[發明專利]一種提高南方生態型棗樹苗木耐鹽性的組織培養快繁方法

無效

• 申請號: 201410828056.6
• 申請日: 2014-12-25
• 公開（公告）號: CN104472366A
• 公開（公告）日: 2015-04-01
• 發明（設計）人: 徐呈祥;馬艷萍
• 申請（專利權）人: 肇慶學院
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 廣州三環專利代理有限公司 44202
• 代理人: 劉宇峰

1.一種提高南方生態型棗樹苗木耐鹽性的組織培養快繁方法，其特征在于，所述方法包括以下步驟：

A.水培棗頭枝：選擇生長健壯、無病蟲害的南方生態型棗樹品種的植株，剪取休眠期的1年生棗頭枝，在溫室中水培至新枝長度達15～20cm；

B.啟動培養，獲得無菌外植體：將步驟A培養獲得的新生棗頭枝，切割成帶1～2個腋芽的莖段，水浸15分鐘，流水沖洗2小時，依次用70％酒精、0.1％HgCl₂消毒5分鐘后用無菌水沖洗5次，接入啟動培養基上培養60天；

C.鹽脅迫下初代和繼代培養：將步驟B獲得的無菌外植體轉接至同樣成分的培養基上進行初代培養，30天后轉接至繼代培養基上進行增殖擴繁，連續增殖擴繁3代，每代培養30天，然后轉接至生根培養基進行生根培養；

D.鹽脅迫下生根培養：將步驟C獲得的經鹽脅迫誘導的第4代繼代棗苗轉接至生根培養基上進行生根培養30～35天，當組培苗株高達6～7cm、生出10～12片葉、生根率達95％以上，具有2～3條長度為1～1.5cm左右的白色根時，移入溫室進行煉苗；

E.煉育移栽：將步驟D獲得的生根組培苗轉移到溫室中，封閉瓶口煉育4～5天，再打開瓶口煉苗8～10天，至葉色轉為濃綠色時，取出組培苗，用30℃溫水洗去棗苗根部附帶的培養基，移栽至溫室苗圃地中；移栽后每株澆灌15ml1/2MS營養液，成活率在90％以上；培育30天后，新根大量形成，移栽到大田苗圃中培育。

2.根據權利要求1所述的提高南方生態型棗樹品種苗木耐鹽性的組織培養快繁方法，其特征在于，所述步驟B中，所述啟動培養基包括：MS培養基，1.0mg/L6-芐基腺嘌呤(6-BA)，0.1mg/Lα-萘乙酸(NAA)。

3.根據權利要求1所述的一種提高南方生態型棗樹品種苗木耐鹽性的組織培養快繁方法，其特征在于，所述步驟C中，所述繼代培養基包括：MS培養基，2.0mg/L6-BA，0.5mg/L?NAA，75mmol/L?NaCl。

4.根據權利要求1所述的一種提高南方生態型棗樹品種苗木耐鹽性的組織培養快繁方法，其特征在于，所述步驟D中，所述生根培養基包括：1/2MS培養基，0.01mg/L6-BA，2.0mg/L3-吲哚丁酸(IBA)，0.5mg/L?IAA，75mmol/L?NaCl。

5.根據權利要求1所述的一種提高南方生態型棗樹苗木耐鹽性的組織培養快繁方法，其特征在于：所述步驟E中，組培苗煉育的溫室的晝溫為26±2℃，夜溫為22±2℃，光周期為14小時/d，相對濕度為80±2％。

6.根據權利要求1所述的一種提高南方生態型棗樹苗木耐鹽性的組織培養快繁方法，其特征在于：所述步驟E中，移栽基質為疏松、透氣、排水良好的蛭石和草炭土等比例(V/V)混合的基質，移栽前基質用0.1％甲醛進行消毒。