[發(fā)明專利]油藏中微生物菌體的提取方法及分析方法在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 201410855816.2 | 申請日： | 2014-12-31 |
| 公開（公告）號： | CN104560824A | 公開（公告）日： | 2015-04-29 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 馬德勝;宋文楓;魏小芳;吳康云 | 申請（專利權(quán)）人： | 中國石油天然氣股份有限公司 |
| 主分類號： | C12N1/20 | 分類號： | C12N1/20;E21B43/22;E21B43/34 |
| 代理公司： | 北京三友知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11127 | 代理人： | 韓蕾 |
| 地址： | 100007 *** | 國省代碼： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 油藏 微生物 菌體 提取 方法 分析 | ||
1.一種油藏中微生物菌體的提取方法，該方法包括以下步驟：
1)配制微生物萃取液，每升該萃取液的組成為：K2HPO40.3～0.5g，KH2PO40.25～0.4g，MgSO40.1～0.3g，MnSO41.5～2.5mg，F(xiàn)e2(SO4)32.0～3.0mg，NaCl?0.1～0.2g，檸檬酸鈉0.3～0.6g，葡萄糖0.8～1.2g，水余量；
2)將微生物萃取液與油藏樣品按照1:0.5～3的體積比混合，充分振蕩接觸；
3)將上述微生物萃取液與油藏樣品的混合物置于50-60℃靜置10～30分鐘，混合物分為油層和水層，分離出水樣；
4)將油層與水層分離，在分離出的油樣中再次加入0.5～3倍提及的微生物萃取液，置于50-60℃靜置10～30分鐘，使混合物分為油層和水層，分離出水樣；
5)反復(fù)上述萃取步驟3～7次，合并所分離出的水樣，從中提取微生物菌體。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中，所述油藏樣品為原油、油泥或油水混合樣品。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中，所述微生物萃取液的組成為：以每升萃取液計，其中包括：K2HPO40.4g，KH2PO40.3～0.35g，MgSO40.15～0.25g，MnSO41.5～2.5mg，F(xiàn)e2(SO4)32.0～3.0mg，NaCl?0.13g，檸檬酸鈉0.4～0.5g，葡萄糖1.0g，水余量。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中，步驟2)中微生物萃取液與油藏樣品的混合物的總體積為100ml～1000ml。
5.根據(jù)權(quán)利要求1或4所述的方法，其中，步驟2)中微生物萃取液與油藏樣品的混合比例為80ml～500ml：80ml～200ml。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中，步驟3)、步驟4)中，微生物萃取液與原油的混合物是置于50℃靜置18～25分鐘、55℃靜置18～22分鐘、或是60℃靜置15～20分鐘。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中，微生物萃取液與原油的混合物在50-60℃的總萃取時間控制在90～110分鐘。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中，步驟5)中是利用DNA提取試劑盒從合并的水樣中提取微生物菌體。
9.一種油藏中微生物菌體的分析方法，該方法包括：
按照權(quán)利要求1～8任一項所述的方法從油藏樣品中提取微生物菌體；
對所提取的微生物菌體進(jìn)行分析。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的方法，其中，所述分析包括：菌落多樣性分析，或油藏原始微生物菌落分布狀況和分布比例分析。
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