[發(fā)明專利]一種低分子肝素的純化方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410807934.6
• 申請日: 2015-08-03
• 公開（公告）號: CN104497172A
• 公開（公告）日: 2015-07-29
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 劉乃山;宋立明;劉翠珍
• 申請（專利權(quán)）人: 青島康原藥業(yè)有限公司
• 主分類號: C08B37/10
• 分類號: C08B37/10
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種低分子肝素的純化方法，其特征在于：將制得的低分子肝素通過親和色譜的方法得到高純度的低分子肝素產(chǎn)品。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備高純度低分子肝素的方法，其特征在于，該方法包括如下步驟：

制備親和樹脂：將殼聚糖在水中進(jìn)行懸浮溶脹24h，用NaOH溶液調(diào)節(jié)pH8.0-9.0，加入戊二醛溶液反應(yīng)2h，抽濾，再用水洗凈戊二醛至無味，在低溫條件下加入凝血酶，反應(yīng)5h，反應(yīng)終止后加入NaCl溶液洗去未偶聯(lián)的配基，并用水洗至pH為中性，用親和柱平衡液浸泡15min后，脫氣，再裝柱；

將低分子肝素用pH為7.5?Tris-HCl緩沖液溶解;

將溶解液上柱進(jìn)行吸附;

加入Tris-HCl緩沖液洗滌;

用氯化鈉溶液洗脫，收集洗脫液;

加入乙醇進(jìn)行低溫沉淀，得到沉淀物;

真空干燥得到高純低分子肝素產(chǎn)品。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于：步驟（1）中，戊二醛濃度20%-30%；加入凝血酶的量為殼聚糖的0.05%-2%?。

4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于：步驟（3）中，溶解用的Tris-HCl緩沖液體積約為低分子肝素的1%-3%。

5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于：所述吸附柱為親和層析柱。

6.如權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于：所述親和層析柱包括：CM-Sephadex?A-25,CM-Sephadex?A-50,CM-Sephadex?C-25,CM-Sephadex?C-50，SP-Sepharose?2B,SP-Sepharose?4B,SP-Sepharose?6B，SP-Sepharose?CL-2B,SP-Sepharose?CL-4B,SP-Sepharose?CL-6B。