[發明專利]一種低分子量蜂花粉蛋白肽及其制備方法

在審

• 申請號: 201410849370.2
• 申請日: 2014-12-29
• 公開（公告）號: CN104593461A
• 公開（公告）日: 2015-05-06
• 發明（設計）人: 陳光;敖建芳;劉銳濤
• 申請（專利權）人: 唯美度科技（北京）有限公司
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06;C07K1/34
• 代理公司: 北京路浩知識產權代理有限公司 11002
• 代理人: 王文君

技術領域

本發明涉及一種低分子量蜂花粉蛋白肽及其制備方法，屬于生物技術領域。

背景技術

花粉是植物的雄性細胞，是植物的“精子”。蜜蜂采集回巢的花粉，稱為蜂花粉。蜂花粉中除含有一般花粉的成分外，還含有蜜蜂在采集進加進去的少量花粉蜜與分泌物，因此蜂花粉與一般花粉的成分略有差異。其外觀形狀也不同于粉末狀的花粉粒，而是經蜜蜂加工過的多為扁圓形的花粉團。花粉粒直徑多在10－50微米之間，花粉粒表面有各種不規則的溝紋，并有明顯的萌發孔。

現有蜂花蛋白肽主要是通過酶解花粉而獲得，如以蜂花粉為原料,將蜂花粉破壁、脫脂，加入蛋白酶進行酶解反應，所得酶解物具有抗氧化等作用,可制成粉劑、片劑、膠囊、沖劑等。但這種酶解產物產率低，蛋白功效較差，而且較易引起過敏。

發明內容

本發明第一目的是提供一種低分子量蜂花粉蛋白肽的制備方法，所得蜂花粉蛋白肽分子量低、色澤均一，可用于食品、藥品、化妝品和保健品中。

為了實現上述目的，本發明采用如下技術方案：

一種低分子量蜂花粉蛋白肽的制備方法，包括以下步驟：

1)將破壁蜂花粉加入稀鹽酸溶液中，再加入胃蛋白酶，35-38℃下反應3～5h，得到體系1；

2)將體系1的pH值調至6.0～8.0，加入中性蛋白酶，48-51℃反應2～3h，得到體系2；

3)維持體系2的pH值不變，加入菠蘿蛋白酶，53-56℃反應3～5h，再升溫至88-90℃，維持10～20min，得到體系3；

4)將體系3進行抽濾(抽濾膜孔徑0.45μm)，所得濾液經脫苦脫色、真空濃縮、噴霧干燥，得到蜂花粉蛋白肽。

本發明通過胃蛋白酶、中性蛋白酶、菠蘿蛋白酶三步酶解法，對破壁蜂花粉進行酶解，可以獲得分子量在3000Da以下的低分子量蜂花粉蛋白肽。

其中，所述破壁蜂花粉與稀鹽酸的質量體積比為1：5～15(g/mL)，所述稀鹽酸質量體積百分數為0.2～0.4％；

其中，所述胃蛋白酶的活力單位為2500～4000u/g；胃蛋白酶：破壁蜂花粉的質量比為0.25～0.3:100；

其中，所述中性蛋白酶的活力單位為3萬～6萬u/g；中性蛋白酶：破壁蜂花粉的質量比為0.45～0.5:100；

其中，所述菠蘿蛋白酶的活力單位為40萬～80萬u/g；蘿蛋白酶：破壁蜂花粉的質量比為0.8～1:100；

其中，所述脫苦脫色是指在濾液中加入活性炭，室溫下攪拌1-3h后，過濾除去活性碳的過程。

作為本發明優選的實施方式，所述步驟4)中，體系3進行抽濾(抽濾膜孔徑0.45μm)，所得濾液選用分子截留量為2kd的超濾膜進行超濾，收集濾液，經脫苦脫色、真空濃縮、噴霧干燥，即得蜂花粉蛋白肽。經過進一步的超濾處理，可以獲得分子量小于1000Da的低分子量蜂花粉蛋白肽。

本發明第二目的是提供上述制備方法所得的蜂花粉蛋白肽。

采用本發明所述的技術方案制得的蜂花粉蛋白肽分子量低，抗氧化效果好，無異味，可用于食品、藥品、化妝品和保健品中。

附圖說明

圖1是本發明所述蜂花粉蛋白肽制備方法的工藝流程圖。

具體實施方式

下面將結合實施例對本發明的實施方案進行詳細描述，但是本領域技術人員將會理解，下列實施例僅用于說明本發明，而不應視為限定本發明的范圍。實施例中未注明具體條件者，按照常規條件或制造商建議的條件進行。所用試劑或儀器未注明生產廠商者，均為可以通過市購獲得的常規產品。

實施例1一種低分子量蜂花粉蛋白肽制備

步驟如下：

1)取100克破壁蜂花粉加入1L濃度為0.3％的稀鹽酸溶液中，再加入0.3克比活為3500u/g的胃蛋白酶，37℃反應3h，得到體系1；

2)將體系1pH值調至6.8，加入0.5克比活為5萬u/克的中性蛋白酶，升溫至50℃繼續反應2h，得到體系2；

3)維持體系2pH值不變，加入0.8克比活為80萬u/g的菠蘿蛋白酶，升溫至55℃反應5h，反應結束后，將體系升溫至90℃，保持15min，使酶滅活，得到體系3；

4)體系3經0.45μm濾膜抽濾后，濾液直接經脫苦脫色、真空濃縮后、噴霧干燥后即得的低分子量蜂花粉蛋白肽。

實施例2一種低分子量蜂花粉蛋白肽制備

采用與實施例1相同的方法制備蜂花粉蛋白肽，區別在于：