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[發明專利]5-氟尿嘧啶衍生物、5-氟尿嘧啶免疫原及其抗體與5-氟尿嘧啶檢測試劑盒在審

專利信息
申請號: 201410799522.2 申請日: 2014-12-20
公開(公告)號: CN104478813A 公開(公告)日: 2015-04-01
發明(設計)人: 虞留明;鄧擁軍;陳麗峰;陸麗華;余琳 申請(專利權)人: 蘇州博源醫療科技有限公司
主分類號: C07D239/553 分類號: C07D239/553;C07K14/765;C07K14/795;C07K14/47;C07K1/107;C07K16/44
代理公司: 暫無信息 代理人: 暫無信息
地址: 215163 *** 國省代碼: 江蘇;32
權利要求書: 查看更多 說明書: 查看更多
摘要:
搜索關鍵詞: 嘧啶 衍生物 免疫原 及其 抗體 檢測 試劑盒
【說明書】:

技術領域

發明涉及免疫檢測領域,具體涉及一種5-氟尿嘧啶衍生物、5-氟尿嘧啶免疫原及其抗體與5-氟尿嘧啶檢測試劑盒。

背景技術

5-氟尿嘧啶(5-Fluorouracil,5-FU),其結構式如式(Ⅲ)所示:

5-氟尿嘧啶是尿嘧啶的類似物,是癌癥治療中最重要的化療藥物之一。通常用于結腸癌、直腸癌、胃癌、乳腺癌及胰腺癌等各種癌癥的化療方案中。該藥療效確切,可以使合成DNA的胸腺嘧啶合成酶失活,也可摻入RNA中導致致死合成,5-FU在體內的代謝、清除與多種因素有關,藥代動力學具有非線性和易飽和性的特點,毒性反應和療效具有高度的個體內和個體間差異。5-FU常常伴隨嚴重的副作用,包括骨髓抑制、粘膜炎、皮炎、惡心、嘔吐、腹瀉、心臟毒性甚至死亡。使用5-FU進行治療的患者血藥濃度的臨床監測對于5-FU劑量調整、療效優化和減少嚴重不良反應都具有重要的臨床意義。

目前,國內外監測5-FU血藥濃度主要使用的是高效液相色譜(HPLC)法等傳統方法,但是這些方法不適合臨床應用,國內雖然已有使用膠乳增強免疫比濁法,可應用于生化分析儀的5-氟尿嘧啶測定試劑盒上市,但是遠不能滿足日益增長的臨床檢測需求。目前市場上缺乏穩定性好、靈敏度高、特異性強的5-氟尿嘧啶檢測試劑,尤其是質量好的自動化檢驗試劑,因此,研發生產質量達到臨床要求、實用性強、性價比高,可應用于全自動生化分析儀的5-氟尿嘧啶測定試劑已成為國內外體外診斷試劑行業的熱點。

發明內容

本發明的主要目的在于提供一種5-氟尿嘧啶衍生物、5-氟尿嘧啶免疫原及其抗體與5-氟尿嘧啶檢測試劑盒,以提供一種穩定性好、特異性強,適用于全自動生化分析的5-氟尿嘧啶測定試劑。

為了達到上述目的,根據本發明的一個方面,提供了一種5-氟尿嘧啶衍生物,具有式(Ⅰ)所示的結構:

其中,R為-(CH2)n-COO-,n為1至20之間的整數。具有該結構的5-氟尿嘧啶衍生物具備制備成具有免疫原性的免疫原的基本結構,為制備新的5-氟尿嘧啶檢測試劑提供了結構基礎。在本發明中,優選當n=1時的5-氟尿嘧啶衍生物,此時,R為-CH2-COO-。

根據本發明的再一方面,還提供了一種5-氟尿嘧啶免疫原,具有式(Ⅱ)所示的結構式:

其中,R為連接基團-(CH2)n-COO-,n是1至20之間的整數,載體為具有免疫原性的蛋白質或多肽。包括5-氟尿嘧啶衍生物分子結構和具有免疫原性的蛋白質或多肽的本發明的5-氟尿嘧啶免疫原,免疫原性高,能夠刺激動物機體產生免疫應答,產生高效價的抗5-氟尿嘧啶特異性抗體,且具有很強的反應原性,適合作為體外檢測5-氟尿嘧啶含量的競爭性試劑。

上述5-氟尿嘧啶免疫原上的載體,由于免疫原性載體一般是蛋白質或多肽,理論上其他足夠大的具備免疫原性的物質也可以作為載體,但通常情況下選用蛋白質作為載體。最常用的免疫原性載體包括血清蛋白,血藍蛋白(KLH)和甲狀腺球蛋白。在本發明中,上述載體包括但不僅限于血清蛋白、血藍蛋白或甲狀腺球蛋白中的任意一種。血清蛋白、血藍蛋白或甲狀腺球蛋白作為載體,具有相對較高的免疫原性,能夠使上述5-氟尿嘧啶免疫原具有較高的免疫原性。本發明中,更優選為血清蛋白,血清蛋白來源廣泛、簡單易得且免疫原性高。

根據本發明的又一種方面,提供了一種5-氟尿嘧啶免疫原的制備方法,該5-氟尿嘧啶免疫原由上述5-氟尿嘧啶衍生物與載體連接而成,載體為具有免疫原性的蛋白質或多肽。通過上述方法制備得到的5-氟尿嘧啶衍生物與具有免疫原性的蛋白質或多肽連接在一起,即可得到本發明的上述5-氟尿嘧啶免疫原,操作簡單,且得到的5-氟尿嘧啶免疫原的免疫原性強。

上述5-氟尿嘧啶免疫原的制備方法中,還提供了一種上述5-氟尿嘧啶衍生物的制備方法,上述5-氟尿嘧啶衍生物由5-氟尿嘧啶與Br-(CH2)n-COOH在堿性條件下發生取代反應得到。通過以5-氟尿嘧啶和Br-(CH2)n-COOH為原料,經簡單的取代反應即可制備得到上述5-氟尿嘧啶衍生物,為后續得到本發明的5-氟尿嘧啶免疫原提供了物質基礎。進一步地,當n=1時,上述5-氟尿嘧啶衍生物的制備步驟如下:

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