[發明專利]一種納豆激酶活性測定方法在審
| 申請號: | 201410789569.0 | 申請日: | 2014-12-18 |
| 公開(公告)號: | CN104531833A | 公開(公告)日: | 2015-04-22 |
| 發明(設計)人: | 張巖;傅亞琴;李楠;許勤虎 | 申請(專利權)人: | 天津市百奧生物技術有限公司 |
| 主分類號: | C12Q1/37 | 分類號: | C12Q1/37 |
| 代理公司: | 天津市三利專利商標代理有限公司 12107 | 代理人: | 李蕊 |
| 地址: | 300350 天津市津南*** | 國省代碼: | 天津;12 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 激酶 活性 測定 方法 | ||
1.一種納豆激酶活性測定方法,其特征在于:具體步驟如下:
(1)比色管中加入硼酸緩沖液,再加入血纖維蛋白原液,振搖均勻,在37℃水浴恒溫5分鐘,其中,硼酸緩沖液與血纖維蛋白原液的體積比為7:1-3;
(2)加入凝血酶液,其中,凝血酶液與血纖維蛋白原液的體積比為1:3-5,振搖均勻,在35-40℃水浴恒溫5-15分鐘;
(3)單號管中先加入三氯乙酸溶液,終止反應,振搖均勻,在35-40℃水浴恒溫15-30分鐘;雙號管中先加入納豆樣品稀釋液,振搖均勻,在35-40℃水浴恒溫50-80分鐘,其中,所述三氯乙酸溶液、納豆樣品稀釋液與血纖維蛋白原液的體積比為20:1:3-5;
(4)單號管中加入納豆樣品稀釋液,振搖均勻,在35-40℃水浴恒溫50-80分鐘;雙號管中加入三氯乙酸溶液,終止反應,振搖均勻,在35-40℃水浴恒溫15-30分鐘,其中,所述三氯乙酸溶液、納豆樣品稀釋液與血纖維蛋白原液的體積比為20:1:3-5;
(5)反應結束后振搖均勻,將反應液于10000-14000rpm,離心處理5-6分鐘,取上清液測定275nm處的吸光度值,經計算即得納豆激酶活性;
(6)計算公式:
NK活性(FU/g)=(AT-AB)×D/(0.01×60×0.1)
其中,AT:實驗組-雙號管吸光度值;
AB:對照組-單號管吸光度值;
D:樣品稀釋倍數。
2.根據權利要求1所述的納豆激酶活性測定方法,其特征在于:所述(AT-AB)的建議值范圍為0.04-0.08。
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