[發明專利]一種葡萄糖醛酸轉移酶UGT1A1的特異性熒光探針及其應用

在審

• 申請號: 201410837037.X
• 申請日: 2014-12-29
• 公開（公告）號: CN104592986A
• 公開（公告）日: 2015-05-06
• 發明（設計）人: 崔京南;馮磊
• 申請（專利權）人: 大連理工常熟研究院有限公司
• 主分類號: C09K11/06
• 分類號: C09K11/06;C07D307/68;C12Q1/48;C12Q1/04
• 代理公司: 無
• 代理人: 無

1.一種葡萄糖醛酸轉移酶UGT1A1的特異性熒光探針，其特征在于：該探針底物可被UGT1A1特異性催化生成相應的O-葡萄糖醛酸化產物，其結構式如式(1)所示，該底物為(E)-2-(4-(4-羥基苯乙烯基)-3-氰基-5,5-二甲基呋喃-2(5H)-亞基)丙二腈，簡寫為TCF。

2.一種權利要求1所述葡萄糖醛酸轉移酶UGT1A1的特異性熒光探針的應用，其特征在于：采用上述式(1)化合物作為UGT1A1亞酶的特異性底物，進行水解反應，通過定量檢測單位時間內的底物消除率或其葡萄糖醛酸化產物的生成率來定量測定不同生物體系中UGT1A1的活性。

3.根據權利要求2所述葡萄糖醛酸轉移酶UGT1A1的特異性熒光探針的應用，其特征在于：所述體外孵育反應條件為：底物濃度介于1/10～10Km之間；孵育體系pH介于5.5～10.5之間；反應溫度介于20～60℃之間。

4.根據權利要求2所述葡萄糖醛酸轉移酶UGT1A1的特異性熒光探針的應用，其特征在于：所述的生物體系為重組表達UGT1A1單酶、人或動物組織制備液、各類組織細胞。

5.根據權利要求2所述葡萄糖醛酸轉移酶UGT1A1的特異性熒光探針的應用，其特征在于：所述底物消除率或產物的生成率低于20％。

6.根據權利要求2所述葡萄糖醛酸轉移酶UGT1A1的特異性熒光探針的應用，其特征在于：該探針底物具有熒光，可采用熒光檢測器實現底物熒光變化的快速、靈敏檢測；葡萄糖醛酸化產物及底物熒光檢測條件分別為：激發波長460nm，最大發射波長為612nm。

7.根據權利要求2所述葡萄糖醛酸轉移酶UGT1A1的特異性熒光探針的應用，其特征在于：該探針底物還可用于UGT1A1抑制劑的快速篩選及抑制能力的定量評價。

8.根據權利要求2所述葡萄糖醛酸轉移酶UGT1A1的特異性熒光探針的應用，其特征在于：該探針底物也可作為載體及動物整體UGT1A1的探針底物，評估膽紅素代謝酶UGT1A1的個體及種屬差異。