[發明專利]融合免疫調節蛋白及其制備方法

有效

• 申請號: 201480015160.1
• 申請日: 2014-03-10
• 公開（公告）號: CN105121474B9
• 公開（公告）日: 2020-06-19
• 發明（設計）人: 納夾拉耶·高溫答帕;瑪利亞·梅麗娜·索雷斯;卡答納斯·薩斯特里
• 申請（專利權）人: 比奧孔有限公司
• 主分類號: C07K19/00
• 分類號: C07K19/00;C12N15/62;A61K38/17
• 代理公司: 中原信達知識產權代理有限責任公司 11219
• 代理人: 金海霞;楊青

本發明大體涉及生產用于癌癥治療的重組嵌合融合蛋白的領域，更具體地涉及抗-EGFRl-TGFβRII、抗-EGFR1-PD1和抗-CTLA4-PD1的融合分子及其生產方法，其中所述方法削減了生產成本并增加了重組嵌合融合蛋白的同源性。

相關申請的交叉引用

本申請要求在2013年3月12日提交的美國臨時專利申請61/777016的優先權，出于所有目的將所述申請的內容在此通過引用并入本文中。

發明背景

技術領域

本發明大體涉及生產用于癌癥治療的重組嵌合融合蛋白的領域，更具體地涉及抗-EGFRl-TGFβRII、抗-EGFR1-PD1和抗-CTLA4-PD1的融合分子其生產方法，其中所述方法削減了生產成本并增加了重組嵌合融合蛋白的同源性。

背景技術

盡管醫藥研究有許多進展，但是癌癥仍是美國死亡的第二主要原因。臨床護理的傳統模式如手術切除、放射療法和化學療法具有顯著的失效率，尤其對于實體腫瘤。因為原發腫瘤不響應或因為在起始部位處的再生或轉移導致的復發而發生失效。癌癥仍是醫藥研究和開發的中心焦點。

對癌癥的免疫療法已經探索了一個世紀，但是僅僅是在過去十年才將各種抗體基產品引入患有不同形式癌癥的患者的管理中。目前，這是臨床研究的最活躍領域之一，有許多抗體治療產品已經被批準用于腫瘤學。

使用特定抗體作為治療劑提供了相對于非靶向療法的優點，所述非靶向療法例如為通過藥物的口服或靜脈內施用的全身化學療法或放射療法。存在兩種類型的抗體基療法。更常用的類型是識別腫瘤抗原(即在腫瘤和癌細胞上表達且不在正常組織中表達的蛋白)和開發抗體，優選針對腫瘤抗原的單克隆抗體。人們便可以將任何治療劑如化療劑、放射性核素、改性毒素等結合至該抗體以實現治療劑對腫瘤的靶向治療。另一種抗體基療法是通過提供本身對于其靶向的腫瘤/癌細胞具有治療性能的抗體。該第二種形式的抗體基療法的附加優點是人們可以將另一種治療劑結合至該治療抗體以實現更有效的治療。任何抗體引導的療法和特別是使用單克隆抗體(mAb)的療法的主要優點是能夠將增加劑量的治療劑輸送至腫瘤，并且更多地使正常組織免受治療劑的副作用。

盡管識別了用于癌癥療法的幾種抗體，但仍需要識別新的和更有效的療法來克服免疫耐受性和激活T細胞應答。另外，即使分子工程已經改善了這種抗體基療法的前景，但是仍存在關于生成的重組產品的連續性的問題。

發明內容

本發明提供了用于生成如下的新型和一致的合成方法：同源重組融合免疫調節分子，更具體地，包括連接至免疫調節蛋白的靶向抗體的重組嵌合多肽。

為了介導對癌癥的免疫應答，T細胞活化和共刺激都是重要的。T細胞的共刺激主要通過CD28與其在抗原呈細胞(APC)上的B7家族的配體結合來介導。然而，在活化之后，T細胞表達被稱作細胞毒性T淋巴細胞抗原4(CTLA-4)的分子，其以比CD28高的多的親和力結合至B7配體，并且這種結合下調了T細胞活性。因此，包括結合至CTLA-4受體的抗體將阻斷與B7家族的配體的相互作用并增強抗腫瘤應答。

上面討論的B7配體之一程序性死亡配體-1(PDL1)通過如下阻斷了抗腫瘤免疫：(1)通過結合至其在T細胞上的受體PD1(CD279)而使腫瘤反應性T細胞耐受；(ii)通過經腫瘤細胞表達的PDL1的PD-1信號傳導使得腫瘤細胞對于CD8+T細胞和FasL介導的裂解是抗性的；和(iii)促進誘導的T調節細胞的生長和維持。因此，PDL1是自然抗腫瘤免疫和需要活化宿主T細胞介導的抗腫瘤免疫的癌癥免疫療法的主要障礙。這一理念得到了如下研究的支持，所述研究證明了PDL1-PD1相互作用的抗體阻斷改進了T細胞活化并減小了腫瘤進展。盡管PDL1或PD1的抗體已經在癌癥患者的小團體中顯示了療效，但是大多數患者沒有受益于抗體治療。因此，需要用于調節PD-L1功能的機制，其將產生新的普遍適用的用于將癌癥患者中的PD-L1介導的免疫抑制最小化的治療且比當前可獲得的PD-1或PD-L1的mAb更有效。