[發明專利]一種酶預處理-微波輔助提取-殼聚糖絮凝技術純化食用菌多糖的方法

在審

• 申請號: 201410845693.4
• 申請日: 2015-08-04
• 公開（公告）號: CN104497159A
• 公開（公告）日: 2015-07-29
• 發明（設計）人: 韓偉;羅文鋒;滿寧;韓樂;馬迪;豆欣欣;汪佳丹
• 申請（專利權）人: 華東理工大學
• 主分類號: C08B37/00
• 分類號: C08B37/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及一種從食用菌中提取純化有效成分的方法。

背景技術

近年來，植物中天然活性成分已經成為人類尋找新藥的重要手段之一。食用菌多糖具有抗氧化、抗腫瘤和免疫調節等作用，具有潛在開發價值，但由于其有效成分含量低，怎樣從中有效獲取純度高的食用菌多糖是工藝研究工作者面對的重要課題。

傳統的提取技術，如滲漉法、索氏提取法、浸漬法、回流提取等普遍存在提取效率低，能耗高，生產周期長等缺點；純化方法常用水提醇沉法，具有生產周期長，乙醇使用量大等缺點。在此背景下，一些新的提取分離純化技術應運而生。

植物細胞壁主要是由纖維素、果膠質等物質構成的致密結構，采用合適的酶對食用菌細胞壁酶解，可以達到破壞細胞壁結構，降低有效成分溶出時的阻力，從而提高了提取效率。微波輔助提取技術是利用微波“體加熱”特性，使得能量能直接作用于被加熱物質，相比傳統加熱方式，能量利用效率更高，而且由于非極性或者弱極性成分對微波吸收弱，從而使微波提取具有選擇性。

絮凝技術主要采用電中和及吸附架橋原理，打破液體體系穩定性，使得雜質粒子絮凝沉降，從而起到純化效果。絮凝劑種類繁多，有天然類和人工合成類。殼聚糖為甲殼素脫乙酰化產物，來源廣泛、性質穩定、安全無毒，為陽離子聚合物，可用于食品及醫藥領域。

如何整合酶、微波、殼聚糖絮凝各自的優點，采取集成的方法，從食用菌中獲取多糖類物質，是本領域的一個重要課題，具有重要的研究價值。

發明內容

本發明的目的是提供一種酶預處理-微波輔助提取-殼聚糖絮凝集成技術分離純化食用菌多糖的方法，以滿足相關領域發展的需求。

技術方案：先通過酶解預處理，使得食用菌細胞壁受損，然后進行微波加熱，強化活性成分從細胞中溶出，然后再對提取液進行殼聚糖絮凝純化，除去一些如蛋白類高分子雜質。具體步驟如下：

（1）采用乙醇對食用菌進行回流預處理，并干燥后粉碎得到預處理食用菌粉末；

（2）將步驟（1）得到的預處理食用菌粉末加入酶，并用溶劑水攪拌混合后酶解，得到混合物；

（3）將步驟（2）得到的混合物轉移到微波提取裝置中，微波輻射1～4min，冷卻到室溫后減壓抽濾，得到食用菌多糖提取液；

（4）將步驟（3）得到的食用菌多糖提取液進行濃縮，在攪拌狀態下加入殼聚糖進行絮凝純化，然后離心過濾，得到純化后的食用菌多糖溶液；然后干燥處理，即得所述純化食用菌多糖。

步驟（1）中食用菌與乙醇的重量比為1：10～1：30，回流時間為1～2h，干燥溫度為50～70℃。

步驟（2）中食用菌的液固比（溶劑體積：食用菌質量）為20：1～40：1，所述酶選自纖維素酶、果膠酶或兩者的混合物，溶劑水的pH值為2～7，所述酶的質量占所述粉末質量的百分濃度為0%～3.5%，酶解溫度為35～65℃，酶解時間為15～60min。

步驟（3）的微波提取裝置的輸出功率為500～1000W，頻率為2450MHz，輻射過程中鼓泡攪拌。

步驟（4）的濃縮比為4?mL：1?g～14?mL：1?g，所述濃縮比的是指食用菌多糖提取液的體積與預處理食用菌粉末的質量之間的比例；殼聚糖以體積計算的加入量占預處理食用菌粉末質量的比例為0.4～1.2mL/g，絮凝純化的溫度為5～80℃，體系的pH值為1～6，絮凝純化時間為0.25～4h。

所述食用菌為金針菇或灰樹花。

本專利集成酶預處理、微波輔助提取和殼聚糖絮凝技術，簡化操作，降低成本，強化了提取效果，縮短提取純化時間，保證有效成分的質量。具體有以下優勢：

1.?本專利對藥材的顆粒度沒有限制。常用方法都會把藥材粉得超細，這樣不便于后續的分離操作，因此相對來說本專利的工序更加便捷；

2.?雖然一些專利提取方面采用單一提取技術，或者兩種技術集成。但分離環節普遍使用傳統的醇沉工藝，相比本專利的絮凝工藝需要花好幾十倍的時間，所以本專利能顯著提高生產效率；

3.?本專利整個生產環節都是以水做溶劑，其中殼聚糖是FDA認可的食品添加劑，可以確保產品質量，無其他有機溶劑殘留；

4.?雖然提取效果與傳統回流提取效果相差不多，但是該方法更加節能，省時，安全。

具體實施方式

實施例1

從金針菇中提取純化金針菇多糖

（1）將曬干的金針菇按照料液比1：10在乙醇中回流2h，65℃下熱風干燥；