[發明專利]用于對尿液樣品進行染色和處理的方法和組合物

有效

• 申請號: 201480013400.4
• 申請日: 2014-03-17
• 公開（公告）號: CN105102960B
• 公開（公告）日: 2017-12-29
• 發明（設計）人: J·科瑞明斯
• 申請（專利權）人: 艾瑞思國際股份有限公司
• 主分類號: G01N15/14
• 分類號: G01N15/14;G01N33/50
• 代理公司: 上海市華誠律師事務所31210
• 代理人: 湯國華

相關專利申請的交叉引用

本專利申請要求2013年3月15日提交的標題為“Analysis of Particles in Urine Samples(對尿液樣品中的粒子的分析)”的美國專利申請No.61/799,014的權益，特此以引用的方式將該專利申請全文并入。

技術領域

本發明總體涉及粒子造影劑并且更具體而言涉及供在全自動或半自動設備中使用以對流體樣品如尿液樣品中的粒子進行區分和定量的粒子造影劑組合物。

背景技術

尿沉渣分析是用于提供患者健康狀況概況的最常進行的診斷測試中的一種。尿液樣品可從患者身體獲得并保存在試管中供后期處理和分析。尿液樣品中某些特征性沉渣(也稱為有形成分(formed element))的出現可能是有臨床意義的和/或可指示受試者的病理狀況。

一般而言，異常的尿液可能含有多種有形成分，例如血細胞、上皮細胞、晶體、管型或微生物。例如，尿液樣品可含有血液源性的細胞。紅細胞或紅血細胞(RBC)可因為泌尿生殖系統中從腎小球到尿道的任何位點處的出血(血尿)而存在于尿液中。白細胞或WBC、嗜中性粒細胞、嗜酸性粒細胞的存在可能具有臨床意義。閃光細胞是比重為1.010或更低的低滲尿中見到的一類嗜中性粒細胞。淋巴細胞的存在已被用作移植后腎排異的早期指標。嗜酸性粒細胞與藥物誘導的間質性腎炎相關，可能存在源自腎臟或下尿路的黏液絲。

尿液樣品還可含有上皮起源的細胞。因為正常的剝落，健康個人的尿液中可能會存在也稱為腎小管細胞的一些腎上皮細胞。然而，過多腎小管細胞的存在是活動期腎臟疾病或腎小管損傷的表征。在尿液中存在的各種類型的上皮細胞(腎細胞、移行細胞或尿路上皮細胞和鱗狀細胞)中，腎上皮細胞是最有臨床意義的。它們與急性腎小管壞死、病毒感染(如巨細胞病毒)和腎移植排異相關。它們的存在也隨發燒、化學毒素、藥物(尤其是阿司匹林)、重金屬、炎癥、感染和腫瘤而增加。此外，包涵體的存在可見于病毒感染中，例如風疹和皰疹，尤其是巨細胞病毒的感染。

尿液還可含有移行上皮細胞或尿路上皮細胞。移行上皮細胞是多層上皮細胞，其沿尿道從腎盂到男性尿道的遠端以及到女性膀胱(膀胱三角區)的基部排列。可能難以將它們與腎上皮細胞相區分，但它們通常較大且更近球形。一些移行細胞存在于健康個人的尿液中。增加的數目與感染相關。這些細胞的大的團塊或片可見于移行細胞癌癥。

尿液還可含有鱗狀上皮細胞。鱗狀上皮細胞沿女性的尿道和男性尿道的遠端排列。女性中大量鱗狀細胞的存在通常指示陰道污染。

尿液還可含有線索細胞。線索細胞是另一類陰道起源的鱗狀細胞，可看到污染尿沉渣。該鱗狀上皮細胞覆蓋或包覆有一種細菌即陰道加德菌(Gardnerella vaginalis)，其存在是細菌性陰道炎的表征。

尿液可還含有卵形脂肪體、腎小管脂肪或腎小管脂肪體。這些團粒是充滿脂肪或脂質小滴的腎上皮細胞(或巨噬細胞)。該脂肪可以是中性脂肪(甘油三酯)或膽固醇。它們具有相同的臨床意義。尿液中卵形脂肪體的存在是疾病異常的表征并且不應該被忽視。它們通常可見于尿沉渣中的脂肪管型和脂肪小滴，并且與如腎病綜合征中所見的大量蛋白尿相關。

尿液還可含有諸如細菌和酵母之類的微生物。通常，尿液是無菌的，或者不含細菌。然而，某些細菌通常在堿性pH的尿液中見到。相關的沉渣調查結果可能包括WBC(嗜中性粒細胞)和管型(WBC管型、細胞管型、顆粒管型或細菌管型)的存在。盡管感染最經常是歸咎于腸起源的革蘭氏陰性桿菌，但傳染性生物體也可能是革蘭氏陽性球菌。

此外，酵母可能見于尿液中，尤其是由于陰道污染如來自酵母感染的女性患者的污染。由于尿糖的存在其還與糖尿病相關。酵母是常見的污染物(來自皮膚和環境)，在虛弱和免疫受到抑制或免疫失能的患者中感染是一個問題。

傳統上，尿液中的沉渣分析已在普通實驗室中通過使用顯微鏡目測來進行。使用這些方法，首先將尿液樣品進行離心分離和富集。在某些情況下將因而獲得的沉渣進行染色，然后加載在顯微鏡載片上，并使其在顯微鏡下經受手動測定和計數。

樣品制備步驟可包括通過離心濃縮尿液沉渣，并且有時候應用顯微鏡染色以增強對比，如各沉渣類型如RBC、WBC和上皮細胞之間的對比。在手動計數中，技術人員觀察濕法安裝的載玻片，從而在可見細胞的類型間作區分或者利用專業的判斷通過它們的外觀進行區分，并對預定區域內所觀察到的不同類型的尿沉渣的數目進行手動計數。