[發(fā)明專利]SelK基因表達(dá)水平的熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒及方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410830420.2
• 申請(qǐng)日: 2014-12-26
• 公開（公告）號(hào): CN104561288A
• 公開（公告）日: 2015-04-29
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張仁利;李瑞敏
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 深圳市疾病預(yù)防控制中心
• 主分類號(hào): C12Q1/68
• 分類號(hào): C12Q1/68
• 代理公司: 深圳中一專利商標(biāo)事務(wù)所 44237
• 代理人: 張全文

1.一種SelK基因表達(dá)水平的熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒，其特征在于，包括特異性引物和熒光探針；其中，

所述特異性引物包括具有序列表SEQ.ID.No.1堿基序列的上游引物F和具有序列表SEQ.ID.No.2堿基序列的下游引物R；

所述熒光探針具有序列表SEQ.ID.No.3堿基序列，且5’端標(biāo)記有可淬滅的報(bào)告基團(tuán)，3’標(biāo)記有BHQ熒光基團(tuán)。

2.如權(quán)利要求1所述的SelK基因表達(dá)水平的熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒，其特征在于，所述可淬滅的報(bào)告基團(tuán)為FAM、HEX、TAMRA、ROX中的一種。

3.如權(quán)利要求1或2所述的SelK基因表達(dá)水平的熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包括有陽(yáng)性對(duì)照；所述陽(yáng)性對(duì)照為人cDNA模板。

4.如權(quán)利要求1或2所述的SelK基因表達(dá)水平的熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包括有陰性對(duì)照；所述陰性對(duì)照為RNase?free?dH₂O。

5.一種SelK基因表達(dá)水平的熒光定量PCR檢測(cè)方法，其特征在于，包括如下步驟：

提取待測(cè)樣本RNA；

將所述待測(cè)樣本RNA進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄，得到反轉(zhuǎn)錄DNA；

以所述反轉(zhuǎn)錄DNA為模板，進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光PCR；

檢測(cè)PCR過程中的熒光信號(hào)；

其中，所述實(shí)時(shí)熒光PCR過程中采用的引物包括具有序列表SEQ.ID.No.1堿基序列的上游引物F和具有序列表SEQ.ID.No.2堿基序列的下游引物R；

所述實(shí)時(shí)熒光PCR過程中采用的熒光探針具有序列表SEQ.ID.No.3堿基序列，且5’端標(biāo)記有可淬滅的報(bào)告基團(tuán)，3’標(biāo)記有BHQ熒光基團(tuán)。

6.如權(quán)利要求5所述的SelK基因表達(dá)水平的熒光定量PCR檢測(cè)方法，其特征在于，所述可淬滅的報(bào)告基團(tuán)為FAM。