[發(fā)明專利]細(xì)胞培養(yǎng)方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201480009232.1
• 申請日: 2014-03-12
• 公開（公告）號: CN105073134A
• 公開（公告）日: 2015-11-18
• 發(fā)明（設(shè)計）人: H·普仁泰斯;R·體佳妮;B·畢龍貴
• 申請（專利權(quán)）人: 動量制藥公司
• 主分類號: A61K39/395
• 分類號: A61K39/395
• 代理公司: 北京紀(jì)凱知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11245
• 代理人: 趙蓉民;張全信

1.一種產(chǎn)生具有目標(biāo)值的高甘露糖聚糖和巖藻糖基化聚糖中的一種或多種的重組蛋白制劑的方法，該方法包括：

(a)提供基因工程化來表達一種重組蛋白的一種細(xì)胞；

(b)在包含DMSO的一種培養(yǎng)基中，在該細(xì)胞表達該重組蛋白的條件下培養(yǎng)該細(xì)胞；并且

(c)收獲由該細(xì)胞產(chǎn)生的該重組蛋白的一種制劑，其中該制劑具有該目標(biāo)值的高甘露糖聚糖和巖藻糖基化聚糖中的一種或多種。

2.如權(quán)利要求1所述的方法，其中該重組蛋白是一種重組治療性蛋白。

3.如權(quán)利要求1或權(quán)利要求2所述的方法，其中該重組蛋白是一種重組治療性抗體。

4.如權(quán)利要求1-3中任一項所述的方法，其中該目標(biāo)值是一種參考治療性產(chǎn)品中的高甘露糖聚糖和巖藻糖基化聚糖中的一種或多種的一個水平。

5.如權(quán)利要求1-3中任一項所述的方法，其中該目標(biāo)值是一種參考治療性抗體產(chǎn)品中的高甘露糖聚糖和巖藻糖基化聚糖中的一種或多種的一個水平。

6.如權(quán)利要求1-5中任一項所述的方法，其中該目標(biāo)值是一個預(yù)先確定的藥物產(chǎn)品規(guī)格。

7.如權(quán)利要求4所述的方法，其中該參考治療性產(chǎn)品選自下組，該組由以下各項組成：阿巴西普、阿昔單抗、阿達木單抗、阿柏西普、阿法賽特、阿侖單抗、巴利昔單抗、貝伐單抗、貝拉西普、賽妥珠單抗、西妥昔單抗、達利珠單抗、依庫珠單抗、依法珠單抗、依那西普、吉姆單抗、替依莫單抗、英利昔單抗、莫羅單抗-CD3、那他珠單抗、奧馬佐單抗、帕利珠單抗；帕木單抗、雷珠單抗、利洛西普、利妥昔單抗、托西莫單抗、以及群司珠單抗。

8.如權(quán)利要求1-7中任一項所述的方法，進一步包括評價該重組蛋白制劑中的高甘露糖聚糖和巖藻糖基化聚糖中的一種或多種的水平。

9.如權(quán)利要求1-8中任一項所述的方法，其中該目標(biāo)值是以下各項中的一個或多個：

(a)0.1％至20％的高甘露糖聚糖，以及

(b)70％至100％的巖藻糖基化聚糖。

10.如權(quán)利要求1-9中任一項所述的方法，其中高甘露糖聚糖和巖藻糖基化聚糖中的一種或多種的目標(biāo)值高于通過在不包含DMSO的培養(yǎng)基中培養(yǎng)該細(xì)胞產(chǎn)生的一種制劑中的一個相應(yīng)水平。

11.如權(quán)利要求10所述的方法，其中該目標(biāo)值比該相應(yīng)水平高該相應(yīng)水平的至少10％。

12.如權(quán)利要求1-11中任一項所述的方法，其中該培養(yǎng)基包含0.5％至5％的DMSO。

13.如權(quán)利要求1-12中任一項所述的方法，其中該培養(yǎng)基進一步包括葡糖胺、賴氨酸、銨、銅、腐胺、葡萄糖、生長因子、維生素、脂質(zhì)、以及胨中的一種或多種。

14.一種產(chǎn)生重組蛋白制劑的方法，該方法包括：

(a)提供一個目標(biāo)值的高甘露糖聚糖和巖藻糖基化聚糖中的一種或多種；

(b)提供基因工程化來表達一種重組蛋白的一種細(xì)胞；

(c)在包含DMSO的一種培養(yǎng)基中，在該細(xì)胞表達該重組蛋白的條件下培養(yǎng)該細(xì)胞；

(d)收獲由該細(xì)胞產(chǎn)生的該重組蛋白的一種制劑；并且

(e)如果該制劑滿足高甘露糖聚糖和巖藻糖基化聚糖中的一種或多種的目標(biāo)值，將該制劑處理成一種藥物產(chǎn)品。

15.如權(quán)利要求14所述的方法，進一步包括評價該重組蛋白制劑中的高甘露糖聚糖和巖藻糖基化聚糖中的一種或多種的水平。

16.如權(quán)利要求14或權(quán)利要求15所述的方法，其中該培養(yǎng)基進一步包括葡糖胺、賴氨酸、銨、銅、腐胺、葡萄糖、生長因子、維生素、脂質(zhì)、以及胨中的一種或多種。

17.一種提高重組蛋白制劑中的高甘露糖聚糖、唾液酸化聚糖以及3,3,1,0,0聚糖中的一種或多種的水平的方法，該方法包括：

(a)提供基因工程化來表達一種重組蛋白的一種細(xì)胞；

(b)在包含DMSO的一種培養(yǎng)基中，在該細(xì)胞表達該重組蛋白的條件下培養(yǎng)該細(xì)胞；并且

(c)收獲由該細(xì)胞產(chǎn)生的該重組蛋白的一種制劑，其中該制劑具有相對于通過在不包含DMSO的培養(yǎng)基中培養(yǎng)該細(xì)胞產(chǎn)生的該重組蛋白的一種制劑中的一個相應(yīng)水平而言提高的水平的高甘露糖聚糖、唾液酸化聚糖以及3,3,1,0,0聚糖中的一種或多種。