[發明專利]荸薺皮提取荸薺乙素的方法

在審

• 申請號: 201410834868.1
• 申請日: 2014-12-29
• 公開（公告）號: CN104530069A
• 公開（公告）日: 2015-04-22
• 發明（設計）人: 羅楊合;李行任;伍淑婕;郭婷;徐健存
• 申請（專利權）人: 賀州學院
• 主分類號: C07D493/04
• 分類號: C07D493/04
• 代理公司: 廣州科粵專利商標代理有限公司 44001
• 代理人: 張新球

1.一種荸薺皮提取荸薺乙素的方法，包括提取、萃取；其特征在于：其具體步驟如下：

(1)將新鮮的荸薺皮風干，粉碎，備用；以重量計，稱取荸薺皮粉末1份加入提取罐中，每次加入4-10份70％體積百分比的丙酮水溶液，在25℃下浸泡24h，浸泡3次；過濾，合并濾液，減壓濃縮至膏狀，獲得提取物；

(2)以重量計，取步驟(1)的提取物1份，分散在5份水中，制成懸濁液，每次加入5-10份乙酸乙酯萃取，萃取3次，合并萃取液，減壓濃縮至干,得萃取物；

(3)以重量計，取步驟(2)的萃取物1份，加入甲醇至完全溶解，用2-4份聚酰胺拌樣，將甲醇揮發至干，裝柱，連接MCI柱進行中壓分離，以甲醇水溶液為流動相梯度洗脫，薄層色譜法檢測，收集合并流動相濃度為70-90％體積百分比的洗脫液，減壓濃縮至干,得粗品A；

(4)以重量計，取步驟(3)的粗品A1份，加入甲醇至完全溶解，加入2-4份聚酰胺拌樣，將甲醇揮發干，轉入聚酰胺色譜柱進行分離，用體積比為5:1-2:1的氯仿-甲醇溶液洗脫，以石油醚:乙酸乙酯:甲酸＝50:49:1的混合液作展開劑，用薄層色譜法檢測，收集合并R_f為0.7的洗脫液，減壓濃縮至干,得粗品B；

(5)以重量計，取步驟(4)的粗品B1份，溶于4-8份甲醇中，加入等甲醇體積的水制成懸濁液，用Sephadex?LH-20凝膠色譜柱純化，用甲醇洗脫，以石油醚:乙酸乙酯:甲酸＝50:49:1的混合液作展開劑，用薄層色譜法檢測，收集合并R_f為0.7的洗脫液，減壓濃縮，得粗品C；

(6)以重量計，取步驟(5)的粗品C1份，溶于2-5份甲醇中，以280nm為紫外檢測波長，以62-68％體積百分比的甲醇水溶液為流動相，用4.6mm×25cm的Zorbax?SB-C18柱進行高效液相色譜分析，用9.4mm×25cm的Zorbax?SB-C18柱進行半制備純化，按21.38—32.51min的出峰時間，收集色譜峰中閥值不小于20mAU的洗脫液，減壓濃縮，即得產品。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟(3)中的所述的MCI柱規格為70×460mm，填充材料為MCI-gel?CHP-20P，柱色譜條件為：柱壓為80Psi，流動相流速為50mL/min，檢測波長為245nm；所述的流動相為40-100％體積百分比的甲醇水溶液。

3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟(4)中所述的聚酰胺規格為200-300目；所用洗脫液為體積比為5:1-3:1的氯仿-甲醇溶液。