[發明專利]除草劑耐受性蛋白質、其編碼基因及用途

有效

• 申請號: 201410806871.2
• 申請日: 2014-12-22
• 公開（公告）號: CN104611304A
• 公開（公告）日: 2015-05-13
• 發明（設計）人: 何健;姚利;賈興軍;謝香庭;吳業春;陶青;丁德榮
• 申請（專利權）人: 北京大北農科技集團股份有限公司生物技術中心;南京農業大學
• 主分類號: C12N9/02
• 分類號: C12N9/02;C12N15/53;C12N9/06;C12N9/80;C12N15/55;C12N15/84;C12N5/10;A01H5/00;A01G7/06;C12N1/20;C12R1/01
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技術領域

本發明涉及一種除草劑耐受性蛋白質、其編碼基因及用途，特別是涉及一種對除草劑麥草畏具有耐受性的蛋白質、其編碼基因及用途。

背景技術

雜草可以迅速耗盡土壤中作物和其它目的植物所需要的有價值的養分。盡管目前可以得到耐受除草劑草甘膦、草丁膦、2,4-D和其它除草劑處理的轉基因植物，但是還存在空白區域，如所控制的雜草范圍、開發額外的除草劑耐受性作物等。此外，耐受上述除草劑的雜草的出現(盡管通常是局部的和可變的)造成了對額外或備選的雜草控制措施的需要。

已經證明耐受除草劑性狀在商業上是有價值的，因此需要增加耐受其它除草劑的植物和管理難以控制的雜草種類的選項，以避免過度依賴任何單一除草劑，尤其需要針對環境友好的并且在控制雜草方面高度有效的除草劑而開發除草劑耐受性。麥草畏是有效且環境友好的除草劑之一，其已經被農民使用40多年了，麥草畏可用于控制玉米、高粱、小米、牧草、干草、牧場、甘蔗、蘆筍、草皮和草籽作物中一年生和多年生闊葉雜草和幾種窄葉雜草；與此同時，麥草畏可以傷害許多商業作物和雙子葉植物，如大豆、棉花、豌豆、馬鈴薯、向日葵和油菜，上述作物/植物對于低水平的麥草畏都是特別敏感的。盡管如此，麥草畏在控制雜草生長中仍然是有效的，并且是重要的。

已報道從嗜麥芽假單胞菌(Pseudomonas?maltophilia)分離了編碼麥草畏單加氧酶(DMO)的基因，其為鐵氧還蛋白依賴型并賦予對麥草畏的耐受性。DMO參與將除草劑麥草畏(3,6-二氯-鄰-茴香酸)轉化為無毒的3,6-二氯水楊酸(DCSA)，表達DMO基因的植物具有對麥草畏的耐受性。

由于目前發現的麥草畏耐受型基因均及其相似，所以需要更多新型的麥草畏耐受型基因以避免過度依賴一種麥草畏耐受型基因，使麥草畏-麥草畏耐受型作物在商業上具有更廣闊的應用空間。

發明內容

本發明的目的是提供一種除草劑耐受性蛋白質、其編碼基因及用途，本發明旨在提供一種新的DMT66基因，所述DMT66蛋白在植物中對麥草畏除草劑具有較高的耐受性。

為實現上述目的，本發明提供了一種蛋白質，具有SEQ?ID?NO:2所示的氨基酸序列組成的蛋白質。

為實現上述目的，本發明提供了一種基因，包括：

(a)編碼所述蛋白質的核苷酸序列；或

(b)在嚴格條件下與(a)限定的核苷酸序列互補的核苷酸序列；或

(c)具有SEQ?ID?NO:3所示的核苷酸序列；或

(d)具有SEQ?ID?NO:14所示的核苷酸序列。

所述嚴格條件可為在6×SSC(檸檬酸鈉)、0.5％SDS(十二烷基硫酸鈉)溶液中，在65℃下雜交，然后用2×SSC、0.1％SDS和1×SSC、0.1％SDS各洗膜1次。

為實現上述目的，本發明還提供了一種組合蛋白，包括至少由第一核苷酸序列和第二核苷酸序列編碼，所述第一核苷酸序列編碼所述蛋白質。

進一步地，所述第二核苷酸序列編碼甲基四氫葉酸還原酶、甲酰四氫葉酸脫甲酰酶和/或次甲基環化酶。

更進一步地，所述甲基四氫葉酸還原酶具有SEQ?ID?NO:4所示的氨基酸序列，所述甲酰四氫葉酸脫甲酰酶具有SEQ?ID?NO:6所示的氨基酸序列，所述次甲基環化酶具有SEQ?ID?NO:8所示的氨基酸序列。

優選地，所述第二核苷酸序列具有SEQ?ID?NO:5、SEQ?ID?NO:7和/或SEQ?ID?NO:9所示的核苷酸序列。

具體地，編碼所述組合蛋白的核苷酸序列具有SEQ?ID?NO:26所示的核苷酸序列。

更具體地，編碼所述組合蛋白的核苷酸序列具有SEQ?ID?NO:1所示的核苷酸序列。

為實現上述目的，本發明還提供了一種表達盒，包含在有效連接的調控序列調控下的所述基因或編碼所述組合蛋白的核苷酸序列。

進一步地，所述調控序列為葉綠體轉運肽，所述葉綠體轉運肽與所述基因有效連接。

優選地，所述葉綠體轉運肽的核苷酸序列具有SEQ?ID?NO:16所示的核苷酸序列。

為實現上述目的，本發明還提供了一種包含所述基因、編碼所述組合蛋白的核苷酸序列或所述表達盒的重組載體。