[發明專利]一種基于活性篩選的牡丹皮藥材及制劑檢測方法

有效

• 申請號: 201410809235.5
• 申請日: 2014-12-23
• 公開（公告）號: CN104535677A
• 公開（公告）日: 2015-04-22
• 發明（設計）人: 封亮;賈曉斌;張明華;顧俊菲;汪春飛
• 申請（專利權）人: 江蘇省中醫藥研究院
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種基于活性篩選的牡丹皮藥材及制劑檢測方法，其特征在于檢測指標成分是通過腎系膜細胞、血小板細胞膜固相色譜技術和糖基化產物反應體系篩選，結合聚類分析和主成分分析確定的，采用HPLC法，確定氧化芍藥苷、芍藥苷、三沒食子酰葡萄糖、五沒食子酰葡萄糖、苯甲酰芍藥苷和丹皮酚為檢測指標，所述6個檢測指標的含量HPLC法同步測定方法如下：

①液相色譜條件：色譜柱用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；流動相：乙腈(A)-0.1％甲酸水溶液(B)，梯度洗脫條件：0-20min，5％-10％A；20-30min，10％-10％A；30-80min，10％-18％A；80-120min，18％-50％A；檢測波長254nm，流速0.8mL/min，柱溫25℃；

②對照品溶液的制備：分別精密稱取恒重的對照品氧化芍藥苷、芍藥苷、三沒食子酰葡萄糖、五沒食子酰葡萄糖、苯甲酰芍藥苷和丹皮酚適量，加60％甲醇溶液分別制成每1mL含芍藥苷72.15μg、氧化芍藥苷59.56μg、三沒食子酰葡萄糖89.35μg、五沒食子酰葡萄糖109.76μg、苯甲酰芍藥苷137.67μg和丹皮酚86.23μg，用甲醇定容至刻度，搖勻；另各取1mL配成混合對照品溶液；

③供試品溶液的制備

牡丹皮藥材供試品溶液的制備：精密稱定牡丹皮藥材粉末約0.5g，置50mL容量瓶中，加75％乙醇(v/v)20mL，超聲或回流處理30min兩次，取出，放冷，合并濾液，加75％乙醇定容至50mL刻度，搖勻，經0.45um的微孔濾膜濾過，即得；

牡丹皮提取物供試品溶液的制備：精密稱定牡丹皮提取物0.1g，置50mL容量瓶中，加75％乙醇(v/v)20mL，超聲或回流處理30min兩次，取出，放冷，合并濾液，加75％乙醇定容至50mL刻度，搖勻，經0.45um的微孔濾膜濾過，即得；

牡丹皮制劑供試品溶液的制備：精密稱定牡丹皮制劑粉末約0.25g，置50mL容量瓶中，加75％乙醇(v/v)20mL，超聲或回流處理30min兩次，取出，放冷，合并濾液，加75％乙醇定容至50mL刻度，搖勻，經0.45um的微孔濾膜濾過，即得；

④測定法：高效液相色譜儀分析對照品和供試品溶液，進樣體積10μl。

2.根據權利要求2中所述的一種基于活性篩選的牡丹皮藥材及制劑檢測方法，其特征在于這6個成分具有對抗晚期糖基化產物AGEs誘導腎系膜細胞和血管內皮細胞的損傷作用，即提高腎系膜細胞和血管內皮細胞的SOD活性、降低MDA含量，以及降低系膜細胞FN蛋白表達和內皮細胞凋亡的影響。

3.根據權利要求1中所述的一種基于活性篩選的牡丹皮藥材及制劑檢測方法，其特征在于檢測指標成分是組成結構比范圍為：(1.3～1.5):(10.4～13.9):0.5:(2.7～3.5):(1.0～1.2):(14.9～16.1)。

4.根據權利要求1所述的一種基于活性篩選的牡丹皮藥材及制劑檢測方法，其特征在于：所述的含量同步測定方法中，牡丹皮藥材、制劑中氧化芍藥苷、芍藥苷、三沒食子酰葡萄糖、五沒食子酰葡萄糖、苯甲酰芍藥苷和丹皮酚與領近小峰的分離度應大于1.5。

5.根據權利要求1所述的一種基于活性篩選的牡丹皮藥材及制劑檢測方法，其特征在于用于牡丹皮藥材、提取物、制劑的質量檢測。

6.根據權利要求6所述的一種基于活性篩選的牡丹皮藥材及制劑檢測方法，其特征在于用于含牡丹皮的制劑包括顆粒劑、膠囊劑、酊劑、口服液、丸劑、膏劑、糖漿、片劑、外用劑型的制劑質量檢測。