[發明專利]因子X突變體

有效

• 申請號: 201480007229.6
• 申請日: 2014-02-03
• 公開（公告）號: CN104995297B
• 公開（公告）日: 2018-10-26
• 發明（設計）人: J-L·普蘭迪爾
• 申請（專利權）人: 法國血液分割暨生化制品實驗室
• 主分類號: C12N9/64
• 分類號: C12N9/64;A61K38/48;C12N15/12
• 代理公司: 北京市中咨律師事務所 11247
• 代理人: 黃革生;林柏楠

本發明涉及包含Seq ID No.1的突變的序列的蛋白質，所述SEQ ID No.1的突變的序列包含至少一個突變A、A'、B、C或C'，其中：突變A由用選自DFLAEGLTPR、KATN*ATLSPR和KATXATLSPR的序列替換序列SEQ ID No.1的氨基酸43至52組成，突變A’由用選自TSKLTR、FNDFTR、LSSMTR、PPSLTR和LSCGQR的序列替換序列SEQ ID No.1的氨基酸47至52組成，突變B由選自DFLAEGLTPR、KATN*ATLSPR、KATXATLSPR、TSKLTR、FNDFTR、LSSMTR、PPSLTR和LSCGQR的序列在序列SEQ ID No.1的氨基酸52和53之間的插入組成，突變C由選自DFLAEGLTPR、KATN*ATLSPR和KATXATLSPR的序列在序列SEQ ID No.1的氨基酸52和53之間的插入，和序列SEQ ID No.1的氨基酸4至13的缺失組成，突變C'由選自TSKLTR、FNDFTR、LSSMTR、PPSLTR和LSCGQR的序列在序列SEQ ID No.1的氨基酸52和53之間的插入，和序列SEQ ID No.1的氨基酸4至9的缺失組成。

本發明涉及因子X突變體，及其在治療血液凝固病癥中的用途。

因子X是存在于血液中的蛋白質。此蛋白質在凝固級聯中起重要作用。血液凝固是復雜的過程，這使得能夠防止經由受損的血管的血液流動。一旦血管破損，負責凝固的元件彼此相互作用以在血管破損位點處形成塞，止血塞。凝固因子是固定止血塞和穩定凝塊所必需的。

正常凝塊的形成分四個步驟發生：

步驟1：血管被破壞。

步驟2：血管收縮以限制對受損區域的血液供應。

步驟3：血小板粘附至在血管受損期間暴露的內皮下間隙，和受刺激的血管壁。血小板散布，這就是所謂的“血小板粘附”。這些散布的血小板釋放激活其他相鄰的血小板的物質，使得它們在病灶位聚集以形成止血塞。這就是所謂的“血小板聚集”。

步驟4：激活的血小板的表面因此構成在其上可進行血液凝固的表面。在血液中循環的凝血蛋白(包括因子X)在血小板的表面處激活，并形成纖維蛋白凝塊。

這些凝固蛋白(即因子I，II，V，VIII，IX，X，XI，XII和XIII，以及Von Willebrand因子)以鏈反應運行，即凝固級聯。

處于激活形式的因子X(Xa)更特別地參與凝血酶原(因子II)激活為凝血酶(因子IIa)，特別是當其與激活的輔因子V復合以形成凝血酶原酶復合物時。這個因子是凝固級聯中的基本元件。

當這種因子欠缺時，發生出血，例如鼻出血(流鼻血)，關節積血(血液滲出到關節腔中)，腸胃出血。因子X缺陷極為罕見。它的傳遞是常染色體隱性的，其發病率為1/1000000。

FX激活發生于：

-由于因子VIIa/組織因子復合物的凝固級聯的起始步驟的非常早期期間，以導致少量凝血酶的形成的相對無效的反應發生。

-或者由少量凝血酶產生的正反饋導致的凝固級聯擴增的步驟期間，導致因子VIII和IX的激活。

后者中的兩種因子在患有A型血友病和B型血友病的個體中缺失，因此導致在沒有治療時能夠致死的出血性病癥。這些因子的缺乏意味著不能生成足夠量的激活的因子X以終止出血。

因此，需要經修飾的因子X，所述經修飾的因子X可以被凝血酶激活，并使得能夠通過直接利用凝固開始期間生成的少量凝血酶在缺乏因子VIII和/或因子IX的情況下具有有效凝固。

發明者已經鑒定了具體的因子X突變體(也稱為因子X變體)，其能有效地由凝血酶激活，因而使得能夠在缺乏因子VIII，因子IX和甚至因子X的情況下修復凝固。確實，正如實例中所示，這些因子X突變體可以由凝血酶激活，并允許有效的凝固，甚至在缺乏內源性因子VIII和/或因子IX和/或因子X的情況下。