[發明專利]荸薺皮提取荸薺乙素的方法

在審

• 申請號: 201410834868.1
• 申請日: 2014-12-29
• 公開（公告）號: CN104530069A
• 公開（公告）日: 2015-04-22
• 發明（設計）人: 羅楊合;李行任;伍淑婕;郭婷;徐健存
• 申請（專利權）人: 賀州學院
• 主分類號: C07D493/04
• 分類號: C07D493/04
• 代理公司: 廣州科粵專利商標代理有限公司 44001
• 代理人: 張新球

技術領域

本發明屬于天然有機化學領域，涉及一種荸薺乙素的提取分離方法，特別是涉及一種從荸薺皮中提取分離荸薺乙素的方法。

背景技術

荸薺(Eleocharis?tuberosa)，又稱馬蹄，屬莎草科多年生淺水草本植物荸薺的地下球莖，我國大部分地區都有栽培。其中，廣西荸薺產量占全國70％，賀州荸薺產量占廣西70％。據文獻報道，荸薺有抗菌、抗腫瘤、防治呼吸道疾病、利腸通便和利尿排淋等作用；臨床上可用于治療咽喉疼痛、痰熱咳嗽、熱病煩渴、小便不利、痢疾等癥。研究表明，荸薺的活性物質主要富集在果皮和果肉之間。在荸薺加工過程中，被丟棄的荸薺皮質量約占新鮮荸薺質量的25％，資源非常豐富。我們在荸薺皮活性成分提取分離研究中發現荸薺乙素，屬于二氫黃酮化合物。荸薺乙素為圣草酚的衍生物。該化合物具有抗氧化、抗炎、鎮痛等多種藥理活性以及調節心血管系統、保護神經系統、利尿、改善糖尿病等作用，在食品上常用作飲料、食品和酒類的抗氧化劑。荸薺乙素結構特別，屬于圣草酚的苯并吡喃衍生物。該類衍生物因具有顯著的抗HIV、抗腫瘤等活性而受到廣泛的關注。荸薺乙素存在于莎草科植物荸薺的果皮中。荸薺乙素是從荸薺皮中分離得到新化合物。

目前，未見從荸薺皮中提取分離荸薺乙素的文獻報道。經中國公開專利檢索，沒有發現與本專利申請相同的技術方案。

發明內容

本發明的目的在于：提出一種荸薺皮提取荸薺乙素的方法。

荸薺乙素化學結構式如下：

本發明的荸薺皮提取荸薺乙素的方法，其特征在于:應用常規提取法和MCI、聚酰胺、凝膠以及半制備型高效液相色譜技術從荸薺皮中提取分離荸薺乙素，其具體步驟如下：

(1)將新鮮的荸薺皮風干，粉碎，備用；以重量計，稱取荸薺皮粉末1份加入提取罐中，每次加入4-10份70％體積百分比的丙酮水溶液，在25℃下浸泡24h，浸泡3次；過濾，合并濾液，減壓濃縮至膏狀，獲得提取物；

(2)以重量計，取步驟(1)的提取物1份，分散在5份水中，制成懸濁液，每次加入5-10份乙酸乙酯萃取，萃取3次，合并萃取液，減壓濃縮至干,得萃取物；?

(3)以重量計，取步驟(2)的萃取物1份，加入甲醇至完全溶解，用2-4份聚酰胺拌樣，將甲醇揮發至干，裝柱，連接MCI柱進行中壓分離，以甲醇水溶液為流動相梯度洗脫，薄層色譜法檢測，收集合并流動相濃度為70-90％體積百分比的洗脫液，減壓濃縮至干,得粗品A；

(4)以重量計，取步驟(3)的粗品A?1份，加入甲醇至完全溶解，加入2-4份聚酰胺拌樣，將甲醇揮發干，轉入聚酰胺色譜柱進行分離，用體積比為5:1-2:1的氯仿-甲醇溶液洗脫，以石油醚:乙酸乙酯:甲酸＝50:49:1的混合液作展開劑，用薄層色譜法檢測，收集合并Rf為0.7的洗脫液，減壓濃縮至干,得粗品B；

(5)以重量計，取步驟(4)的粗品B?1份，溶于4-8份甲醇中，加入等甲醇體積的水制成懸濁液，用Sephadex?LH-20凝膠色譜柱純化，用甲醇洗脫，以石油醚:乙酸乙酯:甲酸＝50:49:1的混合液作展開劑，用薄層色譜法檢測，收集合并Rf為0.7的洗脫液，減壓濃縮，得粗品C；

(6)以重量計，取步驟(5)的粗品C?1份，溶于2-5份甲醇中，以280nm為紫外檢測波長，以62-68％體積百分比的甲醇水溶液為流動相，用4.6mm×25cm的Zorbax?SB-C18柱進行高效液相色譜分析，用9.4mm×25cm的ZorbaxSB-C18柱進行半制備純化，按21.38—32.51min的出峰時間，收集色譜峰中閥值不小于20mAU的洗脫液，減壓濃縮，即得產品。

所述步驟(3)中的所述的MCI柱規格為70×460mm，填充材料為MCI-gelCHP-20P，柱色譜條件為：柱壓為80Psi，流動相流速為50mL/min，檢測波長為245nm；所述的流動相為40-100％體積百分比的甲醇水溶液。

所述步驟(4)中所述的聚酰胺規格為200-300目；所用洗脫液為體積比為5:1-3:1的氯仿-甲醇溶液。?

所述步驟(6)中的所用色譜柱為Zorbax?SB-C18(9.4mm?25cm)柱；所述甲醇濃度范圍為62-68％體積百分比。

本發明與現有技術相比其有益效果是：設計科學合理，利用廢棄的荸薺皮為原料提取分離得到荸薺乙素，分離效果好，產品純度高，使荸薺皮變廢為寶，所選用的層析材料MCI、聚酰胺、凝膠均可反復使用，原料易得，資源豐富，生產成本低，具有較好的應用前景。