[發明專利]富勒烯單加成線肽及其制備方法和應用

在審

• 申請號: 201410839223.7
• 申請日: 2014-12-30
• 公開（公告）號: CN104478994A
• 公開（公告）日: 2015-04-01
• 發明（設計）人: 張靜;張曉磊;何婷
• 申請（專利權）人: 鄭州大學
• 主分類號: C07K5/103
• 分類號: C07K5/103;C07K7/06;C07K1/107;A61P39/06;A61P35/00
• 代理公司: 鄭州優盾知識產權代理有限公司 41125
• 代理人: 鄭園;孫詩雨

1.一種富勒烯單加成線肽，其特征在于結構式如下：

其中L為RGD肽、TISWPPR?肽和PHLATLF?肽。

2.根據權利要求1所述的富勒烯單加成線肽的制備方法，其特征在于包括以下步驟：

（1）N-取代富勒烯單加成吡咯烷與只有一個活性羧基的酸性氨基酸在DCC、HOBT、DMAP的存在下，在氮氣保護下，用液相合成法進行縮合反應，室溫避光攪拌反應24~72小時，反應結束后，硅膠柱層析分離純化得到氨基和羧基均被保護的富勒烯單加成氨基酸；

（2）將氨基和羧基均被保護的富勒烯單加成氨基酸加入TFA/DCM的混合溶液中，室溫攪拌反應0.5~12h，經脫保脫除羧基保護基得到僅含氨基保護基的富勒烯單加成氨基酸；

（3）將僅含氨基保護基富勒烯單加成氨基酸溶于DMF/DCM混合溶劑中，然后加入樹脂-線肽、HBTU、HOBT和DIEA，在室溫下用固相合成法進行縮合反應，產物經脫保、裂解得到富勒烯單加成線肽；

以上各個步驟均在無水無氧的條件下進行；

所述步驟（1）中的只有一個活性羧基的酸性氨基酸為天冬氨酸或谷氨酸；

所述步驟（3）中的樹脂-線肽為樹脂-RGD肽、樹脂-TISWPPR?肽或樹脂-PHLATLF?肽。

3.根據權利要求1所述的富勒烯單加成線肽的制備方法，其特征在于：所述步驟（1）中N-取代富勒烯單加成吡咯烷、只有一個活性羧基的酸性氨基酸、DCC、HOBT和DMAP的物質的量之比為0.05-0.2:2:2:2:0.2。

4.根據權利要求1所述的富勒烯單加成線肽的制備方法，其特征在于：所述步驟（2）中TFA/DCM的混合溶液中TFA和DCM的體積比為0.2-9:1。

5.根據權利要求1所述的富勒烯單加成線肽的制備方法，其特征在于：所述步驟（3）中僅含氨基保護基的富勒烯單加成氨基酸、樹脂-線肽、HBTU、HOBT和DIEA的物質的量之比為2:1-6:2:2:4。

6.根據權利要求1所述的富勒烯單加成線肽的制備方法，其特征在于：所述步驟（3）中DMF/DCM混合溶劑中DMF和DCM的體積比為1:1。

7.根據權利要求1所述的富勒烯單加成線肽的制備方法，其特征在于：所述步驟（3）在室溫下用固相合成法進行縮合反應是在140?r/min的條件下振蕩8-24h。

8.根據權利要求1所述的富勒烯單加成線肽的制備方法，其特征在于：所述步驟（3）中脫保所用試劑為哌啶/DMF的混合溶液，其中哌啶和DMF的體積比為1:4，在室溫、140?r/min的條件下振蕩15~30min。

9.根據權利要求1所述的富勒烯單加成線肽的制備方法，其特征在于：所述步驟（3）中裂解所用試劑為TFA/TIS/H₂O的混合溶液，其中TFA、TIS和H₂O?的體積比為95:2:3，在室溫、140?r/min的條件下振蕩2-4?h。

10.根據權利要求1所述的富勒烯單加成線肽得到的納米體系及其在清除自由基方面的應用。