[發明專利]用于釋放病毒樣顆粒的方法有效

申請號：	201480008914.0	申請日：	2014-02-14
公開（公告）號：	CN105073131B	公開（公告）日：	2017-06-27
發明（設計）人：	V.法欽格;M.斯諾	申請（專利權）人：	英特維特國際股份有限公司
主分類號：	A61K39/12	分類號：	A61K39/12
代理公司：	中國專利代理(香港)有限公司72001	代理人：	翟建偉,萬雪松
地址：	荷蘭博***	國省代碼：	暫無信息
權利要求書：	查看更多	說明書：	查看更多
摘要：
搜索關鍵詞：	用于釋放病毒顆粒方法
鉆瓜網技術展會專利詞庫專利權人專利榜在售專利公布日期熱門專利

【權利要求書】：

1.用于從昆蟲細胞中釋放桿狀病毒表達的無包膜病毒的病毒樣顆粒（VLP）的方法，其特征在于所述方法無裂解或細胞破碎步驟，并且包括將所述昆蟲細胞與鹽混合的步驟，其中產生于混合的所述鹽的水溶液包含至少300mOsmol/l的鹽，所述鹽的陽離子選自堿金屬和堿土金屬，并且所述鹽的陰離子選自Cl^-、Br^-和I^-，其中所述VLP是豬圓環病毒2型（PCV2） VLP，并且其中所述昆蟲細胞是草地貪夜蛾（Spodoptera frugiperda）21（Sf21）細胞或草地貪夜蛾9（Sf9）細胞。

2.根據權利要求1的方法，其特征在于將所述昆蟲細胞與鹽混合的步驟之前為其中濃縮所述昆蟲細胞的濃縮步驟。

3.根據權利要求1或2的方法，其特征在于所述陽離子選自Na⁺、Mg²⁺、Ca²⁺和K⁺。

4.根據權利要求3的方法，其特征在于所述鹽選自NaCl、KCl、CaCl₂和MgCl₂。

5.根據權利要求1的方法，其特征在于產生于混合的所述鹽的水溶液基本上由根據權利要求1-4中任一項的鹽和水組成。

6.根據權利要求1或2的方法，其特征在于所述鹽的水溶液保持在35-50℃之間的溫度下。

7.根據權利要求6的方法，其特征在于所述鹽的水溶液保持在40-45℃之間的溫度下。

8.用于純化桿狀病毒表達的無包膜病毒的病毒樣顆粒（VLP）的方法，所述方法包括下述步驟：

a）用編碼VLP-蛋白質的重組桿狀病毒感染昆蟲細胞，

b）培養所述昆蟲細胞，

c）從所述昆蟲細胞中釋放所述VLP，

d）分離所述VLP，

其特征在于所述方法無裂解或細胞破碎步驟，并且步驟c包括根據權利要求1-7中任一項的用于釋放所述VLP的方法，其中所述VLP是PCV2 VLP，并且其中所述昆蟲細胞是Sf21細胞或Sf9細胞。