[發明專利]一種高危型人乳頭瘤病毒的檢測和分型試劑盒及其應用

有效

• 申請號: 201410810426.3
• 申請日: 2014-12-19
• 公開（公告）號: CN105755169B
• 公開（公告）日: 2020-03-10
• 發明（設計）人: 白艷軍;姚見兒;胡可
• 申請（專利權）人: 上海透景生命科技股份有限公司
• 主分類號: C12Q1/70
• 分類號: C12Q1/70;C12Q1/686;C12R1/93
• 代理公司: 上海專利商標事務所有限公司 31100
• 代理人: 陳靜

1.一種高危型人乳頭瘤病毒的檢測和分型試劑盒，其特征在于，所述的試劑盒中含有擴增高危型人乳頭瘤病毒核酸的引物和對應的檢測探針，所述的引物和探針序列如下：

特異性擴增人乳頭瘤病毒16型的上游引物SEQ ID NO:15，下游引物SEQ ID NO:16；

特異性擴增人乳頭瘤病毒18型的上游引物SEQ ID NO:17，下游引物SEQ ID NO:18；

特異性擴增人乳頭瘤病毒31型的上游引物SEQ ID NO:19，下游引物SEQ ID NO:20；

特異性擴增人乳頭瘤病毒33型的上游引物SEQ ID NO:21，下游引物SEQ ID NO:22；

特異性擴增人乳頭瘤病毒35型的上游引物SEQ ID NO:23，下游引物SEQ ID NO:24；

特異性擴增人乳頭瘤病毒39型的上游引物SEQ ID NO:25，下游引物SEQ ID NO:26；

特異性擴增人乳頭瘤病毒45型的上游引物SEQ ID NO:27，下游引物SEQ ID NO:28；

特異性擴增人乳頭瘤病毒51型的上游引物SEQ ID NO:29，下游引物SEQ ID NO:30；

特異性擴增人乳頭瘤病毒52型的上游引物SEQ ID NO:31，下游引物SEQ ID NO:22；

特異性擴增人乳頭瘤病毒56型的上游引物SEQ ID NO:32，下游引物SEQ ID NO:33；

特異性擴增人乳頭瘤病毒58型的上游引物SEQ ID NO:34，下游引物SEQ ID NO:22；

特異性擴增人乳頭瘤病毒59型的上游引物SEQ ID NO:35，下游引物SEQ ID NO:36；

特異性擴增人乳頭瘤病毒66型的上游引物SEQ ID NO:37，下游引物SEQ ID NO:38；

特異性擴增人乳頭瘤病毒68型的上游引物SEQ ID NO:39，下游引物SEQ ID NO:26；

特異性針對人乳頭瘤病毒16型的探針SEQ ID NO:42；

特異性針對人乳頭瘤病毒18型的探針SEQ ID NO:43；

特異性針對人乳頭瘤病毒33、35、39、45、52、56、58、66、68型的探針SEQ ID NO:44；

特異性針對人乳頭瘤病毒31、51、59型的探針SEQ ID NO:45；

所述的引物和探針以HPV的L1區和L2區中間重疊部分的基因序列作為設計的主要區域。

2.如權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述的試劑盒中還包括：特異性擴增人基因組β-Globin基因的引物和特異性針對β-Globin的探針。

3.如權利要求2所述的試劑盒，其特征在于，所述的特異性擴增β-Globin的引物是SEQID NO:40和SEQ ID NO:41的引物；所述的探針是SEQ ID NO:46的探針。

4.如權利要求1-3任一所述的試劑盒，其特征在于，所述的試劑盒以VIC作為特異性針對人乳頭瘤病毒16型的探針的熒光基團，以MGB作為對應的猝滅基團；以ROX作為特異性針對人乳頭瘤病毒18型的探針的熒光基團，以BHQ2作為對應的猝滅基團；以FAM作為特異性針對人乳頭瘤病毒33、35、39、45、52、56、58、66、68型的探針和特異性針對人乳頭瘤病毒31、51、59型探針的熒光基團，以MGB作為對應的猝滅基團；以Cy5作為特異性針對β-Globin的探針的熒光基團，以BHQ3作為對應的猝滅基團。

5.如權利要求1-3任一所述的試劑盒，其特征在于，所述的試劑盒中還包括：PCR反應液，質控品，陰性對照和/或使用說明書。

6.如權利要求5所述的試劑盒，其特征在于，所述的試劑盒中，PCR反應液主要由PCR預混液、引物以及探針組成。

7.如權利要求6所述的試劑盒，其特征在于，所述的PCR預混液中含有實時熒光PCR反應所需的試劑，包括MgCl₂、熱啟動Taq酶、dNTP和PCR反應緩沖液。