[發明專利]包含B-Raf抑制劑和第二抑制劑的組合療法

在審

• 申請號: 201480026686.X
• 申請日: 2014-03-19
• 公開（公告）號: CN105209073A
• 公開（公告）日: 2015-12-30
• 發明（設計）人: G·卡波尼格羅;D·斯圖爾特;L·德帕塞瓦爾
• 申請（專利權）人: 諾華股份有限公司
• 主分類號: A61K45/06
• 分類號: A61K45/06;A61K31/4184;A61K31/4439;A61K31/4745;A61K31/496;A61K31/506;A61K31/519;A61K31/53;A61K31/5377;A61P35/00
• 代理公司: 北京市金杜律師事務所 11256
• 代理人: 陳文平;黃海波

發明概要

本發明涉及B-Raf抑制劑與第二抑制劑組合用于治療罹患特征為B-Raf中的突變的增生性疾病的患者的用途，其中第二抑制劑基于在腫瘤樣品中所鑒定的遺傳變化而選擇。

發明背景

在了解與黑素瘤的產生相關聯的分子變化方面已取得重要進步。B-RAF的致癌突變(RAF/MEK/ERK途徑中的絲氨酸-蘇氨酸蛋白激酶)在黑素瘤中尤其常見，其中40至60％的黑素瘤攜帶B-Raf基因中的活化突變。氨基酸600處谷氨酸對纈氨酸的取代(V600E突變)代表超過95％的所報導的B-Raf突變。該突變組成型活化RAF/MEK/ERK途徑中的B-Raf和下游信號轉導，所述途徑發出癌細胞增殖和存活的信號。除黑素瘤以外，已知在其它增生性疾病中也發生此類B-Raf突變，例如結直腸癌、甲狀腺癌、尤其是乳頭狀甲狀腺癌、星形細胞瘤、胰腺癌和神經纖維瘤。盡管已知在用B-Raf抑制劑治療此類疾病時可產生顯著的結果，但通常用B-Raf抑制劑治療會產生抗性，其通常在極短時段內發生。

對用B-Raf抑制劑治療產生抗性有多種途徑。主要機理使得RAF/MEK/ERK信號傳導途徑在B-Raf抑制劑存在下再活化。該再活化可經由如下方式發生：經由基因擴增和過表達和/或配體產生而提高受體酪氨酸激酶(RTK)的活性、獲得NRAS和MEK1基因中的突變、經由諸如COT和RAF-1(CRAF)激酶的過表達繞過BRAF、表達突變BRAF等位基因的拼接變體和由于例如基因擴增而提高突變BRAF等位基因的表達。另外，經由RTK(諸如PDGFR-β和IGF-1R)的活化或PTEN基因的缺失而不同于MAPK途徑的存活途徑(諸如PIK3Cα信號傳導系統)的活化也可在抗性中起作用。其它機理(通過c-MET和RTK的FGFR家族)是在多發性黑素瘤中可促進對B-Raf抑制劑的抗性的潛在機理。

上述發現突顯了實時鑒定抗性機理的重要性，以便在B-Raf抑制劑治療時在復發后不久即開始合理的組合療法。使用基于機理的方法且比較復發時與治療前患者腫瘤中存在的遺傳變化，應有可能鑒定可能的抗性機理。這將有助于為個體患者選擇適當的藥物組合療法以更好地避開抗性。本發明涉及基于機理的組合治療方法以在對B-Raf抑制劑產生抗性后擴展和改善具有極差預后的患有BRAF突變晚期或轉移性黑素瘤的患者的治療選擇。

簡述

本發明涉及用B-Raf抑制劑治療罹患特征為B-Raf中的突變的增生性疾病的患者，其中通過如下方法降低對B-Raf抑制劑的抗性：

(a)確定取自患者的腫瘤樣品中的遺傳變化，

(b)對患者施用由B-Raf抑制劑和第二抑制劑組成的藥物組合療法，其中第二抑制劑基于腫瘤樣品中所存在的遺傳變化而選擇。

附圖簡述

圖1–示出如實施例4中所述的單一藥劑和組合形式的式(I)化合物和化合物F對體內HT-29細胞系模型的生長的作用。

圖2–示出如實施例4中所述的單一藥劑和組合形式的式(I)化合物和化合物F對體內RKO細胞系模型的生長的作用。

圖3–示出組合RAF抑制劑(式I化合物)和FGFR抑制劑化合物H對具有編碼BRAFV600E的BRAF等位基因的兩種黑素瘤衍生細胞系增殖的作用。示出了如實施例5中所討論的如使用基于阻抗的xCELLigence細胞分析儀所測得的(上圖A)COLO741和(下圖B)SK-MEL-5細胞系的實時生長。其中指示的FGF2和化合物H分別以100ng/ml和1uM的濃度補充到培養基。在(A)中以500nM且在(B)中以100nM使用式(I)化合物。

圖4-組合式(I)化合物與FGFR抑制劑化合物H和FGFR配體FGF2在體外對兩種BRAFV600E突變黑素瘤衍生細胞系的信號傳導的作用。示出了用式(I)化合物(100nM)、FGF2(100ng/ml)和化合物H(1uM)處理后從(A)COLO74和(B)SK-MEL-5細胞分離的磷酸化與總AKT、ERK1/2和MEK1/2蛋白的Western分析。如實施例5中所討論，用單獨和組合形式的藥劑處理細胞2和24小時。

詳細描述

本發明涉及一種治療罹患特征為B-Raf中的突變，尤其是B-Raf中的V600突變的增生性疾病的患者的方法，其包括：

(a)從患者獲得腫瘤樣品并測試包括BRAF、CRAF、CCND1、CDK4、HER2、IGF-1R、cMET、FGFR1、FGFR2、FGFR3EGFR、MAP2K1、MAP2K2、NRAS、KRASHRAS、PTEN、PIK3CA和P16的一組基因中的遺傳變化。