[發明專利]通過直接MALDI/MS檢測干液斑中化合物的方法

有效

• 申請號: 201480014782.2
• 申請日: 2014-03-13
• 公開（公告）號: CN105074471B
• 公開（公告）日: 2017-07-04
• 發明（設計）人: 瑪利亞·達洛亞;尼古拉斯·斯馬爾賈索;戴爾芬·德布瓦;埃德溫·德·波夫
• 申請（專利權）人: 智圖公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68
• 代理公司: 北京律和信知識產權代理事務所(普通合伙)11446
• 代理人: 武玉琴,冷文燕

1.一種檢測存在于液體中的至少一種化合物的方法，所述方法包括以下步驟：

步驟a，在載體上提供至少一個干液斑；

步驟b，固定所述載體上的所述干液斑的至少一部分到導電表面上；

步驟c，提供紫外光吸收化合物的水溶液或有機溶液；

步驟d，將所述紫外光吸收化合物沉積到固定在所述導電表面上所述載體上干液斑的至少一部分上；

步驟e，使載體上所述干液斑的至少一個區域經受基質輔助激光解吸電離過程來產生離子；

步驟f，用質譜儀分析儀獲取所述離子的全掃描模式質譜，和

步驟g，通過分析所述全掃描模式質譜確定至少一種化合物的存在。

2.根據權利要求1所述的方法，其中，步驟b包括：

·轉移來自于干液斑的至少一種化合物到膜上，

·固定所述膜的至少一部分到導電表面上。

3.根據權利要求1或2所述的方法，其中，所述在載體上提供干液斑的步驟包括以下幾步：

·提供生物液體樣本，

·沉積所述液體樣本的至少一個液滴到至少一個載體上，從而在載體上至少形成一個干液斑。

4.根據上述權利要求1或2所述的方法，其中，步驟g是這樣執行的：通過對應于存在于干液斑區域中至少一種化合物的至少一個計算出的質量電荷比(m/z)，選擇至少一個精確質量電荷比(m/z)。

5.根據上述權利要求1或2所述的方法，其中，獲取所述離子的全掃描模式質譜的步驟是這樣執行的：采用傅里葉變換離子回旋共振質譜儀、飛行時間質譜儀、四級桿離子阱飛行時間質譜儀、四極桿軌道阱質譜儀、線性離子阱軌道阱質譜儀來進行。

6.根據上述權利要求1或2所述的方法，其中，待檢測的化合物是計算出的質量電荷比低于或等于1500m/z的化合物。

7.根據上述權利要求1或2所述的方法，其中，將校準化合物沉積在導體表面，并且溶解的所述紫外光吸收化合物在所述步驟e之前沉積在所述校準混合物的至少一部分上。

8.根據權利要求7所述的方法，其包括：

步驟h，使所述校準混合物的至少一個區域經受基質輔助激光解吸電離來產生校準離子，

步驟i，用質譜分析儀獲取所述校準離子的全掃描質譜，

步驟j，利用所述校準離子的質譜來校準所述質譜儀的m/z刻度，

其中步驟i和步驟j可在步驟e之前或之后進行。

9.根據上述權利要求1或2所述的方法，其中，所述紫外光吸收化合物是在一個化合物集合內選擇，該化合物集合包括：α-氰基-4-羥基肉桂酸(CHCA)；二羥基苯甲酸(DHB)的異構體；反式-3,5-二甲氧基-4-羥基肉桂酸(SA)；煙酸；吡啶酸(PA)；反式-3-甲氧基-4-羥基肉桂酸(阿魏酸)；2,4,6-三羥基苯乙酮(THAP)；2,6-二羥基苯乙酮(DHA)；3-羥基吡啶甲酸(HPA)；3氨基喹啉；反式-3-吲哚丙烯酸(IAA)；地蒽酚(DIT)；1,8,9-三羥基蒽；2-(4-羥基苯基偶氮)-苯甲酸(HABA)；6-氮雜-2-硫代胸腺嘧啶(ATT)；3-氨基-4-甲基-5-硝基吡啶(AMNP)；5-氨基-1-萘酚(5,1-ANL)；5-羥基-1-萘酚(5,1-HNL)；或以上化合物的混合物。

10.根據上述權利要求1或2所述的方法，其中，步驟c的溶液進一步包括酸，該酸選自如下的集合，該集合包括：體積分數最優為0.05-1％的甲酸，三氟乙酸或磷酸，濃度范圍最優為0.01–0.2mol/L的醋酸或鹽酸。

11.根據上述權利要求1或2所述的方法，所述方法包括：

步驟k，獲取存在于干液斑內在至少2個區域離子的完整掃描模式質譜，相對于第二區域，第一區域更靠近所述干液斑的中心，

步驟l，對應于在所述干液斑區域內待檢測的至少一種化合物計算出的質量電荷比，選擇精確質量電荷比(m/z)，

步驟m，確定所述干液斑內的所述至少一種化合物的空間分布。

12.根據權利要求11所述的方法，其中，提供至少兩個干液斑所述步驟k是在所提供的每個不同干液斑的至少兩個區域上實現的，所述方法還包括步驟：

步驟n，在所提供的不同干液斑之間比較待檢測的至少一種化合物的空間分布。