[發明專利]個性化的高純度肝細胞癌干細胞、所述干細胞的方法和用途

有效

• 申請號: 201480025747.0
• 申請日: 2014-03-06
• 公開（公告）號: CN105308177A
• 公開（公告）日: 2016-02-03
• 發明（設計）人: N.賈布里爾;C.T.弗里德里克森;A.科恩富思
• 申請（專利權）人: 新干細胞腫瘤學有限責任公司
• 主分類號: C12N5/0784
• 分類號: C12N5/0784;C12N5/095
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司 72001
• 代理人: 初明明;黃希貴

相關申請的交叉參考

本申請根據35U.S.C.§119(e)要求2013年3月7日提交的美國臨時專利申請61/774,517的權益。本申請也是2013年8月6日提交的國際申請PCT/US2013/053850的部分繼續申請，所述國際申請根據35U.S.C.§119(e)要求2012年8月15日提交的美國臨時專利申請61/683,477和2012年10月25日提交的美國臨時專利申請61/718,643的權益。所述申請的全部內容以引用的方式并入本文中。

技術領域

本發明涉及肝細胞癌干細胞、源自所述干細胞的免疫原性組合物以及制造和使用所述干細胞的方法。

背景技術

在實體腫瘤中，較小百分比的細胞具有作為親本腫瘤引發具有相同組織學異質性的腫瘤的能力。這些細胞被稱為癌癥干細胞，并且也被稱為腫瘤起始細胞或癌癥起始細胞。癌癥干細胞可以由一組特性來定義。首先，其具有使自身再生的能力。第二，其在移植時能夠建立新腫瘤。第三，其可以被表征為休眠或緩慢循環（細胞周期）的腫瘤細胞。第四，其可能是造成腫瘤對化學療法或放射療法的抵抗性的原因。第五，其取決于維持其再生并且產生更分化祖細胞的能力的特定微環境，其中所述環境維持癌癥干細胞的未分化狀態。這種微環境可以包括間充質細胞干細胞、組織相關聯的成纖維細胞以及內皮細胞。在體外培養的情況下形成球狀體的能力是可以有助于將特定細胞識別為癌癥干細胞的又一個特征。癌癥干細胞的一個非限制性定義是能夠再生親本腫瘤的完整異質性并且即使在多次傳代之后也連續地生長的細胞。

特定癌癥干細胞群體可能是贅瘤來源，并且可能是已經治療的癌癥復發的來源。另外，癌癥干細胞在組織中的亞群當暴露于某些信號中時可能重新啟動生長周期并且產生可以重建腫瘤的細胞。癌癥干細胞的小環境是休眠的，直到正確的信號傳導觸發再進入增殖周期。再進入信號可以來源于局部事件，如外傷、細胞損傷、微生物攻擊（病毒、細菌或真菌），或由局部生長因子、細胞因子或細胞間通信來介導。另外，激素可以調節組織特異性小環境中的干細胞。干細胞小環境的缺陷或突變可能導致上文功能的擾動。贅瘤可能由這類擾動產生，并且這些擾動包括影響對細胞周期的控制的隨機突變。導致癌癥的突變在個體之間變化。在患有一種類型的癌癥的那些人之間（如一個乳腺癌患者對比另一個乳腺癌患者）以及在不同類型的癌癥之間（如肝癌對比黑色素瘤）觀察到這類變化性。

針對癌癥發展出的療法包括涉及自體免疫反應的方法。這些方法包括使用新鮮采集的自體腫瘤細胞，所述自體腫瘤細胞解聚并調配成疫苗載體。另一種方法是樹突狀細胞疫苗，其中樹突狀細胞用自體腫瘤裂解物脈沖。又一種方法是用半乳糖聚合物對患者的腫瘤細胞進行體外修飾，并且將經修飾的腫瘤細胞注射回到所述患者中，其中半乳糖標記的腫瘤細胞更容易由抗原呈遞細胞（APC）吸收，由此增加抗腫瘤反應。這些涉及自體免疫療法的方法中的缺點是當使用塊狀腫瘤或塊狀腫瘤抗原作為免疫刺激劑時的低的抗原信噪比。大部分腫瘤細胞是相當分化的并且與正常細胞如血管成分、結締組織、分化的腫瘤細胞、非活細胞和壞死細胞以及正常宿主組織混合。癌癥干細胞僅代表腫瘤塊的較小部分，在更具攻擊性的腫瘤中有時最多4%，最常見小于1%。因此，當使用塊狀腫瘤作為抗原來源時，免疫反應是針對更分化的細胞，從而允許干細胞逃避攻擊并且可能造成腫瘤的復發或轉移。

另一種新療法是針對在癌癥中更豐富地表達的正常抗原的單一靶向抗體。特異性抗原靶向療法（如抗CD133、抗EpCAM、抗CD44、抗CD13等）是無辨別力的，并且影響正常細胞以及癌細胞，從而引起對患者的巨大不良作用。

發明內容

本文公開肝細胞癌（HCC）癌癥干細胞（CSC）、HCC-CSC細胞系以及用于治療肝細胞癌的包含HCC-CSC負載型樹突狀細胞的免疫原性組合物。