其包含(i)反義OGT多核苷酸和(ii)藥學上可接受的載體，其中所述多核苷酸的長度為18-30個核苷酸且具有與OGTmRNA雜交的序列。在一些實施方案中，反義OGT多核苷酸是第一傷口愈合劑和/或第一抗OGT劑。在一些實施方案中，藥物組合物還包含第二傷口愈合劑和/或第二抗OGT劑。

在一些實施方案中，藥物組合物的多核苷酸在中等至高嚴格性條件下與OGTmRNA雜交。在一些實施方案中，藥學上可接受的載體是凝膠、藻酸鹽、水凝膠或基于纖維素的載體，基于纖維素的載體選自羥甲基纖維素、羥乙基纖維素、羧甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素及其混合物。而且在某些實施方案中，藥學上可接受的載體包含醇、聚乙二醇-聚丙二醇共聚物、F-127和/或其混合物。