[發明專利]食用油過氧化值酶生物傳感器的制備方法

在審

• 申請號: 201410822047.6
• 申請日: 2014-12-25
• 公開（公告）號: CN104535629A
• 公開（公告）日: 2015-04-22
• 發明（設計）人: 廖姍;李中;梁明龍;伍壽勝
• 申請（專利權）人: 桂林中輝科技發展有限公司
• 主分類號: G01N27/26
• 分類號: G01N27/26;G01N27/327
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.食用油過氧化值酶生物傳感器的制備方法，其步驟如下：

步驟一，在酶生物傳感器檢測電極的工作電極上采用網印刷法印刷一層殼聚糖膜，晾干后在電極的工作電極上印刷辣根過氧化物酶、緩沖溶液、膨脹劑、酶保護劑等的混合漿液，50℃干燥；

步驟二，將上述烘干的電極板再次印刷含有酶底物、反應促進劑、表面活性劑、膨脹劑等的混合漿液，50℃干燥，粘貼上隔離片，然后蓋上蓋片，在10-25℃環境下保存酶生物傳感器檢測電極；

步驟三，將待測的食用油樣品與萃取液等體積混合形成待測液，并將生成的待測液滴加到酶生物傳感檢測電極加樣孔中；

步驟四，檢測工作電極與對電極之間的電流，若電流在電流檢測儀的檢測范圍之內，則可通過電流檢測儀自動處理轉化，并與單片機中儲存的標準曲線進行比對，轉化為過氧化值的濃度，直接由顯示器顯示出檢測結果，若電流低于或高于電流檢測儀的檢測范圍，則顯示器顯示過氧化值的濃度低于檢測范圍的最小值或高于檢測范圍的最大值。

2.根據權利要求1所述的食用油過氧化值酶生物傳感器的制備方法，所述步驟一使用絲網印刷機，使酶膜的厚度達到1～4μm。

3.根據權利要求1所述的食用油過氧化值酶生物傳感器的制備方法，所述步驟一中選擇辣根過氧化物酶的濃度為0.5～6.5mg/mL。

4.根據權利要求1所述的食用油過氧化值酶生物傳感器的制備方法，所述步驟二中酶底物是聯苯胺的衍生物，分子式為：[R₁C₆H_mNR₂]₂；其中m＝2-4，R₁＝H，CH₃，C₆H₅，CH₃0，NH₂；R₂＝H，CH₃。

5.根據權利要求1所述的食用油過氧化值酶生物傳感器的制備方法，所述步驟二中反應促進劑是苯并噻唑的衍生物，分子結構為：R₃C₆H_mN：C(R₄)S；其中m＝3-4；R₃＝H，CH₃，C₂H₅；R₄＝H，OH，SH，NH₂。

6.根據權利要求1所述的食用油過氧化值酶生物傳感器的制備方法，所述步驟二中表面活性劑是十二烷基硫酸鈉、OP-10、吐溫20。

7.根據權利要求1所述的食用油過氧化值酶生物傳感器的制備方法，所述步驟三中萃取試劑為選自30～70％(w/w)的甲醇水溶液、乙醇水溶液、異丙醇水溶液和葵醇水溶液中的一種或兩種以上的組合。

8.權利要求1所述的食用油過氧化值酶生物傳感器的制備方法，所述的檢測范圍為1meq/kg-60meq/kg。