[發明專利]除草劑耐受性蛋白質、其編碼基因及用途

有效

• 申請號: 201410806871.2
• 申請日: 2014-12-22
• 公開（公告）號: CN104611304A
• 公開（公告）日: 2015-05-13
• 發明（設計）人: 何健;姚利;賈興軍;謝香庭;吳業春;陶青;丁德榮
• 申請（專利權）人: 北京大北農科技集團股份有限公司生物技術中心;南京農業大學
• 主分類號: C12N9/02
• 分類號: C12N9/02;C12N15/53;C12N9/06;C12N9/80;C12N15/55;C12N15/84;C12N5/10;A01H5/00;A01G7/06;C12N1/20;C12R1/01
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1.一種蛋白質，其特征在于，具有SEQ?ID?NO:2所示的氨基酸序列組成的蛋白質。

2.一種基因，其特征在于，包括：

(a)編碼權利要求1所述蛋白質的核苷酸序列；或

(b)在嚴格條件下與(a)限定的核苷酸序列互補的核苷酸序列；或

(c)具有SEQ?ID?NO:3所示的核苷酸序列；或

(d)具有SEQ?ID?NO:14所示的核苷酸序列。

3.一種組合蛋白，其特征在于，包括至少由第一核苷酸序列和第二核苷酸序列編碼，所述第一核苷酸序列編碼權利要求1所述蛋白質。

4.根據權利要求3所述組合蛋白，其特征在于，所述第二核苷酸序列編碼甲基四氫葉酸還原酶、甲酰四氫葉酸脫甲酰酶和/或次甲基環化酶。

5.根據權利要求4所述組合蛋白，其特征在于，所述甲基四氫葉酸還原酶具有SEQ?ID?NO:4所示的氨基酸序列，所述甲酰四氫葉酸脫甲酰酶具有SEQ?ID?NO:6所示的氨基酸序列，所述次甲基環化酶具有SEQ?ID?NO:8所示的氨基酸序列。

6.根據權利要求5所述組合蛋白，其特征在于，所述第二核苷酸序列具有SEQ?ID?NO:5、SEQ?ID?NO:7和/或SEQ?ID?NO:9所示的核苷酸序列。

7.根據權利要求6所述組合蛋白，其特征在于，編碼所述組合蛋白的核苷酸序列具有SEQ?ID?NO:26所示的核苷酸序列。

8.根據權利要求7所述組合蛋白，其特征在于，編碼所述組合蛋白的核苷酸序列具有SEQ?ID?NO:1所示的核苷酸序列。

9.一種表達盒，其特征在于，包含在有效連接的調控序列調控下的權利要求2所述基因或編碼權利要求3-8任一項所述組合蛋白的核苷酸序列。

10.根據權利要求9所述表達盒，其特征在于，所述調控序列為葉綠體轉運肽，所述葉綠體轉運肽與權利要求2所述基因有效連接。

11.根據權利要求10所述表達盒，其特征在于，所述葉綠體轉運肽的核苷酸序列具有SEQ?ID?NO:16所示的核苷酸序列。

12.一種包含權利要求2所述基因、編碼權利要求3-8任一項所述組合蛋白的核苷酸序列或權利要求9-11任一項所述表達盒的重組載體。

13.一種增加耐受除草劑范圍的方法，其特征在于，包括：將權利要求1所述蛋白質、權利要求3-8任一項所述組合蛋白或權利要求9-11任一項所述表達盒編碼的蛋白質在植物中與至少一種不同于權利要求1所述蛋白質、權利要求3-8任一項所述組合蛋白或權利要求9-11任一項編碼的蛋白質的第二種蛋白質一起表達。

14.根據權利要求13所述增加除草劑耐受性的方法，其特征在于，所述第二種蛋白質為草甘膦耐受性蛋白質、草銨膦耐受性蛋白質、α酮戊二酸雙加氧酶、4-羥苯基丙酮酸雙加氧酶、乙酰乳酸合酶、細胞色素類蛋白質或原卟啉原氧化酶。

15.一種選擇轉化的植物細胞的方法，其特征在于，包括：用權利要求2所述基因、編碼權利要求3-8任一項所述組合蛋白的核苷酸序列或權利要求9-11任一項所述表達盒轉化多個植物細胞，并在允許表達所述基因、編碼所述組合蛋白的核苷酸序列或所述表達盒的轉化細胞生長，而殺死未轉化細胞或抑制未轉化細胞生長的除草劑濃度下培養所述細胞，所述除草劑為麥草畏。

16.一種控制雜草的方法，其特征在于，包括：對種植植物的大田施用有效劑量的麥草畏除草劑，所述植物包含權利要求2所述基因、編碼權利要求3-8任一項所述組合蛋白的核苷酸序列、權利要求9-11任一項所述表達盒或權利要求12所述重組載體。

17.一種保護植物免受由除草劑引起的損傷的方法，其特征在于，包括：將權利要求2所述基因、編碼權利要求3-8任一項所述組合蛋白的核苷酸序列、權利要求9-11任一項所述表達盒或權利要求12所述重組載體導入植物，使導入后的植物產生足夠保護其免受麥草畏損害量的除草劑耐受性蛋白質。

18.一種賦予植物麥草畏除草劑耐受性的方法，其特征在于，包括：將權利要求2所述基因、編碼權利要求3-8任一項所述組合蛋白的核苷酸序列、權利要求9-11任一項所述表達盒或權利要求12所述重組載體導入植物。