[發明專利]一種提高南方生態型棗樹苗木耐鹽性的組織培養快繁方法

無效

• 申請號: 201410828056.6
• 申請日: 2014-12-25
• 公開（公告）號: CN104472366A
• 公開（公告）日: 2015-04-01
• 發明（設計）人: 徐呈祥;馬艷萍
• 申請（專利權）人: 肇慶學院
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 廣州三環專利代理有限公司 44202
• 代理人: 劉宇峰

技術領域

本發明屬于棗屬(Ziziphus?jujuba?Mill.)植物的苗木無性繁殖技術領域，具體涉及一種提高南方生態型棗樹苗木耐鹽性的組織培養快繁方法。

背景技術

棗原產中國，是中國重要的果樹種類，目前的品種已達700種之多。自從利用微莖段組織培養快繁“鳴山大棗”獲得成功以來，迄今已有“金絲小棗”、“臨澤小棗”、“灰棗”等10多個棗品種建立起了組織培養快繁體系。組織培養棗苗可穩定遺傳親本的優良性狀，育苗周期短、效率高，還可結合脫除棗瘋病病原菌等，因而，有力地促進了棗樹優良品種的繁殖和栽培。同時，組織培養作為植物生物技術的基礎手段和載體，還可能是培育棗優良突變體的一種有效途徑。

棗在中國有北方生態型和南方生態型兩大類群，以北方生態型的品種最多，南方生態型的品種明顯較少，但卻是江蘇、浙江、湖南、廣東、廣西、貴州棗產區的主栽品種。大量研究和實踐表明，棗北方生態型抗干旱、耐鹽堿，加之育苗中普遍以酸棗(Z.spinosa(Bunge)Hu)為砧木，因此，棗苗抗逆性強、適應性廣，而南方生態型則不然，棗品種自身抗干旱、耐鹽堿能力弱，也沒有酸棗那樣優良的砧木可資利用，繁育的棗苗主要為自根苗(扦插苗或根蘗苗)。

鹽(包括通常所說的“堿”——堿性鹽)脅迫是中國棗產區的主要逆境之一，對棗樹的生長發育和棗果產量與品質有重大影響，無論北方和南方都存在，但在南方其對棗樹的脅迫與危害實際上更重，主要是因為南方生態型棗品種耐鹽性明顯較弱，而南方建立棗園的立地類型往往是鹽漬化重度發育的濱海灘涂、石灰巖山地或故河道形成的沙礫地。棗樹苗木是棗樹科研和生產的物質基礎，也是對鹽脅迫最敏感的時期。因此，提高南方生態型棗樹苗木的耐鹽性有重大現實意義和應用前景。

發明內容

針對中國南方棗園建園的立地類型、生態特點與實際需要，本發明的目的在于提供一種一種提高南方生態型棗樹的苗木耐鹽性的組織培養快繁方法，該方法能快捷、高效、低成本地培育出具有顯著耐鹽性、適用性廣、適應性強的南方生態型棗樹苗木。

本發明所述的提高南方生態型棗樹品種苗木耐鹽性的組織培養快繁方法，包括以下步驟：

A.水培棗頭枝：選擇生長健壯、無病蟲害的南方生態型棗樹品種的植株，剪取休眠期的1年生棗頭枝，在溫室中水培至新枝長度達15～20cm；

B.啟動培養，獲得無菌外植體：將步驟A培養獲得的新生棗頭枝，切割成帶1～2個腋芽的莖段，水浸15分鐘，流水沖洗2小時，依次用70％酒精、0.1％HgCl₂消毒5分鐘后用無菌水沖洗5次，接入啟動培養基上培養60天；

C.鹽脅迫下初代和繼代培養：將步驟B獲得的無菌外植體轉接至同樣成分的培養基上進行初代培養，30天后轉接至繼代培養基上進行增殖擴繁，連續增殖擴繁3代，每代培養30天，然后轉接至生根培養基進行生根培養；

D.鹽脅迫下生根培養：將步驟C獲得的經鹽脅迫誘導的第4代繼代棗苗轉接至生根培養基上進行生根培養30～35天，當組培苗株高達6～7cm、生出10～12片葉、生根率達95％以上，具有2～3條長度為1～1.5cm左右的白色根時，移入溫室進行煉苗；

E.煉育移栽：將步驟D獲得的生根組培苗轉移到溫室中，封閉瓶口煉育4～5天，再打開瓶口煉苗8～10天，至葉色轉為濃綠色時，取出組培苗，用30℃溫水洗去棗苗根部附帶的培養基，移栽至溫室苗圃地中；移栽后每株澆灌15ml?1/2MS營養液，成活率在90％以上；培育30天后，新根大量形成，移栽到大田苗圃中培育。

根據本發明所述的提高南方生態型棗樹品種苗木耐鹽性的組織培養快繁方法的進一步特征，所述步驟B中，所述啟動培養基包括：MS培養基，1.0mg/L?6-芐基腺嘌呤(6-BA)，0.1mg/Lα-萘乙酸(NAA)。

根據本發明所述的提高南方生態型棗樹品種苗木耐鹽性的組織培養快繁方法的進一步特征，所述步驟C中，所述繼代培養基包括：MS培養基，2.0mg/L?6-BA，0.5mg/L?NAA，75mmol/L?NaCl。

根據本發明所述的提高南方生態型棗樹品種苗木耐鹽性的組織培養快繁方法的進一步特征，所述步驟D中，所述生根培養基包括：1/2MS培養基，0.01mg/L6-BA，2.0mg/L?3-吲哚丁酸(IBA)，0.5mg/L?IAA，75mmol/L?NaCl。