[發明專利]抗PD-L1全人抗體及其應用

有效

• 申請號: 201410798817.8
• 申請日: 2014-12-19
• 公開（公告）號: CN105777906B
• 公開（公告）日: 2019-04-23
• 發明（設計）人: 欒彥;王敏;彭建建;馬樹立;馬慧;李香;傅士龍;秦頌兵;汪皛皛;徐霆
• 申請（專利權）人: 蘇州丁孚靶點生物技術有限公司
• 主分類號: C07K16/28
• 分類號: C07K16/28;C12N15/13;C12N15/63;A61K39/395;A61P35/00;A61P31/12;A61P31/14;A61P31/18;A61P31/20;G01N33/574;G01N33/569
• 代理公司: 上海巔石知識產權代理事務所(普通合伙) 31309
• 代理人: 張琤

本發明涉及抗PD?L1全人抗體及其應用，具體地，本發明通過酵母展示技術篩選到能夠特異性結合PD?L1的全人抗體，并通過親和力成熟進一步改善了抗體的親和力。本發明的抗PD?L1全人抗體特異性好，親和力高，穩定性好，可以通過和活化的T細胞結合增強T細胞的活化作用，并對腫瘤生長具有顯著的抑制作用。本發明還涉及該抗PD?L1全人抗體用于診斷、治療與PD?L1相關的腫瘤的用途。

技術領域

本發明屬于醫藥生物領域，涉及抗PD-L1全人抗體及其醫藥用途。

背景技術

T細胞在對外源抗原做出應答時需要抗原遞呈細胞APC向靜止的T淋巴細胞提供兩個信號：第一個信號是：T細胞借助TCR識別與MHC分子結合的抗原肽，通過TCR/CD3復合體傳遞抗原識別信號；第二信號是：由一系列的協同刺激分子提供；這樣T細胞才能正常的活化，從而產生正常的免疫應答。根據第二信號產生效應不同，可將協同刺激分子分為正性共刺激分子和負性共刺激分子，正性和負性協同刺激信號的調節及兩者之間的平衡在機體免疫應答的整個過程中起著重要的調節作用。

PD-1是CD28受體家族的一員，該家族還包括CTLA4,CD28,ICOS和BTLA。該家族的最初成員CD28和ICOS是通過添加單克隆抗體后可以增加T細胞增殖的功能而發現的(Hutloff等(1999)Nature 397:263-266；Hansen等(1980)Immunogenics 10:247-260)。PD-1的配體包括PD-L1和PD-L2，已有的研究結果表明，受體和配體結合后會下調T細胞的活化和相關細胞因子的分泌(Freeman等(2000)J Exp Med 192:1027-34；Latchman等(2001)Nat Immunol2:261-8；Carter等(2002)Eur J Immunol 32:634-43；Ohigashi等(2005)Clin cancer Res11:2947-53)。

PD-L1(B7-H1)是細胞表面糖蛋白，屬于B7家族，具有IgV和IgC樣區、跨膜區及胞漿區尾部。該基因于1999年首次被發現并克隆(Dong H等(1999)Nat Med 5:1365-1369)，它與T細胞上的受體PD1相互作用，在免疫應答的負性調控方面發揮著重要作用。PD-L1除了和T細胞上表達的PD-1作用外，在T細胞上表達的PD-L1可以和APC上的CD80相互作用傳導負向信號，抑制T細胞的功能。PD-L1除了在巨噬細胞譜系的細胞上表達外，在人類正常的組織中表達量較低，但是在一些腫瘤細胞系上有卻有著較高的表達，例如：肺癌，卵巢癌，結腸癌和黑色素瘤(Iwai等(2002)PNAS 99:12293-7；Ohigashi等(2005)Clin Cancer Res 11:2947-53)。已有的結果顯示，腫瘤細胞高表達的PD-L1通過增加T細胞的凋亡從而在腫瘤的免疫逃逸中起著重要的作用。研究者發現，轉染PD-L1基因的P815腫瘤細胞系在體外可抵制特異性CTL的裂解，將其接種小鼠體內后具有更強的致瘤性和侵襲性。這些生物學特性均可通過阻斷PD-L1而逆轉。敲除PD1基因的小鼠，阻斷PD-L1/PD-1通路，則接種腫瘤細胞不能形成腫瘤(Dong H等(2002)Nat Med 8:793-800)。

本領域仍需要能夠與PD-L1高親和性結合、并且能夠阻斷PD-1與PD-L1結合的抗PD-L1抗體。

發明內容

本發明的發明人利用酵母展示技術，通過篩選和親和力成熟得到了具有良好特異性、較高的親和性和穩定性的抗PD-L1全人抗體，由此完成了本發明。

本發明第一方面涉及抗PD-L1抗體或其抗原結合部分，其包括選自于如下一組的CDR區：

(1)重鏈CDR1、CDR2、CDR3的序列分別如SEQ ID NO：1-3所示，輕鏈CDR1、CDR2、CDR3的序列分別如SEQ ID NO：4-6所示，或分別與上述序列的同一性大于70％、80％、85％、90％、95％的序列；