[發(fā)明專利]細(xì)胞培養(yǎng)方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201480009232.1
• 申請日: 2014-03-12
• 公開（公告）號: CN105073134A
• 公開（公告）日: 2015-11-18
• 發(fā)明（設(shè)計）人: H·普仁泰斯;R·體佳妮;B·畢龍貴
• 申請（專利權(quán)）人: 動量制藥公司
• 主分類號: A61K39/395
• 分類號: A61K39/395
• 代理公司: 北京紀(jì)凱知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11245
• 代理人: 趙蓉民;張全信

相關(guān)申請的交叉引用

本申請要求2013年3月14日提交的美國申請?zhí)?3/829,292的權(quán)益，該申請的內(nèi)容特此以其全部內(nèi)容結(jié)合在此。

發(fā)明領(lǐng)域

本發(fā)明總體上涉及細(xì)胞培養(yǎng)方法。

背景

治療性多肽是一類重要的治療性生物技術(shù)產(chǎn)品，并且治療性抗體(包括鼠抗體、嵌合抗體、人源化抗體和人抗體以及它們的片段)占據(jù)了治療性生物產(chǎn)品的大多數(shù)。

概述

在一個方面中，本發(fā)明的特征是一種產(chǎn)生具有目標(biāo)值的高甘露糖聚糖和巖藻糖基化聚糖中的一種或多種的重組蛋白制劑的方法，該方法包括：(a)提供基因工程化來表達(dá)一種重組蛋白的一種細(xì)胞；(b)在包含(例如，補(bǔ)充有)DMSO的一種培養(yǎng)基中，在該細(xì)胞表達(dá)該重組蛋白的條件下培養(yǎng)該細(xì)胞；并且(c)收獲(例如，純化或分離該細(xì)胞和/或培養(yǎng)基)由該細(xì)胞產(chǎn)生的該重組蛋白的一種制劑，其中該制劑具有該目標(biāo)值的高甘露糖聚糖和巖藻糖基化聚糖中的一種或多種。在一些實(shí)施例中，該培養(yǎng)基包含DMSO，DMSO存在的時間和數(shù)量能有效修改(例如，增加或減少)該重組蛋白中的高甘露糖聚糖和巖藻糖基化聚糖中的一種或多種。

在一些實(shí)施例中，該培養(yǎng)基包含至少約0.1％、0.2％、0.3％、0.4％、0.5％、0.6％、0.7％、0.8％、0.9％、1％、1.1％、1.2％、1.3％、1.4％、1.5％、1.6％、1.7％、1.8％、1.9％、2％、2.1％、2.2％、2.3％、2.4％、2.5％、2.6％、2.7％、2.8％、2.9％、3％、3.1％、3.2％、3.3％、3.4％、3.5％、3.6％、3.7％、3.8％、3.9％、4％、4.1％、4.2％、4.3％、4.4％、4.5％、4.6％、4.7％、4.8％、4.9％或5％的DMSO。在一些實(shí)施例中，該培養(yǎng)基包含約0.1％至5％的DMSO、約0.1％至約2％的DMSO、約0.1％至約1％的DMSO、約0.5％至約1％的DMSO、約1％至約1.5％的DMSO、約0.5％至約1.5％的DMSO、約0.6％至約1.4％的DMSO、約0.7％至約1.3％的DMSO、約0.8％至約1.2％的DMSO、約0.9％至約1.1％的DMSO、約1％至約2％的DMSO、約2％至約3％的DMSO、約3％至約4％的DMSO、約4％至約5％的DMSO、約0.1％至約2.5％的DMSO、約2.5％至約5％的DMSO、約0.1％至約2％的DMSO、約0.1％至約3％的DMSO、約0.1％至約4％的DMSO、約1％至約5％的DMSO、約2％至約5％的DMSO或約3％至約5％的DMSO。

在一些實(shí)施例中，該目標(biāo)值是一種參考治療性產(chǎn)品中的高甘露糖聚糖和巖藻糖基化聚糖中的一種或多種的一個水平。在一些實(shí)施例中，該目標(biāo)值是一種參考治療性抗體產(chǎn)品中的高甘露糖聚糖和巖藻糖基化聚糖中的一種或多種的一個水平。在一些實(shí)施例中，該目標(biāo)值是一個預(yù)先確定的藥物產(chǎn)品規(guī)格或一種藥物制劑的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)，例如分析證書(CofA)、檢測證書(CofT)或主生產(chǎn)批記錄(MasterBatchRecord)。在一些實(shí)施例中，該產(chǎn)品規(guī)格是FDA標(biāo)簽、醫(yī)囑(Physician’sInsert)、USP專論或EP專論中的一個產(chǎn)品描述。

在一些實(shí)施例中，該參考治療性產(chǎn)品選自下組，該組由以下各項(xiàng)組成：阿巴西普、阿昔單抗、阿達(dá)木單抗、阿柏西普、阿法賽特、阿侖單抗、巴利昔單抗、貝伐單抗、貝拉西普、賽妥珠單抗、西妥昔單抗、達(dá)利珠單抗、依庫珠單抗、依法珠單抗、依那西普、吉姆單抗、替依莫單抗、英利昔單抗、莫羅單抗-CD3、那他珠單抗、奧馬佐單抗、帕利珠單抗；帕木單抗、雷珠單抗、利洛西普、利妥昔單抗、托西莫單抗、以及群司珠單抗。

在一些實(shí)施例中，該目標(biāo)值是以下各項(xiàng)中的一個或多個：(a)至少約0.1％至約20％高甘露糖聚糖，例如，至少約0.1％、約0.5％、約1％、約2％、約3％、約4％、約5％、約6％、約7％、約8％、約9％、約10％、約11％、約12％、約13％、約14％、約15％、約16％、約17％、約18％、約19％、約20％或更多的高甘露糖聚糖；以及(b)至少約70％至100％的巖藻糖基化聚糖，例如，至少約70％、約75％、約80％、約85％、約90％、約95％或約100％的巖藻糖基化聚糖。高甘露糖聚糖可以是例如HM3、HM4、HM5、HM6、HM7、HM8、HM9或它們的組合。