[發明專利]伊貝母藥效活性成分的追蹤檢測方法及其藥效活性成分

有效

• 申請號: 201410790192.0
• 申請日: 2014-12-17
• 公開（公告）號: CN104458964A
• 公開（公告）日: 2015-03-25
• 發明（設計）人: 焦豪妍;湯慶發;張現濤;付曉春;楊燕軍;沈小鐘;聶陽
• 申請（專利權）人: 廣東食品藥品職業學院
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;A61K36/8966;A61K31/4375
• 代理公司: 廣州華進聯合專利商標代理有限公司 44224
• 代理人: 李海恬;萬志香

技術領域

本發明涉及一種藥物活性成分篩選的方法，特別是涉及一種伊貝母藥效活性成分的追蹤檢測方法及其藥效活性成分。

背景技術

中藥是中醫學經幾千年臨床實踐的產物，其療效毋庸置疑，但由于中藥成分的多樣性和作用機制的復雜性，中藥藥效物質基礎研究一直是科研工作者研究的熱點和難點。

迄今為止，中藥藥效物質基礎研究主要是運用植物化學逐步分離、藥理活性示蹤的模式。這種研究模式取得了一定的成果，但是，在研究過程中也發現許多中藥或植物藥往往是粗提物有效，但隨著逐步分離純化，有效部位的活性越來越弱，最后甚至得不到有活性的單體成分。這給中藥藥效物質基礎的研究造成了極大的困擾。這一現象說明中藥起效的物質基礎并不是單一成分對單個靶點的作用，而往往是多成分及其間相互作用后共同作用于生物體的結果。因此，多成分及其間相互作用對于中藥藥效的發揮具有重要的影響，而通過傳統的對中藥化學成分進行逐一的單獨分離，再進行藥效追蹤的方法有一定的局限性。

伊貝母(Bulbus?fritillariae?Pallidiflorae)為百合科植物新疆貝母或伊犁貝母的干燥鱗莖，主要分布于新疆伊犁河流域。由于伊犁貝母產量高，生物堿的含量在同類貝母中相對較高，抗病力強和藥材價格低廉，特別是其祛痰和鎮咳等生理活性較川貝母略強，近年來倍受人們的關注。

而本發明人就在伊貝母的活性成分研究過程中發現了類似情況，中藥伊貝母表現了很強止咳療效，但是通過植化分離得到的主要單體物質西貝素卻比伊貝母總提取物的活性弱很多，說明傳統的對中藥化學成分進行逐一的單獨分離，再進行藥效追蹤活性成分的方法并不適合伊貝母。

發明內容

基于此，本發明的目的在于克服現有技術的缺陷，提供一種伊貝母藥效活性成分的追蹤檢測方法，該藥效追蹤檢測方法能夠很好的找到伊貝母中具有較強止咳效果的活性成分。

為實現上述目的，本發明采取以下技術方案：

一種伊貝母藥效活性成分的追蹤檢測方法，包括以下步驟：

1)成分的提取：提取伊貝母中的各種成分，所述成分為單一物質的單體和/或至少兩種物質組成的混合物；

2)多成分配合：將上述得到的各種成分進行組合，得到至少一種組合物；

3)油水分布系數的測定：分別測定上述各種成分和組合物中組分的油水分布系數；

4)活性成分的追蹤：將上述得到的油水分布系數做為活性評價指標，與標準油水分布系數進行對比檢測。符合預定油水分布系數標準的成分或組合物即為伊貝母藥效活性成分。

本發明的伊貝母藥效活性成分的追蹤檢測方法，以油水分布系數做為活性評價指標，既考慮了活性成分在體內的吸收、分布情況，又可將單一成分或多種成分總體做為考察對象，還可針對不同成分之間的組合進行考察，考慮到了藥物活性成分之間相互作用的情況，是一種很好的藥效活性成分的追蹤檢測方法。

在其中一個實施例中，所述油水分布系數的測定方法為：將各種成分或組合物加入油相與水相的混合溶液中，使其溶解并在油相和水相之間分配穩定后，測定該成分或組合物中組分在油相中的濃度和在水相中的濃度，按照下式計算其油水分布系數：

油水分布系數＝lg(C_O/C_W)

其中：C_O為在油相中的濃度，C_W為在水相中的濃度。

在其中一個實施例中，所述油相為水飽和的正辛醇，所述水相為正辛醇飽和的水。以水飽和的正辛醇做為油相，由于正丁醇與生物膜整體的溶解度參數接近，因此能夠較好的模擬生物體內情況，獲得更加準確的活性追蹤效果。

在其中一個實施例中，所述標準油水分布系數為-1至2。當油水分布系數在此范圍內，該成分或組合物具有較好的活性。

在其中一個實施例中，所述各種成分為：西貝素、伊貝母總黃酮。

在其中一個實施例中，所述西貝素濃度的檢測方法為：吸取油相或水相溶液，以高效液相色譜法測定該溶液中的西貝素含量，所述高效液相色譜法的測定條件如下：

固定相：C18反相硅膠柱；

流動相：乙腈：0.005-0.02％三乙胺水溶液的體積比為55-65∶35-45，流速為0.8-1.2ml/min；

ELSD檢測器：漂移管溫度為65-75℃,氮氣流速為1.3-1.7L·min^-1。

本發明還公開了一種采用上述的伊貝母藥效活性成分的追蹤檢測方法得到的伊貝母藥效活性成分，為西貝素和伊貝母總黃酮組合得到的組合物。