[發(fā)明專利]無血清細(xì)胞培養(yǎng)基

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201480023485.4
• 申請(qǐng)日: 2014-03-14
• 公開（公告）號(hào): CN105143444A
• 公開（公告）日: 2015-12-09
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: S·奧紹迪;A·約翰遜;S·勞倫斯
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 瑞澤恩制藥公司
• 主分類號(hào): C12N5/00
• 分類號(hào): C12N5/00
• 代理公司: 中國(guó)國(guó)際貿(mào)易促進(jìn)委員會(huì)專利商標(biāo)事務(wù)所 11038
• 代理人: 韓威威

1.細(xì)胞培養(yǎng)基，其是無血清的，包含≥0.09mM±0.014mM鳥氨酸。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的細(xì)胞培養(yǎng)基，包含≥0.20±0.03mM腐胺。

3.根據(jù)權(quán)利要求1和2中任一項(xiàng)所述的細(xì)胞培養(yǎng)基，包含0.09±0.014至0.9±0.14mM鳥氨酸。

4.根據(jù)權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)所述的細(xì)胞培養(yǎng)基，包含0.09±0.014mM、0.3±0.05mM、0.6±0.09mM或0.9±0.14mM的鳥氨酸。

5.根據(jù)權(quán)利要求1-4中任一項(xiàng)所述的細(xì)胞培養(yǎng)基，包含0.20±0.03mM至0.714±0.11mM腐胺。

6.根據(jù)權(quán)利要求1-4中任一項(xiàng)所述的細(xì)胞培養(yǎng)基，包含0.20±0.03mM、0.35±0.06mM、或0.714±0.11mM的腐胺。

7.根據(jù)權(quán)利要求1-6中任一項(xiàng)所述的細(xì)胞培養(yǎng)基，其中培養(yǎng)基是無水解物的。

8.根據(jù)權(quán)利要求1-6中任一項(xiàng)所述的細(xì)胞培養(yǎng)基，其中培養(yǎng)基是化學(xué)確定的。

9.根據(jù)權(quán)利要求1-8中任一項(xiàng)所述的細(xì)胞培養(yǎng)基，包含≥40±6mM氨基酸或其鹽的混合物。

10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的細(xì)胞培養(yǎng)基，其中氨基酸的混合物由丙氨酸、精氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、半胱氨酸、谷氨酸酸、甘氨酸、組氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、賴氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、色氨酸、酪氨酸和纈氨酸組成。

11.根據(jù)權(quán)利要求1-10中任一項(xiàng)所述的細(xì)胞培養(yǎng)基，包含一種或多種脂肪酸。

12.根據(jù)權(quán)利要求11所述的細(xì)胞培養(yǎng)基，其中一種或多種脂肪酸選自亞油酸、亞麻酸、硫辛酸、油酸、棕櫚酸、硬脂酸、花生酸、花生四烯酸、月桂酸、山萮酸、十烷酸、十二烷酸、己酸、木蠟酸、肉豆蔻酸和辛酸。

13.根據(jù)權(quán)利要求1-12中任一項(xiàng)所述的細(xì)胞培養(yǎng)基，包含核苷混合物。

14.根據(jù)權(quán)利要求13所述的細(xì)胞培養(yǎng)基，其中核苷混合物包含以下一種或多種：腺苷、鳥苷、胞苷、尿苷、胸苷和次黃嘌呤。

15.根據(jù)權(quán)利要求1-14中任一項(xiàng)所述的細(xì)胞培養(yǎng)基，包含腺苷、鳥苷、胞苷、尿苷、胸苷和次黃嘌呤。

16.根據(jù)權(quán)利要求1-15中任一項(xiàng)所述的細(xì)胞培養(yǎng)基，包含一種或多種二價(jià)陽離子。

17.根據(jù)權(quán)利要求16所述的細(xì)胞培養(yǎng)基，其中二價(jià)陽離子是鎂、鈣或二者。

18.根據(jù)權(quán)利要求1-17中任一項(xiàng)所述的細(xì)胞培養(yǎng)基，包含Ca²⁺和Mg²⁺。

19.一種用于培育細(xì)胞的方法，包括步驟：(a)提供根據(jù)權(quán)利要求1-18中任一項(xiàng)所述的細(xì)胞培養(yǎng)基，和(b)在細(xì)胞培養(yǎng)基中增殖或維持細(xì)胞以形成細(xì)胞培養(yǎng)物。

20.根據(jù)權(quán)利要求19所述的方法，其中細(xì)胞選自哺乳動(dòng)物細(xì)胞、鳥類細(xì)胞、昆蟲細(xì)胞、細(xì)菌細(xì)胞和酵母細(xì)胞。

21.根據(jù)權(quán)利要求19或權(quán)利要求20所述的方法，其中細(xì)胞是CHO細(xì)胞。

22.根據(jù)權(quán)利要求19-21中任一項(xiàng)所述的方法，其中細(xì)胞表達(dá)目的蛋白。

23.根據(jù)權(quán)利要求22所述的方法，其中目的蛋白是抗原結(jié)合蛋白。

24.根據(jù)權(quán)利要求22或23所述的方法，其中目的蛋白包含F(xiàn)c結(jié)構(gòu)域。

25.根據(jù)權(quán)利要求22-24中任一項(xiàng)所述的方法，其中目的蛋白是受體-Fc-融合蛋白。

26.根據(jù)權(quán)利要求25所述的方法，其中受體-Fc-融合蛋白是捕捉蛋白。

27.根據(jù)權(quán)利要求26所述的方法，其中捕捉蛋白是IL-1拮抗物或VEGF拮抗物。

28.根據(jù)權(quán)利要求22或23所述的方法，其中目的蛋白是抗體或抗體片段。

29.根據(jù)權(quán)利要求28所述的方法，其中抗體或抗體片段是重組人抗體或其片段。