[發(fā)明專利]5-氟尿嘧啶衍生物、5-氟尿嘧啶免疫原及其抗體與5-氟尿嘧啶檢測(cè)試劑盒在審
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201410799522.2 | 申請(qǐng)日： | 2014-12-20 |
| 公開（公告）號(hào)： | CN104478813A | 公開（公告）日： | 2015-04-01 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 虞留明;鄧擁軍;陳麗峰;陸麗華;余琳 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人： | 蘇州博源醫(yī)療科技有限公司 |
| 主分類號(hào)： | C07D239/553 | 分類號(hào)： | C07D239/553;C07K14/765;C07K14/795;C07K14/47;C07K1/107;C07K16/44 |
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| 地址： | 215163 *** | 國(guó)省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 嘧啶 衍生物 免疫原 及其 抗體 檢測(cè) 試劑盒 | ||
1.一種5-氟尿嘧啶衍生物，其特征在于，具有式(Ⅰ)所示的結(jié)構(gòu)式：
其中，R為-(CH2)n-COO-，n為1至20之間的整數(shù)。
2.一種5-氟尿嘧啶免疫原，其特征在于，具有式(Ⅱ)所示的結(jié)構(gòu)式：
其中，R為連接基團(tuán)-(CH2)n-COO-，n是1至20之間的整數(shù)，載體為具有免疫原性的蛋白質(zhì)或多肽；優(yōu)選所述載體為血清蛋白、血藍(lán)蛋白或甲狀腺球蛋白中的任意一種。
3.一種5-氟尿嘧啶免疫原的制備方法，其特征在于，所述制備方法包括：
制備權(quán)利要求1所述的5-氟尿嘧啶衍生物：以及
將所述5-氟尿嘧啶衍生物與載體進(jìn)行連接，得到所述5-氟尿嘧啶免疫原；
其中，所述載體為具有免疫原性的蛋白質(zhì)或多肽。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于，所述5-氟尿嘧啶衍生物由5-氟尿嘧啶和Br-(CH2)n-COOH在堿性條件下經(jīng)取代反應(yīng)制備而成；優(yōu)選地，當(dāng)n＝1時(shí)，所述5-氟尿嘧啶衍生物的制備步驟如下：
5.根據(jù)權(quán)利要求3或4所述的制備方法，其特征在于，所述5-氟尿嘧啶衍生物與所述載體連接的步驟包括：
步驟S1，制備載體溶液和5-氟尿嘧啶衍生物溶液；優(yōu)選所述載體為血清蛋白、血藍(lán)蛋白或甲狀腺球蛋白中的任意一種；
步驟S2，將所述5-氟尿嘧啶衍生物溶液滴加至所述載體溶液中，得到5-氟尿嘧啶免疫原粗品；
步驟S3，對(duì)所述免疫原粗品進(jìn)行純化，得到所述5-氟尿嘧啶免疫原；優(yōu)選所述純化采用透析的方式進(jìn)行。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的制備方法，其特征在于，所述步驟S1包括：
步驟S11，將所述載體溶解于0.15～0.25M，pH?8.2～8.7的磷酸鈉緩沖液中，得到所述載體溶液；其中，所述載體與所述磷酸緩沖液的質(zhì)量體積比為3:1～5:1，優(yōu)選為4:1；
步驟S12，將所述5-氟尿嘧啶衍生物與8～12mM，pH?4.8～5.3的磷酸鉀緩沖液和有機(jī)溶劑混合，得到混合物；其中，所述有機(jī)溶劑包括二甲基甲酰胺、乙醇、1-乙基-3-(-3-二甲氨丙基)碳二亞胺和N-羥基硫代琥珀酰亞胺；
優(yōu)選所述5-氟尿嘧啶衍生物與所述1-乙基-3-(-3-二甲氨丙基)碳二亞胺和N-羥基硫代琥珀酰亞胺的質(zhì)量比為1：0.8～1.1：0.20～0.30；所述二甲基甲酰胺與所述乙醇和所述磷酸鉀緩沖液的體積比為1：0.8～1.1：1.8～2.2；更優(yōu)選所述5-氟尿嘧啶衍生物與所述二甲基甲酰胺、所述乙醇和所述磷酸鉀緩沖液的總體積的質(zhì)量體積比為95～105：6～8；
步驟S13，對(duì)所述混合物在室溫下進(jìn)行攪拌20～40min，得到所述5-氟尿嘧啶衍生物溶液。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的制備方法，其特征在于，所述步驟S2中包括：
步驟S21，將所述5-氟尿嘧啶衍生物溶液滴加至所述載體溶液中，得到混合溶液；
步驟S22，對(duì)所述混合溶液進(jìn)行低溫?cái)嚢瑁玫剿雒庖咴制罚?/p>
其中，所述5-氟尿嘧啶衍生物與所述載體的質(zhì)量比為0.8～1.1：0.8～1.1；所述低溫?cái)嚢璧臏囟葹?～8℃，所述低溫?cái)嚢璧臅r(shí)間大于等于24h。
8.一種抗5-氟尿嘧啶抗體，所述抗5-氟尿嘧啶抗體由免疫原免疫動(dòng)物后得到，其特征在于，所述免疫原為權(quán)利要求2所述的5-氟尿嘧啶免疫原。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的抗體，其特征在于，所述抗體為多克隆抗體或單克隆抗體。
10.根據(jù)權(quán)利要求8所述的抗體，其特征在于，所述抗體為完整的蛋白或者能夠與所述免疫原特異性結(jié)合的多肽片段。
11.根據(jù)權(quán)利要求8所述的抗體，其特征在于，所述免疫原免疫的所述動(dòng)物包括兔、山羊、小鼠、綿羊、豚鼠或馬中任意一種。
12.一種5-氟尿嘧啶檢測(cè)試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包括權(quán)利要求1所述的5-氟尿嘧啶衍生物和/或權(quán)利要求8至11中任一項(xiàng)所述的抗5-氟尿嘧啶抗體。
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